6 临床表现
6.1 皮下及肌肉囊尾蚴病
在皮下、黏膜下或肌肉中发现直径 0.5 cm~1.5 cm 的结节,数目可由1 个至数千个不等。皮下或黏膜下结节多为椭圆形或圆形(如口腔黏膜下),与周围组织无粘连,无压痛,硬度近似软骨。结节以躯干、头、颈部、上肢和下肢上端较多,常分批出现。肌肉内寄生数量多时,可出现肌肉酸痛无力、发胀、麻木或假性肌肥大症等。
6.2 脑囊尾蚴病
临床症状复杂多样,多数病程缓慢,少数病例发病急,甚至可引起猝死。神经损害的程度通常取决于囊尾蚴数目和寄生部位所致的机械性损伤、炎症和中毒反应。临床表现可有颅内压增高、神经系统定位体征、癫痫、精神障碍及记忆力下降等。80%的囊尾蚴病人首发症状为癫痫发作,可以是局灶性或全面性发作。颅内压增高者占 40%~50%,表现为头痛、头晕、恶心、呕吐、视力障碍及视乳头水肿或伴出血。囊尾蚴寄生于第四脑室者,可出现颈项强直、布鲁金斯氏征(+)等脑膜刺激征。如囊尾蚴堵塞脑脊液循环通路,可引起急性颅内压增高,导致脑疝,危及生命。
6.3 眼囊尾蚴病
多单眼受累。囊尾蚴寄生于视网膜者可引起视力障碍甚至失明,亦可导致视网膜脱落。囊尾蚴寄生于玻璃体或前房时,可有飞蚊症或黑影飘动感。寄生于眼结膜下、眼睑及眼外肌者可出现局部充血、瞬目反应增多、流泪、发痒等,并可发现囊肿。当虫体死亡后,虫体分解物的刺激可导致视网膜和脉络膜炎症,玻璃体浑浊,或并发白内障、青光眼而失明。
6.4 其他部位囊尾蚴病
囊尾蚴寄生于椎管内者由于脊髓受压迫而发生截瘫、感觉障碍、大小便失禁或尿潴留等。寄生于心脏、舌、口腔黏膜下、声带以及膈肌、肝、肺等器官时,引起相应器官的功能障碍。
7 实验室检查
7.1 病原学检测阳性
手术摘除的结节经压片检查法、囊尾蚴孵化试验或病理组织学检查发现囊尾蚴组织结构。
7.1.1 压片检查法
手术摘取皮下或肌肉组织内的结节,剥离外层的结缔组织包膜,刺破包囊后置于两载玻片之间,轻轻压平,在显微镜低倍镜下检查有无头节。囊尾蚴头节的结构与成虫头节相同,近似球形,头节上有 4 个吸盘,顶端具有顶突,顶突上分布内外两圈小钩。
7.1.2 囊尾蚴孵化试验
手术摘除的结节,轻提远离头节端外囊,剪一小口,剥离内囊,置于50%的胆汁生理盐水中,于 37 ℃ 温箱中孵化,若为活的囊尾蚴,10 min~60 min 可见头节伸出。此方法可检查囊尾蚴的存活情况。孵化 12 h 若无头节伸出,可在显微镜下观察其结构。
7.1.3 病理组织学检查
手术摘除的结节,用 10%甲醛溶液固定,然后经冲洗、用不同浓度乙醇脱水至无水乙醇、浸蜡、石蜡包埋,连续切片,厚度 7μm~10μm,经贴片、二甲苯脱蜡,苏木素-伊红染色与封片等,显微镜下观察头节的结构。
7.2 抗体检测阳性
7.2.1 方法
采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA),检测人血清或脑脊液中的囊尾蚴IgG 或IgG4 或IgM抗体(血清或脑脊液任意检测一项中的 IgG、IgG4 或 IgM 均可,用复孔检测取平均值)。IgG、IgG4 或 IgM 抗体检测的临床意义略有不同,其中,IgM 是近期感染的标志,IgG 抗体阳性提示现症感染、慢性感染或既往感染,而 IgG4 一般在治疗后逐渐消失,可用于疗效考核。
7.2.2 试剂组成
囊尾蚴诊断抗原(5 μg/mL~10 μg/mL,囊尾蚴粗抗原或囊液抗原或重组抗原)包被的96微孔板、葡萄球菌蛋白 A(SPA)或抗人 IgG(IgG4 或 IgM)酶标结合物、洗涤液(含有0.05%Tween-20 的 PBS 缓冲液)、稀释液(含有 1% 牛血清白蛋白的洗涤液)、终止液(主要成分为2mol/L 硫酸溶液)、底物 A 液(主要成分为过氧化氢)、底物 B 液(主要成分为四甲基联苯胺)、阳性对照(囊尾蚴病确诊病人血清)、阴性对照(健康人血清)组成。
7.2.3 操作步骤
1 在盛有 0.5 mL 稀释液的 1.5 mL 塑料离心管或稀释板孔中,加入5μL 待检样本混匀。
2 在包被囊尾蚴抗原的 96 微孔板中加入稀释的待检样品 100 μL/孔(复孔检测),设阳性对照 2 孔,阴性对照 3 孔,并设空白对照 2 孔,置 37 ℃ 孵育 60 min。
3 弃去孔内液体,用洗涤液洗涤 3 次,每次间隔 1 min,甩干。
4 除空白对照孔外,每孔加酶标结合物 50 μL,37 ℃ 孵育 30 min。
5 弃去孔内液体,用洗涤液洗涤 3 次,每次间隔 1 min,甩干。
6 每孔依次加入底物 A 液、底物 B 液各 50 μL,轻叩微孔板混匀,37 ℃避光放置5min~10 min。
7 每孔加入终止液 50 μL。
7.2.4 结果判读
用酶标检测仪在 450 nm 波长下,空白孔调零,测定各试验孔 OD 值。如S/N(样品孔OD值/阴性对照孔 OD 均值)≥2.1,结果判为阳性。
7.3 核酸检测阳性
7.3.1 样本处理
手术摘取疑似囊尾蚴样本(组织等)即刻送检,或置 75%乙醇中保存备用。
7.3.2 试剂组成
基因组 DNA 提取试剂盒、PCR 扩增试剂盒。
7.3.3 样本基因组的提取
按基因组 DNA 提取试剂盒说明操作。
7.3.4 操作步骤和结果判读
1 采用 PCR 方法从疑似囊尾蚴组织中检测囊尾蚴内转录间隔区(ITS)特异性基因。引物序列见表 1。
引物名称 | 引物序列 |
BD1(上游引物) | 5’-GTCGTAACAAGGTTTCCGTA-3’ |
BD2(下游引物) | 5’-TATGCTTAAATTCAGCGGGT-3’ |
2 以引物 BD1 和 BD2 进行 PCR 扩增,反应体系为 50 μL。
Taq 酶 5 U/μL 0.25 μL
10×buffer(含 15 mmol/L Mg2+) 5 μL
25 mmol/L dNTPs 4 μL
20 μmol/L BD1 1.5 μL
20 μmol/L BD2 1.5 μL
基因组 DNA 模板(约 70 ng) 2 μL
总计 50 μL
PCR 反应需设立阳性(猪囊尾蚴或猪带绦虫 DNA)、阴性(健康人基因组DNA)和空白对照(去离子灭菌水)。
3 PCR 条件如下:
94 ℃ 5 min;94 ℃ 30 s,50 ℃ 30 s,72 ℃ 1 min 共 35 个循环;72 ℃5 min;4 ℃保存待检。
注:PCR 实验符合 WS/T 230 的规定。
4 取 PCR 产物 5μL 在 1%琼脂糖凝胶中电泳后,在紫外线或凝胶成像系统下观察电泳结果,确认是否出现片段大小约为 1000 bp 的特异基因片段。PCR 产物测序后经序列比对分析,确定是否为猪囊尾蚴基因片段。
8 影像学检查
8.1 影像学检查概述
根据囊尾蚴在脑部寄生部位的不同,分为:脑实质型、脑室型、脑膜型及混合型,其中以脑实质型最多见,影像上可分为四个阶段:存活期、退变死亡期、钙化结节期及混合期。
8.2 计算机断层扫描(CT)影像表现
8.2.1 脑实质型
8.2.1.1 存活期
存活期又称为水样囊泡期,表现为圆形、类圆形低密度小囊,可单发或多发,直径为5 mm~15 mm,近似于脑脊液,囊壁薄,增强后壁无强化,囊内可见到点状偏心等或高密度头节,增强后头节无或轻度强化,发现头节表示囊尾蚴处于存活期(图 E.1)。
8.2.1.2 退变死亡期
可分为胶样囊泡期和肉芽肿结节期两个阶段,表现为小环形低密度结节或者等密度结节影,病灶周围脑组织见指状、片状低密度水肿区,增强后病灶呈厚壁环形或结节状强化(图E.2)。
8.2.1.3 钙化结节期
表现为圆形、椭圆形高密度结节,边缘清晰,可单发或多发,直径为2 mm~8 mm,周围无水肿,增强检查无强化,该期表示病灶处于非活动期(图 E.3)。
8.2.1.4 混合期
指上述三期任何两种及以上同时存在。
8.2.2 脑室型
以第四脑室多见,其次为第三脑室,CT 不易直接显示囊泡,多表现为脑室扩大,形态异常,伴阻塞性脑积水征象(图 E.4)。
8.2.3 脑膜型
少见,表现为侧裂池、鞍上池及蛛网膜下腔扩大、变形,增强后偶可见囊壁环形强化或脑膜强化征象(图 E.5)。
8.2.4 混合型
上述三型任何两种及以上同时存在。
说明:左侧基底节区、左侧海马旁回及双侧颞枕叶多发小囊状低密度影,囊内见偏心性点状等及高密度头节影,病灶边界清楚锐利,周围无水肿征象。
图 E.1 存活期 CT 影像
说明:双侧额顶枕叶见多发小环状及结节状等密度病灶,病灶边界模糊,病灶周围明显水肿征象。
说明:第四脑室内囊状低密度影,壁光滑清楚。
说明:右侧侧裂池见多个大小不等囊状低密度影,壁光滑清楚。
8.3 磁共振成像(MRI)影像表现
8.3.1 脑实质型
8.3.1.1 存活期
又称为水样囊泡期,MRI 可清晰分辨出囊尾蚴囊泡,可单发或多发,直径约4 mm~15 mm,囊液近似于脑脊液信号,头节直径约为 2 mm~3 mm,囊壁薄而光滑,T1WI 图像上囊泡呈圆形或椭圆低信号,囊内可见到点状偏心头节,头节为点状等高信号,T2WI 图像上囊泡呈圆形或椭圆形高信号,头节为低信号,FLAIR 图像上囊泡呈低信号,头节呈高信号,头节显示更清晰,行钆剂(如 Gd-DTPA)增强后 T1WI 图像上囊壁不强化或轻度薄壁环形强化,头节呈点状强化,出现头节征象,即可确定诊断,表示病灶处于存活期(图 E.6)。
8.3.1.2 退变死亡期
囊尾蚴退变死亡时,头节显示不清,囊内容物蛋白含量增多,在 T1WI 及FLAIR 图像上囊泡信号增高,T2WI 图像上信号减低,囊壁增厚,病灶周围出现进行性水肿,占位效应加重;水肿在 T1WI 图像上呈低信号,T2WI 上呈高信号,FLAIR 上呈高信号,FLAIR 对水肿区范围的显示较好,增强后病灶以呈厚壁环形强化为典型表现(图 E.7)。
8.3.1.3 钙化结节期
囊尾蚴死亡后头节消失,虫体发生纤维化或钙化,MRI 对钙化的显示不如CT 清晰,在T1WI及 T2WI 图像上均表现为低信号结节,可单发或多发,病灶周围水肿消退,表示病灶趋于静止。
8.3.1.4 混合期
指上述三期任何两种及以上同时存在。
8.3.2 脑室型
以第四脑室多见,三脑室次之,侧脑室少见。囊尾蚴囊泡在 T1WI 图像上呈低信号,T2WI图像上呈高信号,囊壁有时清晰可见,呈线样中等信号,囊内可见偏心性头节;FLAIR 上显示更清晰,增强后 T1WI 图像上囊壁及头节不强化或轻度强化。脑室内囊尾蚴可引起脑室通路梗阻,引起梗阻性脑积水(图 E.8)。
8.3.3 脑膜型
侧裂池、鞍上池及蛛网膜下腔内单发或多发分房状囊泡,可较大,直径为4 mm~20 mm,在T1WI 图像上呈低信号,T2WI 图像上呈高信号,FLAIR 上病灶显示更明显,增强后T1WI 图像上囊壁不强化或轻度强化(图 E.9)。
8.3.4 混合型
上述三型任何两种及以上同时存在。
说明:
a)T1WI 图像:右侧基底节区小囊状低信号,其内见点状等信号头节影,病灶边界清楚锐利;b)T2WI 图像:病灶呈高信号,其内见点状稍低信号头节影;
c)FLAIR 图像:病灶呈低信号,头节呈高信号,头节显示更清晰,病灶边界清楚锐利,病灶周围无水肿;d)T1WI 增强图像:病灶轻度薄壁强化,其内头节轻度点状强化。
图 E.6 存活期 MRI 影像
说明:
a)T1WI 图像:囊尾蚴囊内容物信号增高,头节显示不清,与周围水肿分界不清,表现为右侧颞叶片状低信号;
b)T2WI 增强图像:壁呈厚壁环形低信号,水肿为高信号;
c)T1WI 增强图像:病灶呈厚壁环形强化;
d)FLAIR 图像:左侧额顶叶等低信号结节病灶,周围水肿明显,呈片状高信号。
说明:
a)T1WI 图像:室间孔小囊状低信号,边界清楚锐利;
b)T2WI 图像:病灶呈高信号;
d)T1WI 增强图像:囊壁轻度强化,其内头节轻度点状强化,病灶致室间孔梗阻,双侧侧脑室梗阻性积水。 图 E.8 脑室型 MRI 影像
说明:
a)T1WI 图像:右侧侧裂池扩大,内有多房囊状低信号病灶,囊壁薄,边缘清楚锐利;
b)T2WI 图像:病灶呈高信号;
c)FLAIR 图像:病灶呈低信号,囊壁显示清晰;
d)T1WI 增强图像:病灶囊壁轻度花环状强化。
9 眼底镜检查
眼底镜下玻璃体内典型的囊虫为一灰白色球形囊泡(图 F.1),囊泡周围有金黄色反光。囊泡本身有蠕动,头部伸出时可见吸盘,缩回时囊泡上有一致密的黄白色小点。视网膜下囊虫,可见视网膜下灰白色半透明球状囊肿,表面光滑,其上有致密斑点,也可见蠕动,视网膜血管爬行其上。囊肿边缘有金黄色反光。
10 诊断性治疗
对脑囊尾蚴病诊断性治疗有效。
12 诊断
12.1 疑似病例
12.1.1 皮下及肌肉囊尾蚴病
符合 流行病学史,且符合皮下及肌肉囊尾蚴临床表现:在皮下、黏膜下或肌肉中发现直径 0.5 cm~1.5 cm 的结节,数目可由1 个至数千个不等。皮下或黏膜下结节多为椭圆形或圆形(如口腔黏膜下),与周围组织无粘连,无压痛,硬度近似软骨。结节以躯干、头、颈部、上肢和下肢上端较多,常分批出现。肌肉内寄生数量多时,可出现肌肉酸痛无力、发胀、麻木或假性肌肥大症等。
12.1.2 脑囊尾蚴病
1.符合流行病学史,且符合脑囊尾蚴临床表现:临床症状复杂多样,多数病程缓慢,少数病例发病急,甚至可引起猝死。神经损害的程度通常取决于囊尾蚴数目和寄生部位所致的机械性损伤、炎症和中毒反应。临床表现可有颅内压增高、神经系统定位体征、癫痫、精神障碍及记忆力下降等。80%的囊尾蚴病人首发症状为癫痫发作,可以是局灶性或全面性发作。颅内压增高者占 40%~50%,表现为头痛、头晕、恶心、呕吐、视力障碍及视乳头水肿或伴出血。囊尾蚴寄生于第四脑室者,可出现颈项强直、布鲁金斯氏征(+)等脑膜刺激征。如囊尾蚴堵塞脑脊液循环通路,可引起急性颅内压增高,导致脑疝,危及生命。
2.符合流行病学史,影像学检查见黄豆大小囊性病变、脑实质多发钙化等非典型异常影像。
12.1.3 眼囊尾蚴病
符合流行病学史,且符合眼囊尾蚴临床表现:多单眼受累。囊尾蚴寄生于视网膜者可引起视力障碍甚至失明,亦可导致视网膜脱落。囊尾蚴寄生于玻璃体或前房时,可有飞蚊症或黑影飘动感。寄生于眼结膜下、眼睑及眼外肌者可出现局部充血、瞬目反应增多、流泪、发痒等,并可发现囊肿。当虫体死亡后,虫体分解物的刺激可导致视网膜和脉络膜炎症,玻璃体浑浊,或并发白内障、青光眼而失明。
12.1.4 其他部位囊尾蚴病
符合流行病学史,且符合其他部位囊尾蚴病临床表现:囊尾蚴寄生于椎管内者由于脊髓受压迫而发生截瘫、感觉障碍、大小便失禁或尿潴留等。寄生于心脏、舌、口腔黏膜下、声带以及膈肌、肝、肺等器官时,引起相应器官的功能障碍。
12.1.5 混合型囊尾蚴病
符合以上任意两项及以上者。
12.2 临床诊断病例
12.2.1 皮下及肌肉囊尾蚴病
12.2.2 脑囊尾蚴病
疑似病例,同时符合以下任一项:
3.对脑囊尾蚴病诊断性治疗有效。
12.2.3 眼囊尾蚴病
12.2.4 其他部位囊尾蚴病
12.2.5 混合型囊尾蚴病
12.3 确诊病例
12.3.1 皮下及肌肉囊尾蚴病
临床诊断病例,同时符合以下任一项:
1.病原学检测阳性:手术摘除的结节经压片检查法、囊尾蚴孵化试验或病理组织学检查发现囊尾蚴组织结构。
12.3.2 脑囊尾蚴病
临床诊断病例,同时符合以下任一项:
1.病原学检测阳性:手术摘除的结节经压片检查法、囊尾蚴孵化试验或病理组织学检查发现囊尾蚴组织结构。
12.3.3 眼囊尾蚴病
临床诊断病例,同时符合以下任一项:
1.病原学检测阳性:手术摘除的结节经压片检查法、囊尾蚴孵化试验或病理组织学检查发现囊尾蚴组织结构。
12.3.4 其他部位囊尾蚴病
临床诊断病例,同时符合以下任一项:
1.病原学检测阳性:手术摘除的结节经压片检查法、囊尾蚴孵化试验或病理组织学检查发现囊尾蚴组织结构。
12.3.5 混合型囊尾蚴病
临床诊断病例,同时符合以下任一项: