4 尿亮氨酸氨基肽酶的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 化验取材
4.4 尿亮氨酸氨基肽酶的测定原理
样品中的亮氨酸氨基肽酶作用于L-亮氨酸-β-萘胺,水解产物β-萘胺与二甲氨基苯甲醛反应形成偶氮化合物,根据β-萘胺的生成量推算此酶的活性。
4.5 试剂
(1)基质缓冲液(pH6.5):称取磷酸二氢钾0.681g,溶于40ml蒸馏水中,加入L-亮氨酸-β-萘胺40mg,溶解后再加MgCl2100mg,用1mol/L NaOH调pH至6.5(约1.5ml),加蒸馏水至50ml,冰箱可保存4周。
(2)40g/L对位二甲氨基苯甲醛乙醇溶液:称对位二甲氨基苯甲醛8g溶于70%乙醇中,最后用70%乙醇加至200ml。
(3)显色剂:按需要取40g/L对位二甲氨基苯甲醛乙醇液若干ml,再加等量0.45mol/L HCl,置棕色瓶室温保存约两周。
(4)β-萘胺标准液(150μmol/L):准确称取β-萘胺盐酸盐(AR)13.5mg,溶于蒸馏水中,然后加至1L(临用前配制)。
4.6 操作方法
按表1操作。
用445nm波长,以对照管调零,读取测定管吸光度,查标准曲线即可求取酶活力单位。
4.7 正常值
(6.54±2.71)u/(g·cr)
4.8 化验结果临床意义
升高:常见于各种肾小球肾炎活动期,急性肾盂肾炎、休克、麻醉、心血管手术引起的肾脏缺血或急性肾功能衰竭,药物中毒性肾病、肾肿瘤、肾外肿瘤(如肝、胆、胰、肺、血液)等。
4.9 附注
(2)使用氨基糖苷类抗生素(庆大霉霉素、妥布霉素、多黏菌素等)、磺胺类等,可影响测定结果。