口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗

1 拼音

kǒu fú fú shì sòng nèi jūn lì jí shuāng jià huó yì miáo

2 英文参考

Dysentery Vaccine (Live) of S.flexneri and S.sonnei，Oral[2010年版药典]

3 口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗药典标准

3.1 品名

3.1.1 中文名

口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗

3.1.2 汉语拼音

Koufu Fushi Songneijun Liji Shuangjia Huoyimiao

3.1.3 英文名

Dysentery Vaccine （Live） of S.flexneri and S.sonnei，Oral

3.2 定义、组成及用途

本品系用表达福氏2a和宋内志贺菌双价菌体抗原的FS菌株，经培养收集菌体后，加入稳定剂冻干制成。用于预防细菌性痢疾。

3.3 1 基本要求

生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

3.4 2 制造

3.4.1 2.1 菌种

生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。

3.4.1.1 2.1.1  名称及来源

采用重组技术构建的、能表达福氏2a和宋内志贺菌菌体抗原的FS菌株。

3.4.1.2 2.1.2  种子批的建立

应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。

3.4.1.3 2.1.3  种子批的传代

工作种子批菌种自启开后至疫苗生产，传代应不超过5代。

3.4.1.4 2.1.4  种子批的检定

3.4.1.4.1 2.1.4.1  培养特性

FS株在固体琼脂上培养后生长里无色半透明光滑的菌落。

3.4.1.4.2 2.1.4.2  染色镜检

应为革兰氏阴性杆菌。

3.4.1.4.3 2.1.4.3  生化反应

发酵葡萄糖、甘露醇，迟缓发酵半乳糖，但不产气；不发酵乳糖、麦芽糖、蔗糖；无动力（2010年版药典三部附录XIV）。

3.4.1.4.4 2.1.4.4  血清学试验

（1）玻片凝集试验

取35～37℃培养18～20小时的培养物，与相应的福氏志贺菌群3、4，Ⅱ型参考血清和宋内志贺菌Ⅰ相参考血清，分别进行玻片凝集试验，均应在1分钟内出现凝集反应。

（2）定量凝集试验

取35～37℃培养18～20小时的培养物，以灭菌PBS（pH7.2～7.4）稀释成1.0×10⁹/ml的菌悬液，分别与福氏志贺菌群3、4，Ⅱ型参考血清和宋内志贺茵Ⅰ相参考血清做定量凝集试验，充分混合后置35～37℃过夜，以肉眼可见凝集之血清最高稀释度为凝集效价，凝集效价应不低于参考血清原效价之半。

3.4.1.4.5 2.1.4.5  豚鼠角结膜毒力试验

选用体重300～350g豚鼠（Hartely）2只，取35～37℃培养18～20小时的菌苔一接种环（直径3mm，约含5×10¹⁰个活菌）涂布于豚鼠角结膜，连续观察7天，不得出现任何炎症反应。

3.4.1.4.6 2.1.4.6  免疫力试验

选用体重14～16g小鼠40只，分为4组，每组10只，其中两组为免疫组，每只皮下注射总菌2.5×10⁹，另两组为生理氯化钠溶液对照组。共注射3次，每次间隔3天。于末次注射后第14天，用福氏2a和宋内志贺菌菌株50LD₅₀，分别攻击免疫组和对照组各一组，观察3天，保护率应大于70%。

3.4.1.4.7 2.1.4.7  免疫原性试验

将FS株接种于厚金格尔（简称厚氏）斜面或其他适宜培养基，35～37℃培养18～20小时，刮取菌苔于灭菌的PBS  （pH7.2～7.4）中，稀释至一定浓度，经耳静脉免疫体重2kg左右的家兔3只，每次0.5ml，免疫4次，间隔5～7天，4次注射的剂量分别含菌2.5×10⁸、5.0×10⁸、1.0×10⁹、2.0×10⁹，于末次注射后10～14天采血做定量凝集试验，测血清抗体效价。免疫血清对福氏2a型志贺菌的凝集效价不低于1：1280，对宋内志贺菌效价应不低于1：320，2/3家兔血清之凝集效价达到上述要求即为合格。

3.4.1.4.8 2.1.4.8  质粒DNA检测

用Kado-Liu法提取FS培养物的质粒DNA，经0.8%琼脂糖凝胶电泳法检测应呈该菌株典型的质粒图谱。应有分子质量为49MD（百万道尔顿）和74MD的两条大质粒带及另两条小质粒带。

3.4.1.5 2.1.5  菌种保存

种子批应冻干保存于8℃以下。

3.4.2 2.2 原液

3.4.2.1 2.2.1  生产用种子

工作种子批菌种检定合格后可使用2年，但每次生产前必须检查全部特性，合格后方可使用。

启开冻干工作种子批菌种，用灭菌PBS （pH7.2～7.4）或厚氏肉水复苏后铺种厚氏斜面或接种厚氏液体培养基，置35～37℃培养18～20小时；第2～3代菌种采用厚氏液体培养基或厚氏斜面，35～37℃培养6～8小时。由此制备生产用种子。

3.4.2.2 2.2.2  生产用培养基

采用厚氏液体培养基或其他适宜培养基。

3.4.2.3 2.2.3  接种和培养

将纯菌检查合格的种子液接种于培养罐内，初始浓度达4×10⁸/ml以上为宜，在适宜的温度培养。培养过程中应取样镜检，发现污染即废弃。

3.4.2.4 2.2.4  收获

在细菌对数生长期末时收获菌体，离心后将菌体混悬于已灭菌的稳定剂中，制成原液。

3.4.2.5 2.2.5  原液检定

按3.1项进行。

3.4.3 2.3 半成品

3.4.3.1 2.3.1  配制

将原液用含5%蔗糖、0.5%明胶的磷酸盐缓冲液稀释至1.0×10¹¹/ml，即为半成品。

3.4.3.2 2.3.2  半成品检定

按3.2项进行。

3.4.4 2.4 成品

3.4.4.1 2.4.1  分批

应符合“生物制品分批规程”规定。

3.4.4.2 2.4.2  分装及冻干

应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。分装后立即冻干，冻干过程中制品温度不超过30℃。干燥完毕后立即进行真空或充氮封口。

3.4.4.3 2.4.3  规格

复溶后每瓶1ml。含菌1.0×10¹¹，其中活菌数应不低于2.0×10¹⁰。

3.4.4.4 2.4.4  包装

应符合“生物制品包装规程”的规定。

3.5 3 检定

3.5.1 3.1 原液检定

3.5.1.1 3.1.1  纯菌检查

供试品接种于厚氏斜面，于35～37℃培养48小时，应无杂菌生长。

3.5.1.2 3.1.2  浓度测定

按“中国细菌浊度标准”测定浓度。

3.5.2 3.2 半成品检定

3.5.2.1 3.2.1  纯菌检查

按3.1.1项进行。

3.5.2.2 3.2.2  活菌率测定

根据“中国细菌浊度标准”比浊浓度将供试品稀释至总菌1.0×10¹¹/ml;采用平皿计数法检测活菌数，活菌率应不低于25%。

3.5.3 3.3 成品检定

除装量差异和水分测定外，应按制品标示量加入灭菌PBS （pH7.2～7.4），复溶后进行其余各项检定。

3.5.3.1 3.3.1  鉴别试验

将本品接种厚氏斜面，置35～37℃培养18～20小时后，取菌苔分别用福氏志贺菌群3、4及Ⅱ型血清和宋内志贺菌Ⅰ相血清做玻片凝集试验，应出现明显凝集反应。

3.5.3.2 3.3.2  物理检查

3.5.3.2.1 3.3.2.1  外观

应为乳白色或淡黄色的疏松体，加入灭菌PBS后应在1分钟内溶解。

3.5.3.2.2 3.3.2.2  装量差异

依法检查（2010年版药典三部附录Ⅰ A），应符合规定。

3.5.3.3 3.3.3  水分

应不高于3.0%（2010年版药典三部附录Ⅶ D）。

3.5.3.4 3.3.4  纯茵检查

按3.1.1项进行。

3.5.3.5 3.3.5  活菌数测定

采用平皿计数法检测活菌数，应不低于2.0×10¹⁰/ml。

3.5.3.6 3.3.6  免疫原性试验

取本品1瓶复溶后，接种于厚氏斜面，置35～37℃培养18～20小时，刮取菌苔予灭菌PBS （pH7.2～7.4），按2.1.4.7项进行。每10批制品抽检1批进行本试验。

3.5.3.7 3.3.7  豚鼠角结膜毒力试验

按2.1.4.5项进行。

3.5.3.8 3.3.8  安全试验

选用体重18～22g小鼠5只，并分别称重；每只灌服1.0×10¹⁰的菌量，观察7天，小鼠应健存、体重增加。如不符合上述要求，可用10只小鼠复试1次。

3.5.4 3.4 稀释剂检定

每袋稀释剂含碳酸氧钠0.1～0.2g、维生素C钠盐0.05～0.1g、甜蜜素0.05～0.1g。加灭菌注射用水50ml溶解后测定。

3.5.4.1 3.4.1  pH值

应为7.5～8.5（2010年版药典三部附录Ⅴ A）

3.5.4.2 3.4.2  微生物限度检查

依法检查（2010年版药典三部附录Ⅻ G），应符合规定。

3.6 4 保存、运输及有效期

于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为12个月。

3.7 5 使用说明

应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。

口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗使用说明

【药品名称】

通用名称：口服福氏宋内菌痢疾双价话疫苗

英文名称：Dysentery Vaccine （Live） of S.flexneri andS.sonnei，Oral

汉语拼音：Koufu Fushi Songneijun Liji Shuangjia Huoyimiao

【成分和性状】

本品系用可表达福氏2a和宋内志贺菌双价菌体抗原的FS菌株，经培养收获菌体，加入稳定剂冻干制成。为乳白色或略带黄色的疏松体。

有效成分：重组痢疾FS菌株活菌体。

辅料：应列出全部批准的辅料成分。

【接种对象】

各年龄组人员均可服用本品。

【作用与用途】

服用本疫苗后，可使机体产生免疫应答。用于预防细菌性痢疾。

【规格】

每瓶1ml，含菌1.0×10¹¹，活菌数不低于2.0×10¹⁰。

【免疫程序和剂量】

全程免疫3次，每次间隔5～7天，成人首次服用1瓶，第2次、第3次各2瓶；6～l3岁儿童服成人半量；5岁以下儿童服成人1/3量。

用50ml凉开水溶解1包稀释剂，制成稀释液。开启疫苗瓶，用所附吸管吸取稀释液少许，加入到疫苗瓶内，将复溶后的本品移入稀释液中，混匀后服用。

【不良反应】

常见不良反应：

（1）一过性轻度呕吐、腹泻，多数情况下2～3天自行消失。

（2）服用疫苗后可出现一过性发热反应。其中大多数为轻度发热反应，持续1～2天可自行缓解，一般不需处理；对于中度发热反应或发热时间超过48小时者，可给予对症处理。

罕见不良反应：

（1）严重发热反应：应给予对症处理，以防高热惊厥。

（2）持续呕吐、腹泻超过3天及腹泻次数超过5次／天以上，应给予对症处理。

极罕见不良反应：

服用疫苗后72小时内可能出现过敏性皮疹，应及时就诊。

【禁忌】

（1）已知对该疫苗的任何成分过敏者。

（2）患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者。

（3）免疫缺陷、免疫功能低下或正在接受免疫抑制治疗者。

（4）妊娠期妇女。

【注意事项】

（1）本品严禁注射！

（2）以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、过敏体质者、哺乳期妇女。

（3）本品与抗生素同时应用时可能影响疫苗的免疫效果。

（4）勿用热水服用，以保证疫苗免疫效果。

（5）本品应在空腹或半空腹时服用。

（6）急、慢性胃肠道疾患者应暂缓使用。

（7）本品为减毒活疫苗，不推荐在该疾病流行季节使用。

（8）本品与其他活疫苗的使用间隔至少1个月。

（9）严禁冻结。

【贮藏】

于2～8℃避光保存和运输。

【包装】

【有效期】

12个月。

【执行标准】

【批准文号】

【生产企业】

企业名称：

生产地址：

邮政编码：

电话号码：

传真号码：

网  址：

3.8 版本

《中华人民共和国药典》2010年版