脑脊液蛋白电泳

化验及医学检查 体液和排泄物检查 脑脊液检查

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

nǎo jǐ yè dàn bái diàn yǒng

2 英文参考

cerebrospinal fluid protein electrophoresis

3 概述

中枢神经系统发生病变时(如感染炎症肿瘤外伤出血水肿等),脑脊液中的化学成分都可能发生变化,可通过测定脑脊液中的某些化学成分的变化,作为临床诊断、治疗疾病和预后观察的依据。脑脊液蛋白成分变化就是其中之一。

4 脑脊液蛋白电泳医学检查

4.1 检查名称

脑脊液蛋白电泳

4.2 分类

体液排泄检查 > 脑脊液检查

4.3 化验取材

脑脊液

4.4 脑脊液蛋白电泳的测定原理

带电粒子在电场中的移动现象称为电泳。带负电荷的粒子向电场的正极移动;带正电荷的粒子则向负极移动。

蛋白电泳是利用不同蛋白的分子大小和表面电荷的差别,在直流电场中的不同泳动速度进行蛋白质分离蛋白电泳的速度与蛋白质分子的电荷多少、分子量的大小分子形态及等电点有关。带电荷越多泳动越快;分子量和体积越大的蛋白分子泳动速度越慢;等电点低的蛋白分子泳动快,等电点高的泳动慢。按其泳动速度可从正极端起,依次分离出白蛋白,α1、α2、β和γ球蛋白五个组

分,它们的分子量及等电点见表1。

电泳过程中电渗流从阳极向阴极流动,与蛋白电泳的方向相反,因此泳动最慢的γ-球蛋白常位于原点,甚至移向负极。

蛋白电泳支持介质的种类近年来发展很多,如琼脂糖、聚丙烯酰胺醋酸纤维素等,而以后者临床检验多用。醋酸纤维素薄膜分辨力较好,即使通电时间较短(一般0.5~1h),区带界限也很清楚。其另一优点为对蛋白质吸附很少,拖尾现象轻微,洗脱后几乎可得到无色的背景。便于扫描或洗脱定量。

4.5 试剂

(1)巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6±0.1,离子强度0.06):称取巴比妥2.21g,巴比妥钠12.36g于500ml蒸馏水中,加热溶解,待冷至室温后,再用蒸馏水补足至1L。

(2)染色液

①丽春红S染色液:称取丽春红S0.4g及三氯醋酸6g,用蒸馏水溶解,并稀释至100ml。

氨基黑10B染色液:称取氨基黑1080.1g,溶于无水乙醇20ml中,加冰醋酸5ml,甘油0.5ml,使溶解。另取磺基水杨酸2.5g,溶于74.5ml蒸馏水中,再将二液混合摇匀。

(3)漂洗

①5%(V/V)醋酸溶液:适用于丽春红染色的漂洗

甲醇45ml、冰醋酸5ml和蒸馏水50ml,混匀。适用于氨基黑10B染色的漂洗

(4)透明液:称取柠檬酸(C6H6Na3O7·2H2O)21g和N-甲基-2-吡咯烷酮150g,加蒸馏水溶解,并稀释至500ml。亦可选用十氢萘或液体石蜡透明。

(5)0.4mol/L氢氧化钠溶液

4.6 操作方法

使用醋酸纤维素膜操作法。

4.7 正常值

前清蛋白 0.02~0.06;

清蛋白 0.55~0.66;

球蛋白α1 0.03~0.08;

α2 0.06~0.09;

β 0.10~0.18;

γ 0.04~0.13。

4.8 化验结果临床意义

升高:前清蛋白升高,见于先天性或梗阻性脑积水,脑萎缩等;清蛋白升高,见于椎管内阻塞、脑肿瘤等;α球蛋白升高,见于脑部急性炎症(如细菌性脑膜炎脊髓灰质炎等);β球蛋白升高,见于小脑萎缩脊髓小脑变性肌萎缩侧索硬化症动脉硬化和脑血栓等;γ球蛋白升高,见于脑瘤、多发性脑膜炎麻痹性痴性痴呆结节病及慢性脑膜炎等。

4.9 附注

(1)每次电泳时应交换电极,可使两侧电泳槽内缓冲液pH值维持在一定水平。然而,每次使用薄膜的数量可能不等,所以其缓冲液经多次使用后,就将缓冲液弃去。

(2)电泳缓冲液的液面要保持一定高度,过低可能会增加γ-球蛋白的电渗现象(向阴极移动)。同时电泳槽两侧的液面应保持一水平面,否则,通过薄膜时有虹吸现象,将会影响蛋白分子的泳动速度。

(3)电泳失败的原因:①电泳图谱不整齐:点样不均匀、薄膜未完全浸透或温度过高致使膜面局部干燥水分蒸发缓冲液变质;电泳时薄膜放置不正确,使电流方向不平行;②蛋白各组分分离不佳:点样过多、电流过低、薄膜结构过分细密、透水性差、导电差等;③染色后白蛋白中间着色浅:由于染色时间不足或染色液陈旧所致;若因蛋白含量高引起,可减少血清用量或延长染色时间,一般以延长2min为宜。若时间过长,球蛋白百分比上升,A/G比值会下降;④薄膜透明不完全:将标本放入烘箱,温度未达到90℃以上,透明液陈旧和浸泡时间不足等;⑤透明膜上有气泡,玻璃片上有油脂,使薄膜部分脱开或贴膜时滚动不佳。

4.10 相关疾病

脊髓灰质炎肌萎缩侧索硬化麻痹性痴呆痴呆结节病

编辑:banlang 审核:sun
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