2 英文参考
Urine—Determination of chromium—Spectrophotometric method
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 36—1996《尿中铬的分光光度测定方法》(Urine—Determination of chromium—Spectrophotometric method)由中华人民共和国卫生部于1996年10月14日发布,自1997年05月01日起实施。
6 4 试剂
本标准所用试剂除另有说明者外,均为分析纯试剂。
4.2 硫酸.ρ20=1.84 g/mL。
4.3 高氯酸,ρ20=1.67 g/mL。
4.4 磷酸,ρ20=1.68 g/mL。
4.5 氨水,ρ20=0.90 g/mL。
4.8 叠氮化钠溶液,5 g/L。
4.9 甲基橙溶液,1 g/L。
4.10 二苯碳酰二肼溶液,0.4 g/L:称取0.1 g二苯碳酰二肼溶于50 mL95%(v/v)乙醇中,再加入200 mL 1+9硫酸,摇匀。贮存于棕色瓶中,于冰箱保存,可使用一个月。
4.11 铬标准溶液:称取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾(K2Cr2O7)0.1415 g,用水溶解,移入容量瓶中稀释到500 mL。此溶液1 mL=0.1 mg铬。使用时逐级稀释成1 mL=10.0 μg铬标准应用液。
4.12 质控样:用标准尿样、加标的模拟尿、加标的正常人混合尿或接触者混合尿作质控样。
8 6 分析步骤
8.1 6.1 样品处理
6.1.1 取50 mL比重为1.010~1.030尿样,置于锥形瓶中,同时取50 mL水(4.1)做试剂空白,加5 mL硫酸(4.2),于电热板上消化至刚炭化时取下,冷却,加2 mL高氯酸(4.3)。
6.1.2 继续消化至液体剩下1 mL左右。取下冷却后加30 mL水(4.1)及1滴甲基橙(4.9),用氨水(4.5)调至黄色,再用1+3硫酸调到刚变红色。加0.15 mL磷酸(4.4),1滴高锰酸钾溶液(4.7),于电炉上煮沸约10 min。溶液应保持淡紫色,如溶液呈棕色可补加高锰酸钾溶液(4.7),趁沸滴加叠氮化钠溶液(4.8)使溶液无色透明,再煮沸2 min。冷却后移入50 mL比色管中,加水(4.1)至刻度。
8.2 6.2 标准曲线的绘制
6.2.1 取6只200 mL锥形瓶按下表配制标准管。
铬标准管的配制
管 号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
标准应用液(4.11),mL | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.7 | 1.0 |
水,mL | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
硫酸(4.2),mL | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
铬的含量,μg | 0 | 1 | 3 | 5 | 7 | 10 |
6.2.2 各锥形瓶放在电热板上消化至液体剩下约10 mL,取下,冷却,加2 mL高氯酸(4.3)。然后按6.1.2 条继续操作。
6.2.3 加1 mL二苯碳酰二肼溶液(4.10),混匀。20 min后在540 nm处,用30 mm比色杯,以零管作参比,测量吸光度。
6.2.4 以铬含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
8.3 6.3 样品测定
取6.1.2条制备的稀释至50 mL的样品溶液,按6.2.3条操作,测量吸光度,在标准曲线上查出样品溶液中铬含量。在测定前后以及每测定10个样品后,测定一次质控样。
9 7 计算
7.1 按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数k。
7.2 按式(2)计算尿中铬的浓度。
式中:X——尿中铬的浓度,mg/L;
m——由标准曲线上查出的铬含量,μg;
V——分析时所取尿样体积,mL。
10 8 说明
8.1 本法的检测限,取50 mL尿样时为0.008 mg/L;测定范围:0.008~0.200 mg/L;精密度:CV=4.6%~8.2%(尿铬浓度0.022~0.140 mg/L,n=6)。准确度:尿样加标回收率=92.0%~95.6%。
8.2 接触者尿样采集时间不限。采尿样时要脱离现场环境,换下工作服,洗手,以防铬尘污染。
8.3 铬与二苯碳酰二肼显色时,硫酸浓度应控制在0.05~0.30 mol/L。酸度低,显色慢,高于0.30 mol/L也会使显色减弱。本方法在最后的50 mL测定溶液中酸度为0.20 mol/L。在上述操作条件下15 min显色完全,颜色在90 min内保持稳定。