酸性磷酸酶

化验及医学检查

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

suān xìng lín suān méi

2 英文参考

acid phosphatase

酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内。

溶酶体稳定完整时,底物不易渗入,ACP活力微弱或无活性,经固定,在合适pH条件下,膜本身变为不稳定,逐渐改变其渗透性,底物可以渗入,酶活力被显示。

ACP在酸性条件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸钠磷酸根解离出来,进而与溶液硝酸铅结合形成磷酸铅沉淀,因其是难溶解的无色沉淀物,需要与黄色的硫化铵作用,生成棕黑色PbS沉淀而被显示出来。

3 血清酸性磷酸酶

3.1 英文缩写

ACP

3.2 标本采集

静脉血2ml,2h内分离血清进行测定,或加入适量的酸性稳定剂,2~8℃可保存7天。

3.3 正常参考值

Bodanaky法 0~1.1 U

King-Armstrong 法1~4 U

3.4 临床意义

酸性磷酸酶(ACP)是由两个相同的亚单位构成的糖蛋白,存在于前列腺、肝、肾、骨等各种组织细胞中,当细胞损伤时,ACP 释放入血。正常人血浆ACP主要来自红细胞白细胞血小板血清酸性磷酸酶活性不受酒石酸抑制,而来自前列腺的异构酶,又称前列腺酸性磷酸酶(PAP),最适pH为5,能水解磷酸脂,其活性可被酒石酸抑制,根据这一特性可测定出血清中的ACP。

增高见于:前列腺癌特别是转移前列腺癌,ACP明显增高,而PAP对前列腺癌的诊断更敏感前列腺肥大、前列腺炎血清ACP可增高;变形性骨炎甲状旁腺功能亢进、溶血性疾病、急慢性粒细胞性白血病急性尿潴留等,ACP也可增高。

4 精浆酸性磷酸酶

磷酸苯二钠法

4.1 原理

酸性磷酸酶在酸性条件下分解磷酸苯二钠产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用,经铁氰化钾氧化成红色醌的衍生物,根据红色深浅测出酶活力的高低。

4.2 试剂

1、0.2mol/L枸掾酸缓冲液(pH4.9)

2、0.01mol/L磷酸苯二钠基质

3、 碱性溶液

4、 铁氰化钾溶液

精浆用等渗盐水稀释1000倍后按表操作

4.3 酸性磷酸酶测定步骤

测定管

对照管

稀释精浆(ml)

0.01

-

枸掾酸缓冲液(ml)

0.5

0.5

37℃水浴5min

预温至37℃基质液(ml)

0.5

0.5

混匀37℃水浴15min

碱性溶液(ml)

1.0

1.0

氰化钾溶液(ml)

1.5

1.5

混匀,510nm波长,对照管调零点读取吸光度。

4.4 结果及参考值

以测定管吸光度-对照管吸光度,查标准曲线求酶活力

参考值:48.8-208.6μ/ml

4.5 临床意义

精浆酸性磷酸酶活力高低可反映前列腺功能精浆酸性磷酸酶活力下降,说明前列腺功能低下,如其活力显著增高,对于诊断前列腺癌前列腺良性增生有重要意义。

5 酸性磷酸酶染色(ACP)

5.1 原理

血细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下,将基质中的磷酸萘酚AS-BI水解,释放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI与六偶氮付品红偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内,如果血细胞的胞质呈红色为阳性反应,无红色为阴性反应。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制备2份基质液,一份再加入适量L-酒石酸,另一份不加L-酒石酸。取两张相同标本的涂片,分别用这2种不同基质液作酸性磷酸酶染色。如果血细胞内的酸性磷酸酶耐L-酒石酸抑制的都呈阳性反应。如果不耐L-酒石酸抑制的,不加L-酒石酸的呈阳性反应,而加L-酒石酸的呈阴性反应

5.2 标本采集

选择髂前上棘或髂后上棘或腰椎棘突或胸骨骨髓穿刺,抽取骨髓液0.1~0.2ml,制成薄涂片。

5.3 正常参考值

原始粒细胞阴性;早幼粒、中幼粒和晚幼粒细胞中度阳性成熟中性粒细胞阳性;幼稚及成熟单核细胞弱至强阳性;淋巴细胞极弱阳性浆细胞及原核细胞中度阳性血小板阳性;幼红细胞成熟红细胞则为阴性

5.4 结果判断

阳性结果为胞质中出现鲜红色颗粒沉淀:①(一)胞质无色。 ②(+)胞质出现淡红色颗粒。③(++)胞质布满鲜红色颗粒。④(+++)胞质充满深红色颗粒。

5.5 正常血细胞的染色反应

粒细胞单核细胞淋巴细胞、巨核细胞血小板浆细胞、巨噬细胞阳性

5.6 临床意义

1)帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞,前者酸性磷酸酶染色阳性反应,后者为阴性

2)帮助诊断多毛细胞白血病,多毛细胞白血病时多毛细胞酸性磷酸酶染色阳性反应,此酶耐L-酒石酸的抑制作用淋巴肉瘤细胞慢性淋巴细胞白血病淋巴细胞酸性磷酸酶染色也呈阳性反应,但此酸可被L-酒石酸抑制

3)网状细胞吞噬细胞组织细胞单核细胞均呈阳性反应,故该试验有助于急性单核细胞性白血病组织细胞性白血病淋巴瘤恶性组织细胞病的诊断。

4)帮助鉴别T淋巴细胞B淋巴细胞T淋巴细胞阳性反应医学敎^育^网收集整理,而B淋巴细胞阴性反应

6 抗酒石酸酸性磷酸酶染色

酸性磷酶(ACP)与细胞许多生理功能和病理变化有关。用聚丙酰胺凝胶电泳证明,血细胞的ACP,由7种同工酶组成(ACP、0、1、2、3、3b、4、5、)。在某些血液病时,同功酶的出现与疾病特点和占优势的细胞类型有关。1970年发现毛细胞胞浆里含有一种能对抗酒石酸抑制作用的ACP,经证明为ACP5,并认为用细胞化学染色技术显示此酶,在毛细胞白血病的诊断中有重要意义。如果患者细胞为中度或弱阳性反应,则不能诊断为毛细胞白血病。毛细胞的酶反应积分值与患者白细胞总数和毛细胞绝对数量有关,但只要有少数毛细胞(2个以上)为强阳反应,就可考虑诊断为毛细胞白血病

编辑:banlang 审核:sun
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