醋酸AS-D茶酚脂酶染色

血细胞化学染色 化验及医学检查

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

cù suān AS-Dchá fēn zhī méi rǎn sè

2 英文参考

Acetate AS-D catechol esterase staining

3 概述

氯乙酸萘酚酯酶是粒细胞肥大细胞的标志酶,主要存在粒细胞溶酶体内,此酶与过氧化酶在中性粒细胞中均呈阳性反应,但此酶形成的产物比过氧化酶更为特异。

4 醋酸AS-D茶酚脂酶染色医学检查

4.1 检查名称

醋酸AS-D茶酚脂酶染色

4.2 分类

血细胞化学染色

4.3 醋酸AS-D茶酚脂酶染色的测定原理

氯乙酸AS-D萘酚被细胞特异性酯酶(SE)水解,产生AS-D萘酚,后者与重氮盐(坚牢紫酱GBC)偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于胞浆中。

4.4 试剂

(1)甲醛-甲醇固定液:10%甲醛甲醇按1∶9混合。

(2)Veronal乙乙酸缓冲液

甲液:乙酸钠(含3H2O) 1.94g

巴比妥钠 2.94g

蒸馏水 加至100ml

乙液:0.1mol/L盐酸:取盐酸(比重1.19)0.85ml,加蒸馏水至100ml。

取甲液50ml,乙液45ml,再加蒸馏水135ml,用1mol/L盐酸调整pH至7.5~7.6。

(3)作用液:

氯乙酸AS-D萘酚 10mg

丙酮 0.5ml

蒸馏水 5ml(使溶解

Veronal乙乙酸缓冲液 5ml

坚牢紫酱GBC 10mg

溶解,不必过滤立即染色,一次用完。

4.5 操作方法

(1)固定:新鲜干燥涂片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸气薰5~10min。

(2)水洗,凉干。

(3)放入作用液,37℃ 30min。

(4)水洗,苏木素染液复染1~2min。

(5)水洗,晾干,镜检。

4.6 正常值

粒细胞系统的原粒细胞阴性反应,自早幼粒细胞成熟中性粒细胞均为阳性反应酶活性并不随细胞成熟而增强。肥大细胞阳性反应单核细胞淋巴细胞浆细胞、幼红细胞血小板细胞均呈阴性反应

4.7 化验结果临床意义

协助鉴别急性白血病类型:急性粒细胞白血病时,白血病性原始粒细胞可出现阳性反应;急性单核细胞白血病急性淋巴细胞白血病时,白血病细胞阴性反应

4.8 附注

(1)氯乙酸萘酚酯酶(NCE)最佳反应pH为7.0~7.6之间。它不被氟化钠抑制

(2)严格遵守操作规程,如增加温度和pH值可导致氯乙酸苦酚分解,从而在细胞内产生明显的非特异性酯酶反应

(3)除本法采用新品红外,还有人选用坚固紫或坚固蓝。

4.9 相关疾病

单核细胞白血病急性淋巴细胞白血病

编辑:banlang 审核:sun
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