1 拼音
G B Z / T 3 0 0 . 1 6 0 — 2 0 1 7 gōng zuò chǎng suǒ kōng qì yǒu dú wù zhì cè dìng dì 1 6 0 bù fèn : xǐ yī fěn méi
3 基本信息
ICS 13.100
C 52
中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T 300.160—2017 工作场所空气有毒物质测定 第160部分:洗衣粉酶(Determination of toxic substances in workplace air—Part 160: Enzymes in washing powder)由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会于2017年11月09日《关于发布〈工作场所空气有毒物质测定 第1部分:总则〉等96项推荐性国家职业卫生标准的通告》(国卫通〔2017〕24号)发布,2018年05月01日起实施。本标准代替 GBZ/T 160.81—2004。
4 发布通知
关于发布《工作场所空气有毒物质测定 第1部分:总则》等96项推荐性国家职业卫生标准的通告
国卫通〔2017〕24号
现发布《工作场所空气有毒物质测定 第1部分:总则》等96项推荐性国家职业卫生标准,编号和名称如下:
上述标准自2018年5 月1日起施行,被代替的标准同时废止。
特此通告。
编号 | 标准名称 | 代替标准 | |
1 | GBZ/T 300.1—2017 | ||
2 | GBZ/T 300.2—2017 | GBZ/T 160.1—2004 | |
3 | GBZ/T 300.3—2017 | GBZ/T 160.2—2004 | |
4 | GBZ/T 300.4—2017 | GBZ/T 160.3—2004 | |
5 | GBZ/T 300.5—2017 | GBZ/T 160.4—2004 | |
6 | GBZ/T 300.6—2017 | GBZ/T 160.5—2004 | |
7 | GBZ/T 300.7—2017 | GBZ/T 160.6—2004 | |
8 | GBZ/T 300.8—2017 | ||
9 | GBZ/T 300.9—2017 | GBZ/T 160.7—2004 | |
10 | GBZ/T 300.10—2017 | GBZ/T 160.8—2004 | |
11 | GBZ/T 300.11—2017 | GBZ/T 160.9—2004 | |
12 | GBZ/T 300.13—2017 | GBZ/T 160.83—2007 | |
13 | GBZ/T 300.15—2017 | GBZ/T 160.10—2004 | |
14 | GBZ/T 300.16—2017 | GBZ/T 160.12-2004 | |
15 | GBZ/T 300.17—2017 | GBZ/T 160.13-2004 | |
16 | GBZ/T 300.18—2017 | GBZ/T 160.14-2004 | |
17 | GBZ/T 300.19—2017 | GBZ/T 160.15—2004 | |
18 | GBZ/T 300.21—2017 | GBZ/T 160.17—2004 | |
19 | GBZ/T 300.22—2017 | GBZ/T 160.18—2004 | |
20 | GBZ/T 300.23—2017 | GBZ/T 160.19—2004 | |
21 | GBZ/T 300.24—2017 | GBZ/T 160.20—2004 | |
22 | GBZ/T 300.25—2017 | GBZ/T 160.21—2004 | |
23 | GBZ/T 300.26—2017 | GBZ/T 160.22—2004 | |
24 | GBZ/T 300.27—2017 | ||
25 | GBZ/T 300.28—2017 | GBZ/T 160.23-2004 | |
26 | GBZ/T 300.29—2017 | GBZ/T 160.24-2004 | |
27 | GBZ/T 300.30—2017 | GBZ/T 160.84—2007 | |
28 | GBZ/T 300.31—2017 | GBZ/T 160.25—2004 | |
29 | GBZ/T 300.32—2017 | GBZ/T 160.26—2004 | |
30 | GBZ/T 300.33—2017 | ||
31 | GBZ/T 300.34—2017 | ||
32 | GBZ/T 300.35—2017 | GBZ/T 160.27—2004 | |
33 | GBZ/T 300.37—2017 | GBZ/T 160.28—2004 | |
34 | GBZ/T 300.38—2017 | GBZ/T 160.33—2004 | |
35 | GBZ/T 300.43—2017 | GBZ/T 160.29—2004 | |
36 | GBZ/T300.45—2017 | GBZ/T 160.30—2004 | |
37 | GBZ/T 300.46—2017 | ||
38 | GBZ/T 300.47—2017 | GBZ/T 160.31-2004 | |
39 | GBZ/T 300.48—2017 | GBZ/T 160.32-2004 | |
40 | GBZ/T 300.51—2017 | GBZ/T 160.33—2004 | |
41 | GBZ/T 300.52—2017 | ||
42 | GBZ/T 300.53—2017 | GBZ/T 160.34—2004 | |
43 | GBZ/T 300.54—2017 | GBZ/T 160.35—2004 | |
44 | GBZ/T 300.58—2017 | GBZ/T 160.85—2007 | |
45 | GBZ/T 300.59—2017 | ||
46 | GBZ/T 300.60—2017 | GBZ/T 160.38—2007 | |
47 | GBZ/T 300.61—2017 | GBZ/T 160.39—2007 | |
48 | GBZ/T 300.62—2017 | GBZ/T 160.40—2004 | |
49 | GBZ/T 300.64—2017 | ||
50 | GBZ/T 300.65—2017 | GBZ/T 160.41—2004 | |
51 | GBZ/T 300.66—2017 | GBZ/T 160.42—2007 | |
52 | GBZ/T 300.68—2017 | ||
53 | GBZ/T 300.69—2017 | GBZ/T 160.43—2004 | |
54 | GBZ/T 300.73—2017 | GBZ/T 160.45—2007 | |
55 | GBZ/T 300.77—2017 | ||
56 | GBZ/T 300.78—2017 | GBZ/T 160.46—2004 | |
57 | GBZ/T 300.80—2017 | ||
58 | GBZ/T 300.81—2017 | GBZ/T 160.47-2004 | |
59 | GBZ/T 300.82—2017 | ||
60 | GBZ/T 300.83—2017 | ||
61 | GBZ/T 300.84—2017 | GBZ/T 160.48—2004 | |
62 | GBZ/T 300.85—2017 | ||
63 | GBZ/T 300.86—2017 | ||
64 | GBZ/T 300.88—2017 | ||
65 | GBZ/T 300.93—2017 | GBZ/T 160.51—2007 | |
66 | GBZ/T 300.97—2017 | GBZ/T 160.82—2007 | |
67 | GBZ/T 300.99—2017 | GBZ/T 160.54—2007 | |
68 | GBZ/T 300.101—2017 | ||
69 | GBZ/T 300.103—2017 | GBZ/T 160.55—2007 | |
70 | GBZ/T 300.104—2017 | ||
71 | GBZ/T 300.110—2017 | GBZ/T 160.57—2004部分替GBZ/T 160.51—2007 | |
72 | GBZ/T 300.112—2017 | GBZ/T 160.59—2004 | |
73 | GBZ/T 300.114—2017 | ||
74 | GBZ/T 300.115—2017 | ||
75 | GBZ/T 300.118—2017 | GBZ/T 160.60—2004 | |
76 | GBZ/T 300.122—2017 | GBZ/T 160.63—2007 | |
77 | GBZ/T 300.126—2017 | ||
78 | GBZ/T 300.127—2017 | GBZ/T 160.64—2004 | |
79 | GBZ/T 300.129—2017 | GBZ/T 160.65—2004 | |
80 | GBZ/T 300.130—2017 | GBZ/T 160.66—2004 | |
81 | GBZ/T 300.132—2017 | GBZ/T 160.67—2004 | |
82 | GBZ/T 300.133—2017 | GBZ/T 160.68—2007 | |
83 | GBZ/T 300.134—2017 | ||
84 | GBZ/T 300.136—2017 | GBZ/T 160.69-2004 | |
85 | GBZ/T 300.137—2017 | ||
86 | GBZ/T 300.139—2017 | GBZ/T 160.70—2004 | |
87 | GBZ/T 300.140—2017 | GBZ/T 160.71—2004 | |
88 | GBZ/T 300.142—2017 | GBZ/T 160.72—2004 | |
89 | GBZ/T 300.143—2017 | ||
90 | GBZ/T 300.146—2017 | GBZ/T 160.74—2004 | |
91 | GBZ/T 300.149—2017 | GBZ/T 160.76—2004 | |
92 | GBZ/T 300.150—2017 | ||
93 | GBZ/T 300.151—2017 | ||
94 | GBZ/T 300.153—2017 | ||
95 | GBZ/T 300.159—2017 | GBZ/T 160.80—2004 | |
96 | GBZ/T 300.160—2017 | GBZ/T 160.81—2004 |
国家卫生计生委2017年11月9日
5 前言
本部分为GBZ/T 300的第160部分。
本部分按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。
本部分代替GBZ/T 160.81—2004《工作场所空气有毒物质测定 生物类化合物》。
本部分与GBZ/T 160.81—2004相比,主要修改如下:
——修改了标准名称;
——增加了待测物的基本信息;
——改进了空气采样和标准系列浓度的表达;
本部分中的主要起草单位和主要起草人:
主要起草人:梁友信。
本部分所代替标准的历次版本发布情况为:
——GBZ/T 160.81—2004。
GBZ/T 300.160—2017
6 标准正文
第 160 部分:洗衣粉酶
6.1 1 范围
GBZ/T 300的本部分规定了工作场所空气中洗衣粉酶的溶剂洗脱-抗体结合-比色法。
6.2 2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GBZ/T 210.4 职业卫生标准制定指南 第4部分:工作场所空气中化学物质的测定方法
6.3 3 洗衣粉酶的溶剂洗脱-抗体结合-比色法
6.3.1 3.1 原理
空气中气溶胶态含酶洗衣粉用超细玻璃纤维滤纸采集,洗脱后,与包被在酶标板上的特异性抗体(Ab1)结合,然后加入特异性抗体(Ab2),最后与一连有标记物的抗体(Ab3)结合,再与显色剂反应生成有色化合物,用酶标仪测量吸光度,测定酶的浓度。
6.3.2 3.2 仪器
3.2.2 大采样夹,滤料直径为 37mm 或 40mm。
3.2.3 小采样夹,滤料直径为 25mm。
3.2.4 空气采样器,流量 0L/min~2L/min 和 0L/min~10L/min。
3.2.5 烧杯,50mL。
3.2.6 酶标板和酶标板盖。
3.2.7 多孔道微量加样器。
3.2.8 可调微量加样器。
3.2.9 恒温箱。
3.2.10 离心管,25mL。
3.2.11 具塞试管,10mL。
3.2.12 酶标仪。
6.3.3 3.3 试剂
3.3.1 实验用水为去离子水,试剂为分析纯,于 4℃冰箱保存。
3.3.2 抗体包被缓冲液,pH9.6±0.2:0.151g 碳酸钠和 0.293g 碳酸氢钠溶于 100mL 水中,可保存 2个月。
3.3.3 洗板液:29.22g 氯化钠、0.186gTris 和 0.1g 牛血清白蛋白(BSA)溶于 100mL 水中,用 6mol/L盐酸溶液调 pH 至 8.0,加入 0.05mL 吐温 20,混匀,可保存 7d。
3.3.4 枸橼酸-磷酸缓冲液,pH5.0±0.2:0.730g 枸橼酸和 2.387g 磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O)溶于100mL 水中,可保存 1 个月。
3.3.5 BSA 封闭液:2.0g BSA 溶于 100mL 洗板液中。
3.3.6 洗脱液:2.922g 氯化钠、0.093g Tris、0.496g 硫代硫酸钠(Na2S2O3•5H2O)和 0.0147g 氯化钙(CaCl2•2H2O)溶于约 80mL 水中,加入 0.1g BSA,溶解后,用 6mol/L 盐酸溶液调 pH 至 8.0,转移到 100mL 容量瓶中,定容后加入 0.10mL 吐温 20,混匀,可保存 7d。
3.3.7 邻苯二胺(OPD)溶液,pH5.0:8.0mg OPD 置于 50mL 棕色瓶中,加入 15mL 枸橼酸-磷酸缓冲液,溶解后,加入 5μL 过氧化氢(30%),混匀。临用前配制。若溶液变黄,应重新配制。
3.3.8 兔抗体包被溶液:用 10mL 抗体包被缓冲液稀释 10μL 兔抗血清,混匀。
3.3.9 豚鼠抗体:用 10mL 洗板液稀释 10μL 豚鼠抗体,混匀。
3.3.10 标有过氧化物酶的兔抗豚鼠抗体:用 10mL 洗板液稀释 10μL 标有过氧化物酶的兔抗豚鼠抗体,混匀。
3.3.12 标准酶,用国家认可的洗衣粉酶。
6.3.4 3.4 样品的采集、运输和保存
3.4.1 现场采样按照 GBZ 159 执行。
3.4.2 短时间采样:在采样点,用装好超细玻璃纤维滤纸的大采样夹,以 5.0L/min 流量采集 15min空气样品。
3.4.3 长时间采样:在采样点,用装好超细玻璃纤维滤纸的小采样夹,以 1.0L/min 流量采集 2h~8h空气样品。
3.4.4 采样后,打开采样夹,取出滤纸,接尘面朝里对折两次,放入清洁的塑料袋或纸袋中,置清洁容器内运输和保存。样品宜尽快测定。
3.4.5 样品空白:在采样点,打开装好超细玻璃纤维滤纸的采样夹,立即取出滤纸,放入清洁的塑料袋或纸袋中,然后同样品一起运输、保存和测定。每批次样品不少于 2 个样品空白。
6.3.5 3.5 分析步骤
3.5.1 样品处理:将超细玻璃纤维滤纸放入烧杯内,加 25.0mL 洗脱液,洗脱 20min,不时振摇。样品溶液用滤纸过滤或离心后供测定。
3.5.2 标准曲线的制备:在 8 支容量瓶中,用标准酶配制成 0.0ng/mL~6.0ng/mL 标准系列。于酶标板的每个孔中加 100μL 兔抗体包被溶液,置 4℃冰箱内放置过夜。加样时,加样头不可接触酶标板底部,不容许冰冻。第二天,从冰箱内取出酶标板,翻转,弃去兔抗体包被溶液,在数层纸上拍打,甩尽孔中的兔抗体包被溶液。每个孔用洗板液洗涤 3 次,每次约 250μL。然后加 200μL BSA 封闭液,加样头不能接触酶标板。盖上酶标板盖,放置 1h 以上。甩尽孔中液体。若不立即使用,可用酶标板膜封好,可储存 2 个月。向每个孔中加入 50μL 标准酶溶液,全部加平行样。加入 50μL 豚鼠抗体。将酶标板放入 37℃恒温箱内,反应 90min。取出,每个孔用洗板液洗涤 3 次,每次约 250μL。各加入 100μL 标有过氧化物酶的兔抗豚鼠抗体,再置 37℃恒温箱内,反应 90min。取出,每个孔用洗板液洗涤 3 次,每次约 250μL。用枸橼酸-磷酸缓冲液冲洗 3 次。以保持同一时间间隔,向每个孔加入 100μL OPD 溶液;放入 37℃恒温箱内,反应至有合适的黄色生成;向每个孔以保持同一时间间隔,加入 150μL 硫酸溶液,以终止显色反应。擦净酶标板底部,用酶标仪测定每个孔的吸光度(双波长法的波长为 492nm 和 620nm)。以测得的吸光度值对相应的酶浓度(ng/mL)绘制标准曲线或计算回归方程。
3.5.3 样品测定:用测定标准系列的操作条件测定样品溶液和样品空白溶液,测得的吸光度值由标准曲线或回归方程得样品溶液中酶浓度(ng/mL)。若样品溶液中酶的浓度超过测定范围,用洗脱液稀释后测定,计算时乘以稀释倍数。
6.3.6 3.6 计算
3.6.1 按 GBZ 159 的方法和要求将采样体积换算成标准采样体积。
3.6.2 按式(1)计算空气中酶的浓度:
式中:
C ——空气中酶的浓度,单位为微克每立方米(μg/m3);
C0——测得的样品溶液中酶的浓度(减去样品空白),单位为纳克每毫升(ng/mL);
V0——标准采样体积,单位为升(L)。
3.6.3 空气中的时间加权平均接触浓度(CTWA)按 GBZ 159 规定计算。
6.3.7 3.7 说明
3.7.1 本法按照 GBZ/T 210.4 的方法和要求进行研制。本法的定量下限为 0.05ng/mL,定量测定范围为 0.05 ng/mL~6ng/mL;以采集 75L 空气样品计,最低定量浓度为 0.017 μg/m3;相对标准偏差为 2%~8%,采样效率为 95%以上,洗脱回收率为 90%以上。