4 唾液白蛋白的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 取材
4.4 唾液白蛋白的测定原理
激光散射光系指一定波长的光通过溶液时遇到抗原-抗体复合物，光线被折射，发生偏转。偏转角度可以从0～90°，这种偏转的角度可因光线波长和离子大小不同而有所区别。散射光的强度与抗原抗体复合物的量成正比，同时也和散射夹角成正比，和波长呈反比。测定方法有终点法和速率法两种。
4.5 试剂
（1）稀释液：0.2mol/L Na2HPO463ml，0.2mol/L NaH2PO437ml，0.5mol/L NaCl 100ml，NaN21.0g，蒸馏水加至1000ml，经0.45μm微孔滤膜过滤，分装，4℃保存备用。
（2）反应液：聚乙二醇（PEG，分子量6000）4.6g溶于稀释液中，略微加热助溶，补足100ml，用0.45μm微孔滤膜过滤分装。4℃保存备用。
（3）校正唾液：自制校正唾液时，可根据ICS校正卡上所列各种蛋白成分的含量，应用国产标准参考唾液，根据公式C1V1＝C2V2换算成校正卡上含量，略作调正。使与校正卡上含量一致，然后过滤分装，低温保存。
（4）质控唾液：可将数十份正常人唾液混合，加1g/L NaN3，直接用C或D稀释度即可。
（5）抗血清：可用国内特异性好，亲和力强，效价高的抗血清，选择最适稀释度，用0.45μm微孔滤膜过滤。以已知含量参考血清作为标准抗原，用ICS手动或自动方式测出该成分的含量，使与校正卡上所列含量一致，然后分装4℃保存。
4.6 操作方法
（1）自动速率散射比浊法：以Beckman ICS-Ⅱ型为例，可用进口配套试剂，也可用自制试剂，经校正后使用，按照操作介绍进行。现以免疫球蛋白G（IgG）为例。
①先用电脑稀释器将待测样本稀释至1∶36或1∶216。
②将待测的IgG校正电脑卡及IgG的抗血清电脑卡先后插入仪器内，有关的试验参数及标准曲线即自动记录在微处理机中。
④用42μl加样器将欲测定的稀释标本和IgG抗血清分别注入反应管中，透过显示屏，于60s内自动显示IgG的含量。
（2）手动散射比浊测定法：由于自动试剂受到许多限制，手动操作可替代自动试剂，对于微量蛋白质测定的继续开发是十分重要的。
①抗原制备：为了确定抗血清的使用比例，须确定最适合的抗原含量。ICS最佳检测范围应是0.2～20mg/L之间，最适抗原中点浓度为2mg/L（指反应管中的终浓度）。其计算公式为：
稀释倍数＝
例如：参考唾液IgG值为12g/L时代入公式则
将参考唾液用稀释液稀释后，备用，并以同样方法配制其他浓度，选择多点，制作校正曲线。该样品应清澈透明，其本底速率值（RU）不应超过50，散射值（SU）不应超过30，才为合用。
②抗血清制备：取特异性强。效价高的抗血清进行适当稀释，经0.45μm微孔滤膜过滤后，选择最适增益卡（M11、M22、M33、M44），以已知含量的参考血清作为标准抗原，用手动方式将ICS专用抗血清与自制抗血清对同一抗原，测其速率单位（RU）。以自制抗血清的RU除以Beckman抗血清的RU，即为自制抗血清的稀释倍数。如上海生物制品研究所生产的抗血清（批号890201），其抗IgG 1∶15稀释，抗IgA 1∶6稀释，抗IgM 1∶21稀释较佳。
③参考曲线的制备：将已知抗原稀释成不同浓度，分别与抗血清反应，测定的RU值为纵坐标，相应的抗原浓度为横坐标、划曲线。
④标本测定：所有体液皆可测定，一般血清标本可按反应管中最佳检测浓度稀释。脑脊液（CSF）可不作稀释，直接测定，测得RU值查标准曲线所得mg数乘以稀释倍数即为标本测量值。
（3）手动速率散射比浊法：表1。
完成上面操作后，即完成一次样品测定，另测标本时再重复6～10步骤操作。取得的速率值查校正曲线，即得未知标本浓度。
4.7 正常值
＜10mg/L。
4.8 化验结果临床意义
当唾液腺患炎症、肿瘤等时，血液唾液屏障被破坏，血浆白蛋白蛋白进入唾液，白蛋白增高。口眼干燥综合征（Sjogren综合征）患者唾液白蛋白增高与腺体破坏程度呈正相关。
4.9 附注
（1）当60g/L的白蛋白标准与BCG结合后，溶液光径1cm，在630nm处测定吸光度应为0.811±0.035，如达不到此值，表示灵敏度较差。