2 别名
抗-HBe;HBeAb
3 乙型肝炎e抗体的医学检查
3.1 检查名称
3.2 分类
3.3 取材
3.4 乙型肝炎e抗体的测定原理
采用单克隆抗-HBe包被反应板,加入待查标本,同时加入基因工程重组HBeAg和多克隆抗-HBe-HRP,形成竞争结合,如待测标本中抗-HBe含量高,则抗-Hbe-HRP与HbeAg结合后形成游离物被洗涤掉,加入TMB底物时显色淡,反之显色深。
3.5 试剂
包被抗-HBs反应板及HRP-抗-HBs,阴、阳性对照血清,洗涤液、底物液等。
3.6 操作方法
(l)实验准备 从冷藏环境中取出试剂盒,在室温下平衡30min,同时将浓缩洗涤液作1∶20稀释。
(2)加待测标本加入待测标本每孔0.05ml,并设阳性对照2孔,阴性对照2孔空白对照1孔。
(3)加中和试剂每孔0.05ml,空白对照孔不加。
(4)加酶结合物每孔0.05ml,空白对照孔不加,充分混匀,
置37℃孵育30min。
(6)加显色剂先加显色剂A,每孔0.05ml;再加显色剂B,每0.05ml;充分混匀,放置37℃避光孵育15min。
(7)终止反应每孔加终止液0.05ml,混匀。
(8)测定用酶标仪读数,可选择单波长450nm(以空白孔校零)
或双波长450/630,读取各孔OD值。
3.7 正常值
Cutoff值计算COV=阴性对照OD值×0.3。
3.8 化验结果临床意义
当HBeAg转阴,伴有HBeAb转阳者常提示HBV复制停止或明显减弱,传染性并较弱,是急性乙肝病情好转,预后良好的征象。但pre-C区基因变异可产生HBeAg阴转的HBV感染,HBeAb可呈阳性,病毒仍复制活跃,病变可持续进展。
3.9 附注
(1)试剂使用前应摇匀,并弃去1~2滴后垂直滴加,注意均匀用力。