4 麻疹病毒抗体的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 化验取材
4.4 麻疹病毒抗体的测定原理
ELISA间接法:将麻疹抗原包被于ELISA板上。加待测血清,麻疹抗体结合抗原于板上。加入酶标记抗人IgG,加底物显色者为抗体阳性。
4.5 试剂
(1)聚苯乙烯ELISA板。
(2)微量加样器(10,50,100μl)。
(3)碳酸盐缓冲液(pH9.5)。
(4)洗液:0.5ml/L Tween 20生理盐水(NS-T)。
(6)底物液:邻苯二胺-H2O2。
(7)2mol/L H2SO4。
(8)麻疹抗原,对照抗原,辣根过氧化物酶抗人IgG结合物,由试剂盒提供。
4.6 操作方法
(1)按试剂盒说明工作浓度以碳酸盐缓冲液分别稀释麻疹抗原与对照抗原,分别平行包被ELISA板,每孔100μl。4℃过夜。
(2)待测血清以稀释液稀释至1∶100,加入麻疹抗原孔与对照抗原孔各100μl,37℃ 1~2h。
(3)用标本稀释液稀释抗人IgG酶结合物,每孔100μl。37℃ 1~2h。
(4)加底物100μl/孔。37℃ 10~15min后用2mol/L H2SO450μl/孔终止反应。
(5)492nm波长测A值(吸光值)。
4.7 正常值
阴性。
4.8 化验结果临床意义
4.9 附注
(1)1~4步骤间均以。NS-T洗板3次。
(3)若欲测抗体滴度可选择1∶100,1∶400,1∶1600,1∶6400。A比值≥2.1的血清最高稀释度倒数为抗体效价。