2 英文参考
Urine—Determination of mercury—Dithizone extraction spectrophotometric method
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 24—1996《尿中汞的双硫腙萃取分光光度测定方法》(Urine—Determination of mercury—Dithizone extraction spectrophotometric method)由中华人民共和国卫生部,于1996年10月14日发布,自1997年05月01日起实施。
6 4 试剂
本标准所用试剂除另有说明者外,均为分析纯试剂。4.1 实验用水:为重蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。
4.2 硫酸,ρ20=1.84 g/mL。
4.6 双硫腙洗除液:称取10 g EDTA和10 g氢氧化钠,加水溶解后稀释至500 mL,并与500 mL氨水(ρ20=0.9 g/mL)混合。
4.7.1 双硫腙的提纯,称取0.1 g双硫腙溶于50 mL三氯甲烷中,置于250 mL分液漏斗中,用1+99氨水提取三次(每次约30 mL),双硫腙进入氨水层。合并氨水溶液,用6 mol/L盐酸调至酸性,此时双硫腙析出,加入适量三氯甲烷使双硫腙溶于三氯甲烷层中,用等量的蒸馏水洗涤二次,将双硫腙三氯甲烷溶液放入棕色瓶中,加入15~20 mL 1+9硫酸,置冰箱中保存,可使用一个月。
4.7.2 使用时吸取提纯的双硫腙三氯甲烷液适量,用三氯甲烷稀释至透光度为60%(490 nm,10 mm比色杯),溶液应呈翠绿色。
4.8 汞标准溶液:准确称取0.1354 g经干燥器干燥过的重结晶氯化汞(HgCl2),加0.5 mol/L硫酸使其溶解后,定量转移至1000 mL容量瓶中,稀释至刻度,此溶液1 mL = 0.1 mg汞。使用前,用0.5 mol/L硫酸稀释成1 mL=10μg汞的标准应用液。
4.9 质控样:用标准尿样、加标的模拟尿、加标的正常人混合尿或接触者混合尿作质控样。
8 6 分析步骤
8.1 6.1 样品处理
6.1.1 取尿50 mL放入锥形瓶中,同时用50 mL水作空白。
6.1.2 加30 mL饱和高锰酸钾溶液(4.4)及5 mL硫酸(4.2),摇匀,加热至沸(如发现尿样中高锰酸钾紫色褪去,可酌情补加适量的高锰酸钾溶液).保持10 min,取下,冷却.
8.2 6.2 标准曲线的绘制
6.2.1 取6个锥形瓶,按下表配制标准系列。
汞标准管的配制
管 号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
汞标准应用液(4.8),mL | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.7 | 0.9 |
水,mL | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
汞含量,μg | 0 | 1.0 | 3.0 | 5.0 | 5.0 | 9.0 |
6.2.2 按6.1.2条操作.
6.2.3 冷却至温热时,滴加盐酸羟胺溶液(4.5),随加随振摇,至完全无色透明,再振摇5 min。放至室温后,转移到分液漏斗中,用水冲洗锥形瓶三次,洗液倒入分液漏斗至150 mL左右.
6.2.4 加入5 mL双硫腙三氯甲烷溶液(4.7.2),在2 min内振摇200次,静置分层后,将三氯甲烷层放入另一个已盛20 mL双硫腙洗除液(4.6)的分液漏斗中,振摇50次,洗去过量的双硫腙,静置分层后将三氯甲烷层通过脱脂棉过滤于10 mL干燥的具塞比色管中.
6.2.5 用10 mm比色杯,在490 nm波长下,以空白作参比,测定吸光度。以汞的含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
8.3 6.3 样品测定
尿样按6.1条处理完后,按6.2.3~6.2.5条操作。测得吸光度后,在标准曲线上查得尿样中汞的含量(μg).在测定前后以及每测定10个样品后,测定一次质控样。
9 7 计算
7.1 按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度的校正系数(k)。
7.2 按式(2)计算尿中汞的浓度:
式中:X——尿中汞的浓度,mg/L;
m——尿样中汞的含量,μg;
V——分析时所取尿样体积,mL。
10 8 说明
8.1 本法的检测限,取50 mL尿样时为0.005 mg/L;测定范围0.005~0.180 mg/L。本法精密度:CV=3.4%~8.1%(尿样浓度0.01,0.05,0.10 mg/L,n=6),准确度:尿样加标回收率为92.3%~96.3%(尿汞浓度0.026,0.106,0.185 mg/L,n=6)。
8.3 在本实验条件下,1.0mg Cu2+,50μg Ag+、Bi2+、Cd2+,0.1 mg I-,200 mg Br-,1.5 g Cl-无干扰,而0.3 mg I-,1 μg Pd2+则呈负干扰。
8.4 双硫腙汞络合物对光及温度很敏感,室温20℃以上,散射光在50 lx照度以上时,照度越大,褪色越快,但褪色后置于暗处5 min即可恢复,室温20℃以下时,散射光无影响。