脑脊液环磷鸟苷

化验及医学检查 体液和排泄物检查 脑脊液检查

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

nǎo jǐ yè huán lín niǎo gān

2 英文参考

cerebrospinal fluid cyclophosphamide guanosine

3 概述

环鸟苷酸是由细胞内鸟苷三磷酸(GTP)经鸟苷酸环化酶催化所产生。目前认为环鸟苷酸和环腺苷酸是相互拮抗的物质,在正常生理状态下,组织血浆中的环腺苷酸和环鸟苷酸浓度的比值保持相对恒定,在分析中往往同时测定这两种物质的浓度,两者比例失调是某些疾病发病机制的一项客观指标。

4 脑脊液环磷鸟苷医学检查

4.1 检查名称

脑脊液环磷鸟苷

4.2 分类

体液排泄检查 > 脑脊液检查

4.3 化验取材

脑脊液

4.4 脑脊液环磷鸟苷的测定原理

cGMP是继cAMP之后1963年Price发现的另一种环核苷酸。其结构和cAMP基本相似,由鸟苷、核糖和磷酸所组成。测定原理也与cAMP相似,即样品经预处理,将样品和标准同时进行酰化反应,以改善抗体对待测物的亲和力,提高测定方法灵敏度样品和[3H]-ScGMP共同竞争性的与抗体结合,从标准剂量反应曲线计算出样品中cGMP浓度。

4.5 试剂

(1)抗血清:以ScGMP-BSA结合物免疫动物获得。与cAMP交叉反应为零,滴度为1∶12000。

(2)[3H]-cGMP:中国原子能研究院产品,比放射活性814GBq(22Ci)/mmol。4℃冰箱贮存。

(3)50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液:同[3H]-cAMP测定法。

(4)[3H]-ScGMP:取[3H]-cGMP 92.5kBq 2.5μci)加至带玻璃塞提取管中,加琥珀酸酐5mg,蒸馏水0.1ml。再加三乙胺10μl,即刻用力摇1~2min,加50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液10ml。临用前配制。

(5)标准cGMP液(8nmol/ml):取AR级cGMP少许溶于双蒸馏水中。在紫外分光光度计260nm(1cm比色杯)测A值。按照cGMP260nm的A值除以11.7即得cGMPmmol/L。再以蒸馏水稀释8nmol/ml。

(6)标准cGMP(80pmol/瓶):取标准cGMP液10μl加至5ml瓶中,放37℃干燥,加盖密封放4℃保存。临用前,取标准cGMP一瓶,加2ml 50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液溶解,为S6。另取试管5只各加缓冲液0.5ml,从S6中吸出0.5至S5,依次倍比稀释,此系列标准浓度100μl中含有4,2,1,0.5,0.25,0.125pmol。

(7)闪烁液:同[3H]-标记cAMP测定法。

4.6 操作方法

(1)样品的采集和预处理:同[3H]-标记cAMP测定法。

(2)加液程序:取10mm×100mm玻璃试管,注明NSB、S0、S1~5和测定。按表1程序加入样品和试剂。

(3)加[3H]-ScGMP和抗血清后,混匀,放4℃反应2.5h,每管补加冷50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液1ml,混合匀充。

(4)取硝酸纤维膜(上海化工研究院产品)浸于50mmol/L pH6.2醋酸缓冲液中2h,然后放置在专用滤器上。将反应滴加至滤膜上抽滤,再用1ml相同缓冲液反应管2次,亦加至滤膜上洗涤和抽滤。

(5)将滤膜放80℃30min干燥。另取[3H]-ScGMP50μl滴至另一张干燥滤膜上,作为总计数(T)。

(6)将膜放至预先加5ml闪烁液的瓶中,放2~3h后测放射性。

(7)零标准净计数B0,标准管净计数为B,以B0/B为纵坐标,标准管cGMP的Pmol为横坐标,在普通坐标纸作图,在Y轴截距1处得出一条直线。依样品管B0/B值,在标准剂量反应图上得出相对应cGMP的值。再乘5得nmol/L。

4.7 正常值

1.7~3.1nmol/L。

4.8 化验结果临床意义

(1)升高:急性心肌梗死甲状腺功能亢进症慢性肾小球肾炎慢性肾炎)。

(2)降低:甲状腺功能减退症

4.9 附注

cAMPT和cGMP参与多种生理功能物质代谢过程,很多生物性物质如激素神经递质药物毒素等,在体内作用过程中,均使细胞内cAMP与cGMP的水平发生变化。

4.10 相关疾病

急性心肌梗死甲状腺功能亢进症慢性肾小球肾炎甲状腺功能减退症

编辑:banlang 审核:sun

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