3 概述
在各种自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)等病人血清中常可检出抗脱氧核糖核核糖核酸(DNA)抗体,其中抗单链DNA(ssDNA)抗体可见于各种自身免疫病和结缔组织病人血液中,故无多大诊断特异性。但抗双链DNA(dsDNA)抗体主要见于SLE病人,是一相对特异的诊断指标。鉴别或特异性检测抗dsDNA抗体取决于所用抗原dsDNA的特性和纯度,以前多用非致病的短膜虫及由此分离纯化的抗原,但目前除间接免疫荧光法外,多用基因工程产dsDNA抗原,其特异性更佳。血凝试验酶免疫是较常用的检测抗dsDNA抗体的方法,但Farr法仍是标准参考方法。
5 抗脱氧核糖核酸抗体的医学检查
5.1 检查名称
5.2 分类
5.3 抗脱氧核糖核酸抗体的测定原理
除用基因工程产dsDNA抗原致敏红细胞外,其余同常规间接血凝试验。
5.4 试剂
现有成套试剂盒供应。
5.5 操作方法
(1)定性试验:
①被检血清经56℃加热30min后,用血清稀释液作1∶20稀释。
②如下图(图1)所示Ⅴ型微孔板的B、C、D、F、G、H孔分别加血清稀释液50μl,在A、B孔和E、E孔内分别加1∶20稀释的病人血清50μl。
③混匀后从B孔移吸50μl于C孔,混匀,从中移吸50μl于D孔,混匀后吸出50μl弃之。如此A~D孔内血清的最终稀释度分别为1∶20、1∶40、1∶80和1∶160。E~H孔作同样处理供检测另1份血清样品用。
④各孔加dsDNA抗原致敏的红细胞试剂25μl,混匀。微孔板衬以白底,25℃左右室温放置1h后观察结果。凡1∶20稀释度呈血凝阳性反应者判为抗dsDNA抗体阳性,阳性样品需作半定量间接血凝试验加以确证。
(2)半定量试验:将血清标本倍比稀释为1∶20~1∶2560,同法检测,以能产生血凝阳性反应的血清最大稀释度为受检样品抗体滴度。凡SLE患者血清滴度在1∶160以上提示疾病有活动性。
5.6 正常值
阴性。
5.7 化验结果临床意义
阳性:系统性红斑狼疮(特征的病理因子)、系统性硬化症、皮肌炎、结节性多动脉炎(50%阳性)、类风湿性关节炎(10%阳性)、肝脏病、甲状腺炎、溃疡性结肠炎、重症肌无力(4%~17%阳性)、局限性盘状红斑狼疮(阳性数不稳定)等。
5.8 附注
(1)上述诸法均有商品试剂盒供应,应严格按介绍规定操作。