5 方法及内容
1.制备致敏红细胞
(1)取12mm×75mm试管1只,加入已知Gm或Km因子的抗D血清。
(3)混匀37℃温育1h。
2.抗Gm、Km抗体的标定
(1)取96孔V型微量板1块,向每孔中加磷酸盐缓冲液25μl。
(2)抗Gm、Km抗体作倍量稀释。
(3)向每孔中加入0.5%的致敏红细胞25μl,振荡混匀30s。
(3)将待测样本用稀释管从1:1倍比稀释至成1:32,共稀释2排。
(4)第1排在1:16,1:32孔中加入最佳稀释度的抗Gm、Km抗血清25μl。
(6)振荡混匀30s,中和10~15min
(7)每孔加入2%致敏的红细胞悬液25μl。
(8)2000r/min离心5min。
(9)将微量板倾斜呈45°,5min后观察结果。