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cDNA第一链的合成
...汞1μl,室温反应l0分钟,使RNA变性。 2)加100mmol/L的β-巯基乙醇2μl和10mmol/LRNA酶抑制剂2μl,室温放置5分钟。β-巯基乙醇有稳定逆转录酶活性的作用。 3)向上述反应混合物加lmg/ml的引物01igodT(12~18聚体)10μl,1mol/LTris.HCl(pH...
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实验条件不同对测定IgG抗A(B)效价结果影响的研究
【关键词】血型;血清;二巯基乙醇血清中IgG抗A(B)效价的测定,是预测ABO血型不合发生新生儿溶血病(HDN)可能性的重要试验项目。文献报道[1,2]及权威实验室的实验方法有明显不同,但都以效价大于或等于64作为判...
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一种提高高半胱氨酸液相色谱检测灵敏度的方法
...苯二甲醛(ophthalaldehyde,OPA)40mg,溶于1ml甲醇中,另加入20μl巯基乙醇,定容至10ml。色谱流动相A液:含0.02%三乙胺(TEA),0.6%四氢呋喃的20mmol.L-1醋酸缓冲液(pH7.2)。色谱流动相B液:100mmol.L-1醋酸钠缓冲液(pH7.2)-乙腈-甲醇(100∶175∶225)。1...
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热门新型医药中间体及其制备工艺介绍
...化下进行克莱森酯缩合得到钠盐,再与硫脲亲核加成得2-巯基-4-羟基-5-甲氧基嘧啶,经过水解后得到5-甲氧基尿嘧啶,该法路线较长,但是原料来源与收率尚好;3)甲氧基乙酸甲酯和甲酸乙酯在金属钠催化下进行克莱森酯缩合得...
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二巯丙醇注射液
...Zhusheye英文名DIMERCAPROLINJECTION来源(分子式)与标准本品为二巯基丙醇的灭菌油溶液。含二巯基丙醇(C3H8OS2)应为标示量的95.0~105.0%。 本品加有适量的苯甲酸苄酯为助溶剂。性状 本品为无色或淡黄色的澄明油状液体。检...
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巯基化合物对内毒素诱导大鼠枯否细胞NF-κB活性和肿瘤坏死因子释放的影响
...13日中华麻醉学杂志2006Vol.26No.5P.446-44913(上海)为了观察巯基化合物对内毒素诱导大鼠枯否细胞(KC)NF-κB活性和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放的影响。研究者采用胶原酶灌注和percoll密度梯度离心法分离得到高纯度大鼠KC,在过夜培养...
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第三节 放射性同位素标记核酸探针
...体积为50μl,内含50mmol/lTris(pH7.5)、10mmol/lMg-Cl2、10mmol/Lβ-巯基乙醇和500μgBSA/ml,引物片段1和2各90ng,模板DNA0.1μg,[α-32P]dCTp1.5×106Bq,dATp、dGTP和dTTP各200μmol/L。标记反应包括3个步骤: (1)变性:反应管在95℃水浴5min,然后离...
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第七节 尿液氨基酸检查
...定性反应。其原理是基于亚硝基铁氰化钠可与含硫氨酸的巯基起反应,故凡含硫氨酸代谢缺陷均可呈阳性。可进一步使用色谱法确认分析。 [参考值]定性:阴性或弱性 定量:正常尿中胱氨酸、半胱氨酸为83-830μmol(10-100mg)/...
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高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸
...高效液相色谱(HPLC)方法。方法:血浆同型半胱氨酸经巯基乙醇还原后用碘乙酸封闭巯基,再与邻苯二甲醛(OPA)反应完成衍生化;以磺基同型半胱氨酸为内标,经C18反相柱进行色谱分离,荧光检测器测定结果。结果:测定线...
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相转移催化法合成硝酸芬替康唑
摘 要:以1-(2,4-二氯苯基)-2-咪唑乙醇和42苯巯基氯苄为反应中间体,采用相转移催化法合成硝酸芬替康唑,目标物的结构经元素分析、IR、1H2NMR及MS等确证,总收率为56.5%。与文献方法相比操作简便、条件温和,成本较低,收率稳定,更适...
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第三节 单克隆丙种球蛋白病的检测方法
...型抗轻链血清中无相应位置的沉淀弧出现,血清标本经2-巯基乙醇还原处理后,仍无改变,提示可能是重链病(图26-4),需进一步测定其分子量。 5.非分泌型丙种球蛋白病血清中某一类型的免疫球蛋白含量一般不会太高,...
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依诺昔酮的合成工艺改进
...解、环合3步反应制得关键中间体42甲基咪唑222酮(4);以对巯基苯甲酸为起始原料,经甲基化、酰氯化制得另一中间体对甲硫基苯甲酰氯(6);4和6经傅2克反应得到依诺昔酮(1)。本路线对文献方法做了改进:在中间体2的水解步骤,增加盐酸...
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砷化物细胞毒性及其分子机制的研究进展
...表明[25],若肿瘤细胞内的谷胱甘肽(GSH,可使细胞内巯基含量增高,保护细胞内重要蛋白的巯基不被砷剂结合)含量低于40nmol/mg蛋白,则对As2O3敏感;若高于40nmol/mg,则不能诱导其凋亡。故认为胞内GSH含量可作为预测砷剂敏感...
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二巯丙醇
...ErqiuBingchun英文名DIMERCAPROL来源(分子式)与标准本品为2,3-二巯基-1-丙醇。含C3H8OS22不得少于98.5%(g/g)。性状 本品为无色或几乎无色、易流动的澄清液体;有类似蒜的特臭。 本品在甲醇、乙醇或苯甲酸苄酯中极易溶解,在...
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分子剪刀改造微藻基因组助推第三代生物燃料研发
...单交换和双交换整合载体。对于枯草芽孢杆菌本身来源的巯基-二硫键氧化还原酶基因bdbC,bdbD,直接将其作为同源片断,由于bdbC,bdbD共用一个启动子,在基因组上以操纵子的形式存在,因此构建的单交换载体命名为pACC-BdbDC。对...
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含砷化物中药及制剂的分子药理学研究进展
...RARα融合蛋白降解,调节凋亡调控基因和/或蛋白的表达,巯基是砷剂诱导细胞凋亡的重要化学感受器,砷剂诱导细胞凋亡的通路主要包括半胱氨酸蛋白酶家族依赖性凋亡通路和线粒体依赖性凋亡通路。结论含砷化物中药及制剂治...
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第四节 硫酸和硫醚
...分子中一个氢被烃基取代的化合物,通式为R-SH。-SH称为巯基或氢硫基,它是硫醇的官能团。简单的硫醇有甲硫醇CH3SH、乙硫醇CH3CH2SH等。巯基也存在于某些结构复杂的化合物中,例如与人体代谢有关的辅酶A分子中就含有巯基。 ...
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急性白血病患者血清抑制正常人巨核系造血
...,AB型血清0.05ml,牛血浆0.05ml,0.034%氯化钙0.05ml,10-3M二巯基乙醇0.05ml,α培养液补足至0.5ml。1.3.2.2血清抑制实验设置空白对照组、实验(AL患者血清)组、对照(正常人血清)组。空白对照组设4孔,其他组每个标本设复孔。在巨...
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进口乳香药材的检测方法研究
...取供试品溶液A1,A2各50mg,精密称定,置5mL量瓶中加无水乙醇溶解并稀释至刻度,作为供试品溶液B1,B2。4GC-MS测定方法及结果取供试液1,采用GC-MC联用方法,依条件测定,所测质谱图与标准图谱对照,索马里乳香挥发油主成分为...
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猪血小板衍生生长因子的提取和纯化
...将最终分离出的样品进行15%SDS-PAGE,其中部分样品用10%2-巯基乙醇还原后再进行15%SDS-PAGE,考马斯亮蓝R250染色。1.4 蛋白质含量测定 采用Lowrys法,以牛血清白蛋白为标准品。2 结 果2.1 pPDGF的提取和纯化 血小板裂解液经酸...
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猪血小板衍生生长因子的提取和纯化
...将最终分离出的样品进行15%SDS-PAGE,其中部分样品用10%2-巯基乙醇还原后再进行15%SDS-PAGE,考马斯亮蓝R250染色。1.4 蛋白质含量测定 采用Lowrys法,以牛血清白蛋白为标准品。2 结 果2.1 pPDGF的提取和纯化 血小板裂解液经酸...
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黄芩甙元Baicalein
...用,化学介质的释放并不减少。表明黄芩甙元是通过抑制巯基酶和减少抗原抗体反应时化学介质的释放量,床抑制变态反应。2.抗菌作用用黄芩甙元进行抑菌试验,结果有显著抗菌作用。体内试验证明较高浓度的黄芩甙元能抑...
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邻苯二甲醛衍生荧光法测定牛奶中的苄青霉素残留
...酸性加热条件下可水解产生青霉胺(penicillamine)[8]。在巯基乙醇存在条件下,邻苯二甲醛(OPA)可与青霉胺反应,形成具有强荧光的1硫代2烷基异吲哚衍生物[9]。采用常规过甲酸法使青霉胺的巯基磺酸化可有效抑制其巯基对...
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第三节 氨基酸
...氨酸(α-氨基-β-羟基丁酸)苏Thr6.18半胱氨酸(α-氨基-β-巯基丙酸)半Cys5.07酪氨酸[α-氨基-β-(对羟苯基)丙酸]酪Tyr5.66天门冬酰胺(α-氨基丁酰胺酸)天酰Asn5.41谷氨酰胺(α-氨基戊酰胺酸)谷酰Gln5.65天门冬氨酸(α-氨基丁二...
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第三节 蛋白质的结构及其功能
...氨基酸残基构成的多肽链中存在四对二硫键,在大量β-巯基乙醇和适量尿素作用下,四对二硫键全部被还原为桽H,酶活力也全部丧失,但是如将尿素和β-巯基乙醇除去,并在有氧条件下使巯基缓慢氧化成二硫键,此时酶的活...
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液相色谱-串联质谱法测定焙烤和油炸食品中丙烯酰胺的含量
...氨基系统非常容易与亲核物质(例如蛋白质中半胱氨酸的巯基)通过Michael加成发生化学反应,从而影响蛋白质的正常功能而致病[1]。由于丙烯酰胺具有潜在的神经毒性、遗传毒性和致癌性,因此食品中丙烯酰胺的污染引起了国...
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骨髓间充质干细胞治疗脑梗死的研究进展
...研究中将成年大鼠BMSCs在体外培养繁殖20多代,用β巯基乙醇诱导,结果显示其表达神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)、N乙酰神经氨酸(NeuN)、神经微丝蛋白(neurofilamentM,NFM)和氨基乙磺酸(tau),在相同...
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成人骨髓间充质干细胞的培养及其向神经元样细胞诱导分化的实验研究
...用含血清的DMEM培养基培养成人骨髓间充质干细胞,以β-巯基乙醇诱导其向神经元样细胞方向分化。应用免疫细胞化学技术对培养细胞及其分化细胞进行鉴定。结果骨髓细胞培养至第10d时,全骨髓法收获的细胞数为(1.73±0.44)×107/ml...
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复合氨基酸注射液(18)
...(取枸橼酸钠19.6g,加水1000ml溶解后,加正辛酸0.1ml,加巯基乙醇2ml,用高氯酸调节pH值至3.2)。16分钟。pH4.25(取枸橼酸钠19.6g,加水1000ml溶解后,加正辛酸0.1ml,加巯基乙醇2ml。用高氯酸调节pH值至4.25)。14分钟。pH6.0(取枸橼酸...
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尿素对异黄酮光分析的研究
...酮作用,为异黄酮类化合物的分析提供微量方法。方法在乙醇中加尿素-HCl液再加0.1~1μg异黄酮,经UV光照后,测光。结果发现尿素与13个异黄酮经光化学反应后有8个可增强光,5个化合物无增强作用。结论尿素与异黄酮光化学反...