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第十七章 荧光免疫技术--第一节 有关荧光的基本知识
第十七章 荧光免疫技术 荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进...
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第一节 免疫荧光细胞化学的原理
第一节 免疫荧光细胞化学的原理 免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。...
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荧光分析法
一、基本原理 某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光,根据荧光的光谱和荧光强度,对物质进行定性或定量的方法,称为荧光分析法(fluorescenceanalysis)。 荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等...
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原子荧光光谱的产生及其类型
...较高能态,接着又以辐射形式去活化,就可以观察到原子荧光。原子荧光可分为三类:共振原子荧光、非共振原子荧光与敏化原子荧光。3.6.1.1共振原子荧光原子吸收辐射受激后再发射相同波长的辐射,产生共振原子荧光。若原...
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第三节 荧光免疫测定
第三节 荧光免疫测定 一、时间分辨荧光免疫测定 以常用荧光素作为标记物的荧光免疫测定往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰,以及激发光源的杂射光的影响,使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免...
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第二节 荧光抗体技术
第二节 荧光抗体技术 一、荧光抗体的制备 (一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记...
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荧光蛋白照亮细胞生物学
自从1962年科学家们首先在水母体内发现绿色荧光蛋白(GFP)以来,这种神奇的蛋白质技术获得飞速地发展,成为了生物学功能研究的重要工具之一。除了水母中的绿色荧光蛋白,研究人员还从其他的动物体内分离获得了多种GFP...
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荧光抗体的制备
(一)免疫球蛋白的提取(二)荧光素1.荧光色素的基本条件(1)具有化学活性基团,如异硫氰基(-NCS)等,易与免疫球蛋白结合形成共价键。(2)对免疫球蛋白无毒性,不影响抗体活性。(3)荧光效应高,与蛋白结合需要...
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第四节 荧光显微镜检查法
第四节 荧光显微镜检查法 一、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本...
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神奇的荧光蛋白:让老鼠和猪也发光
据美国《连线》杂志报道,凭借在绿色荧光蛋白质(GFP)研究领域取得的重要成就,3名科学家上周最终问鼎诺贝尔化学奖,他们分别是马丁·查尔菲(MartinChalfie)、钱永健(RogerY.Tsien)和下村修(OsamuShimomura)。绿色荧光蛋白质可以帮助科...
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第三节 免疫荧光细胞化学染色方法
第三节 免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色切片经固定后,...
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激光扫描共聚焦显微镜中荧光强度的测定条件研究
【摘要】目的本文对应用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光强度的测定条件做了详细的分析。方法选择和设置激光扫描共聚焦显微镜的各参数,对用间接免疫荧光法检测改性后的材料表面对人牙龈成纤维细胞分泌细胞外基质纤粘连...
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免疫荧光细胞化学染色方法
...胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗...
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第二节 荧光抗体的制备
第二节 荧光抗体的制备 荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。 一、荧光素 荧光是指一个分子或原子吸收了给予的...
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激光诱发荧光诊断早期肺癌的研究现状
一、激光诱发荧光诊断肿瘤的基础 所谓激光诱发荧光(laserinducedfluorescence,LIF),即物质分子被激光激发后,一部分处于激发态的分子在下降到基态的过程中,以光子形式释放出它所吸收的能量的过程。因受激分子在由激发态下...
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免疫荧光非特异性染色的消除方法
...,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检...
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我国具有绿色荧光遗传特征克隆猪猪崽增至4头
记者2月17日从东北农业大学获悉,中国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪今年1月成功产下的11头猪崽中,又有2头猪崽被确认具有绿色荧光遗传特征,从而使这窝猪崽中“荧光猪崽”总数由2头增加至4头。据介绍,2006年12月,由东北...
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俄科学家培育出最强荧光蛋白质
据国外媒体报道,莫斯科的科研人员培育出一种深红色的荧光蛋白质,这种蛋白质发出的光穿透性极强,即使蛋白质位于小动物体内深处,其发出的光也可穿透生物体被外界看到,这使生物学家能够更方便地监视活生物体的发病...
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荧光素钠用于眼底荧光血管造影不良反应的临床观察
【摘要】目的观察荧光素钠眼底血管造影时出现的不良反应。方法20%荧光素钠快速静脉推注(肘前静脉)后边拍照检查边观察患者的反应。结果造影560例,17例出现不良反应,占总数3.04%。结论眼底荧光血管造影是一种安全可靠...
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急性前部缺血性视神经病变的眼底荧光血管造影表现特点
...观察分析23例(35眼)急性前部缺血性视神经病变的眼底荧光造影(FFA)图像表现特点。方法收集本院做过FFA检查的视盘水肿病例分为两组进行回顾性、对比性分析。Ⅰ组为确诊急性前部缺血性视神经病变患者,Ⅱ组包括急性视...
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科学家发现可开关型的荧光蛋白
奥勒岗大学(UniversityofOregon)的科学家发现绿色荧光蛋白(greenfluorescentproteins),在置入一个单氧原子后,能持续维持不发光的状态达65小时之久,这项研究结果发表于近期的PNAS期刊。S.JamesRemington教授表示:「能控制荧光蛋白的荧光...
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Ⅳ型胶原在贲门癌自体荧光诊断中的意义初步探讨*
...门组织癌变后Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白分布的改变对组织的自体荧光产生的影响。方法采用免疫组化技术,半定量计分分析Ⅲ、Ⅳ型胶原在16例贲门癌病人正常组织和癌组织中的分布差异。结果正常组织的基底膜呈现很强的Ⅳ型胶原抗体...
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血液透析患者视盘水肿的荧光素眼底血管造影表现特征
【摘要】目的探讨行血液透析过程中出现视盘水肿患者的荧光素眼底血管造影(FFA)的表现特征。方法终末期尿毒症在血液透析过程中视盘水肿患者4例,在血液透析前行FFA检查,分析其FFA的表现。结果4例患者FFA表现为:视盘境...
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照明与近视关联的研究进展
【关键词】视力,低;采光;荧光;白炽光 照明与近视的关联涉及2个方面:一是照明的“量,此方面的研究结论比较一致,即在1000lx以下的范围内,照度越高越好[1-2];二是照明的“质,即学生接触到的各种光源的...
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第五节 非特异性染色的消除方法
...,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检...
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为何三人分享?
...此重大发现,瑞典皇家科学院在其新闻公报中评价,绿色荧光蛋白“已经成为现代生物科学最重要的工具之一”,三位科学家在不同阶段对这一研究作出贡献,是此次诺贝尔化学奖授予他们三人的原因。 其实,生物发光的现...
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荧光分析法
标题荧光分析法附录序号附录Ⅳ内容全文 E.荧光分析法 某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光。物质的激发光谱和荧光发射光谱,可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所...
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免疫荧光染色方法
(一)制片选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙醚等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。(二)固定除研...
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荧光蛋白“光控开关”的结构基础确定
美国科学家最新发现了决定荧光蛋白发光的分子机制,并通过插入一个单氧原子使荧光蛋白的处于“关闭”状态长达65小时。该研究成果在线发表于《美国国家科学院院刊》(PNAS)上。领导该研究的美国俄勒冈大学物理学和分子...
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诺奖得主钱永健:爱“色”的荧光顽童
...引人注目。 钱永健一走上台,灯光一暗,投影片上的荧光水母开始舞动,上千名听众屏息聆听他解说发明绿色荧光的重要过程,原本躲在显微镜下的荧光蛋白宛若正在上演一场科学家导演的荧光科幻电影。 漂亮的颜色与...