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第一节 抗生物素
第一节 抗生物素—生物素免疫细胞化学染色法 一、基本原理 很早以前,人们就注意到给动物饲以大量的鸡蛋白,会引起明显的“维生素H缺乏症”,也称为“蛋白质伤害”。经研究发现,在鸡蛋白中含有一种碱性蛋白...
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生物素:酝酿新一轮市场扩张?
导读:从20年前炙手可热,到后来身价暴跌,再到现在,生物素似乎又要重现辉煌了。目前,我国已成为世界生物素生产大国兼出口大国,在国际市场上已拥有产品的定价权,生物素生产正面临着极好的机遇。生物素又称为维生...
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生物素化HCV抗原的标记率、提纯纯度及活性检定
【摘要】目的建立生物素标记HCV抗原及质量检定方法,研制双抗原夹心检测HCV抗体试剂。方法用长臂生物素标记修饰过的HCV抗原,采用Avidin亲和层析柱方法计算标记率,SDS-PAGE检测纯度,酶联免疫测定活性。结果生物素化HCV抗...
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欧盟批准生物素用作饲料添加剂
最近,欧盟发布(eu)2015/723号法规,批准生物素作为所有动物的饲料添加剂使用,法规有效期至2025年5月26日。该法规明确了添加剂的构成:生物素,并说明了检测方法,即饲料添加剂中生物素的测定方法,采用电位滴定法和光...
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免疫PCR(ImmunoPCR,Im-PCR)
...上抗原抗体复合物中的抗体IgG结合,而链亲合素部分可与生物素化的pUC19(质粒DNA)(Biotin-pUC19)中的生物素反应,从而将特定的DNA间接吸附于固相。接下来,就是第二步中的PCR过程,第一步中吸附于固相的pUC19质粒DNA在相应的引物存...
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生物素酶缺乏症一例研究
中华皮肤科杂志.2004.037(006).-317-319近期探讨了因生物素酶缺乏症所致皮肤、神经损害患儿的临床特征、诊断与治疗方法。患儿男,生后2个月头部出现散在湿疹、脓疱疹,8个月时全身发红、脓疱疹;智力发育正常,运动发育落后...
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生物素酶缺乏症一例研究
...年02月18日中华皮肤科杂志.2004.037(006).-317-319近期探讨了因生物素酶缺乏症所致皮肤、神经损害患儿的临床特征、诊断与治疗方法。患儿男,生后2个月头部出现散在湿疹、脓疱疹,8个月时全身发红、脓疱疹;智力发育正常,运动...
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第四节 非放射性标记的核酸探针
...口平移法,随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。50μg)如光敏生物素标记核酸方法,不需昂贵的酶,只在光照10...
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通过表面耦联(氨基聚乙二醇)生物素实现高分子纳米粒子的通用性表面改性
...教授所在研究小组,发展了一种基于纳米粒子表面耦联的生物素与亲和素特异性结合,比较通用的高分子纳米粒子表面改性方法[4]。该工作发表在2007年6月份美国化学学会刊物BioconjugateChem.上。一般为了实现药物靶向性输送,高...
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5.13 泛酸与生物素
5.13 泛酸与生物素 B族维生素中尚有泛酸及生物素,它们具有很重要的生理功能,但由于来源广泛,人体未发现有典型的缺乏病例。 5.13.1 泛酸 泛酸是丙氨酸藉肽键与α,γ-二羧-β-β-二甲基丁酸缩合而成,它是...
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CD8+细胞免疫亲合柱的研制及条件探讨①
...凝胶Bio-Gel上,制成免疫亲合柱;将外周血单个核细胞与生物素化抗CD8单克隆抗体作用后,加到该免疫亲合柱上进行纯化,CD8+细胞即吸附于柱上,洗去其他细胞后,得到纯化的CD8+细胞。结果:纯化后CD8+细胞纯度达56%~7l%,细...
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酶标法FSH、HCG及PRL检测药盒的研制
...测药盒的研制。方法采取抗人FSH、PRL及HCG单克隆抗体,同生物素/亲和素酶联免疫系统相结合,制备检测人血清FSH、PRL及HCG激素水平的ABC-ELISA检测药盒。结论灵敏度较常规的ELISA法提高了4~80倍,和同位素法(RIA)相比较差异无显...
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第五节 寡核苷酸探针的制备
...量的乙二胺作用,就可以引入一个带氨基的接臂。用活化生物素标记就可以得到5’-磷酸标记的寡核苷酸探针。 3.酶标探针法用双功能联接剂如辛二酸双羟基琥珀亚胺酯联接寡核苷酸和碱磷酶,可以生成1:1的酶标寡核苷酸...
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第十九章 核酸(基因)分子探针--第一节 概述
...靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体,以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交,形成杂交体,再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断,称...
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酶联免疫吸附实验(ELISA)基本原理
...性IgM抗体存在,是为阳性反应。 (六)应用亲和素和生物素的ELISA 亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉...
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第三节 ELISA的原理和类型
...性IgM抗体存在,是为阳性反应。 (六)应用亲和素和生物素的ELISA 亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉...
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日科学家成功解析一种蛋白质复合体晶体结构
...成发病或病情加重的疾病。研究人员说,此前已经知道,生物素蛋白连接酶与肥胖和糖尿病等生活习惯疾病相关。但是,科学家对于生物素蛋白连接酶的了解还非常不足。在此次研究中,来自理化研究所SPring-8中心的研究人员...
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应用免疫组化LSAB法进行ER和PR检测
链霉亲和素生物素法(LaballadStreptavidinBiotinMethod,LSAB)是近年来在免疫病理诊断中采用的一种新方法。雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的检测,对指导乳腺癌的临床治疗和预后判断具有重要意义。应用LSAB法进行ER和PR检测,...
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Science:蛋白质组绘图新技术
...位标记的蛋白,对这一信息进行重建。新系统利用了一种生物素(biotin)化学标记。为了用生物素标记蛋白质,研究人员首先设计出了一种命名为“APEX”的新酶。该酶是一种过氧化物酶。每种过氧化物酶都具有不同的底物,生...
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幽门螺杆菌cagA基因探针的制备与临床应用
...民医院关键词:幽门螺杆菌;cagA基因;克隆;长臂光敏生物素 【摘要】 目的 研究cagA+Hp(幽门螺杆菌)与胃肠道疾病的关系,并探讨长臂光敏生物素标记的cagA基因探针的临床意义。方法 构建含cagA基因片段的重组质粒克隆...
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免疫-PCR技术进展
...抗体,并洗去未结合的抗体分子。(3)加入稀释的已与生物素化PUC19的结合的链亲和素-蛋白A嵌合体(蛋白A能与抗体结合,而链亲和素可与生物素化PUC19中的生物素结合),并洗去未结合的嵌合蛋白-Puc19复合物。(4)PCR扩增抗体...
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信号放大时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用
...和,蛋白质活性受损少;测量快速,易于自动化。 2生物素—链霉亲和素系统放大的时间分辨荧光分析 1988年,出现了一种新的双功能螯合剂,称为4,7-双(氯磺酰基苯基)-1,10-菲咯啉-2,9-二羧酸[4,7-bis(chlorosulfophenyl)-1...
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双抗夹心免疫PCR法检测人促甲状腺激素(TSH)
...检测低浓度抗原分子。方法用单克隆抗体包被Eppendorf管,生物素化多抗和游离的亲和素作为连接分子,生物素化重组质粒作为指示分子,用特异引物扩增指示分子,同时与放射免疫技术、免疫放射技术和ELISA方法作比较。结果这...
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分子生物学检测在HP感染中的应用
...杂交法将幽门螺杆菌HP基因组探针用于HP检测,并与32P、生物素、光敏生物素及半抗原磺基基团四种标记探针进行比较,结果显示:32P、生物素及磺基标记探针的灵敏度为100pg靶DNA,相当于5×104个细菌,而光敏生物素标记探针的灵...
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光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序
(1)石蜡切片脱蜡入水后,置0.1mol/lPBSpH7.2冲洗5min;冰冻切片直接入PBS冲洗5min。 (2)0.1mol/l甘氨酸PBS冲洗5min。 (3)0.4%TritionX-100PBS冲洗15min。 (4)蛋白酶K1μg/ml(0.1mol/lTris–HClpH8.0,50mmol/LEDTA配)37℃保温30min。 ...
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第二节 原位分子杂交技术在电镜水平的应用
...应用的均是同位素标记核酸探针,直到1986年Binder首先用生物素标记的rDNA及UI探针,在蜂蝇(Drosophila)卵巢,应用Lowicryl-K4M低温包埋的切片上进行原位分子杂交,以蛋白A和胶体金复合物作为显示系统,较好的保存了组织的形态学...
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免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策
...,但可以通过形态学辨认出巨噬细胞而引起重视。内源性生物素的着色最具有欺骗性,因为它广泛的存在于组织细胞中,我们研究结果显示:冰冻组织中存在内源性生物素,经福马林固定石蜡包埋后生物素被封闭,加热抗原修复...
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二、组织学研究方法
...PAP法示意图 免疫细胞化学术近10年来又有新进展,如生物素-亲合素等新颖试剂的应用,为检测微量抗原、受体、抗体开辟了新途径。生物素(biotin)又称维生素H,是从卵黄和肝中提取的一种小分子物质(分子量244.31);亲...
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酶联免疫吸附实验(ELISA)
...虫IgM抗体已获成功。2.2.7ABS-ELISA法 ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白,分子 量60000,每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物,分子量 244。用化学方法制...
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免疫组化检测工作中应注意的几个问题
...要原因有以下几点。 5.1是否有效的祛除了内源性酶和生物素应注意的是,并不是每一种组织均需要祛除内源性酶和生物素,但对于内源性酶和生物素含量丰富的组织如肝脏、肾脏等,如染色效果不佳,均考虑此原因。处理方...