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荧光定量PCR技术在女性泌尿生殖系感染中的应用
【摘要】目的探讨荧光定量PCR(FQ—PCR)检测技术在女性泌尿生殖系感染诊断中的应用。方法用荧光定量PCR法、普通PCR法及免疫荧光技术对STD门诊有泌尿生殖感染者178例女性分泌物进行了沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)、单...
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定量PCR技术
定量PCR(PolymeraseChainReaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量。 广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类...
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荧光定量PCR与沙原衣原体培养在检测泌尿生殖道沙眼衣原体时的对比分析
【摘要】目的探讨荧光定量PCR在检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染诊断中的价值。方法我们对性病门诊600例患者随机分成两组,一部分采用荧光定量PCR检测沙眼衣原体,一部分采用沙眼衣原体培养的方法进行检测分析。结果沙眼衣...
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荧光定量RT-PCR检测AFPmRNA基因表达
【摘要】目的建立荧光定量RT-PCR方法检测AFPmRNA基因表达的方法,了解肝癌组织中AFPmRNA的表达水平。方法用荧光定量PCR方法检测33例肝癌及癌旁组织AFPmRNA表达水平。结果33例肝癌组织和癌旁组织AFPmRNA表达均阳性,肝癌组织AFPmRNA的...
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尿嘧啶DNA糖基化酶在荧光定量PCR技术中的应用
【摘要】目的建立尿嘧啶DNA糖基化酶在荧光定量PCR技术中应用,以控制PCR技术中可能出现的污染问题。方法用乙肝病毒HBVDNA核酸扩增荧光定量检测试剂盒构建模拟污染源的U-DNA,经尿嘧啶DNA糖基化酶消化后,用试剂盒检测其抗污...
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胎盘组织荧光PCR诊断早期先天梅毒的研究
...梅毒对照孕妇的胎盘和脐带组织进行梅毒螺旋体DNA的荧光定量PCR检测,并与常规临床及血清学综合诊断方法比较。结果34例梅毒孕妇的胎盘组织中,11例荧光PCR为阳性,阳性率为32.35%,30例非梅毒孕妇的胎盘和脐带样本荧光PCR均为...
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实时PCR检测HSV2DNA的方法学评价及应用
【摘要】目的对本室利用TaqManMG技术建立的HSV2实时定量PCR法进行方法学评价及临床应用。方法收集60名近期有流产史妇女的全血及血清标本,分别用FQPCR和ELISA法同时检测,并进行比较;另对FQPCR从重复性、灵敏度、线性范...
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应用循环逆转录PCR技术检测丙型肝炎病毒RNA
...一种简便有效的提高RNA检测灵敏度的方法,并适合应用于定量分析 中图分类号:R373.2+1;Q522 文献标识码:A 文章编号:1000-8721(2000)03-0266-04DetectionofHepatitisCVirusRNAbyCirculatoryReversetranscription-PCRCHENRan,WUDi,TANGRong...
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血红蛋白和肝素对FQ-PCR检测HBVDNA结果的影响
【摘要】目的探讨血红蛋白和肝素对荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)定量检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的影响。方法采用沉淀煮沸裂解法提取含不同浓度血红蛋白或肝素的血浆标本中的HBVDNA,应用FQ-PCR方法对HBVDNA进行定量检测。...
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荧光定量和定性PCR平行检测慢性乙型肝炎患者243人份血清中HBV-DNA结果对比研究
...9月在我院就诊的慢性乙型肝炎患者243人份血清进行HBV-DNA定量和定性PCR检测对比研究,探讨HBV-DNA荧光定量PCR和定性PCR的关系。方法采用实时荧光定量PCR方法,检测试剂为深圳匹基公司产品,定量和定性PCR按照常规操作手册进行。...
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实时荧光定量PCR在乙型肝炎诊断中的临床价值探讨
【摘要】目的探讨定量HBV-DNA与HBV其他标志物(HBVM)及乙肝前S1蛋白(Pre-S1)检测间的关系,正确评价其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对360例血清HBVM阳性患者进行HBV-DNA检测,并且还对其中162例HBsAg、HBeAg、HBcAb(即1.3.5)阳...
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荧光定量PCR检测NG、CT和UU三种性病混合感染的分析
...T+UU感染率最高,CT+UU+NG感染率最低。【关键词】实时荧光定量PCR;感染;淋球菌;沙眼衣原体;解脲支原体 淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)通过性传播所致的泌尿生殖道感染者日益增多,且有逐年上升[...
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结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用
【摘要】 目的建立结核分枝杆菌的荧光定量PCR检测方法,探讨荧光PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法根据结核分枝杆菌基因保守序列设计引物和探针,并构建标准品。对102例培养涂阳的结核痰液标本和45例非结核...
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时间分辨荧光免疫法检测乙肝E抗体阳性及PCR定量阴性的意义
...临床意义。方法:收集50例乙型肝炎血清学E抗体阳性且PCR定量结果〈1.00×10^3copies/ml及肝功正常的血清标本,用时间分辨荧光免疫分析技术进行定量检测,然后进行结果分析。结果:用TRFIA方法检测,有18例血清标本HBsAg、HBeAb...
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HBV前C区部分序列亚克隆与FQ-PCR标准曲线的制备
...病毒性肝炎早期诊断价值和意义并基于此靶基因制备荧光定量PCR标准曲线。方法设计特异性引物,将pBR322-HBV质粒前C区部分序列PCR产物AT亚克隆至pBS-T载体,提取和纯化质粒DNA,制作标准品并在FQ-PCR仪上得到标准曲线,进而对精确...
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免疫PCR(ImmunoPCR,Im-PCR)
...,用酶或同位素标记抗体可使检测的敏感性提高,常用的定量检测方法ELISA和RIA均基于标记分子可以使检测的信号增强。免疫PCR是在ELISA的基础上建立起来的新方法,用PCR扩增代替ELISA的酶催化底物显色。PCR具有很强的放大能力,...
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荧光定量PCR检测不孕妇女生殖道沙眼衣原体和解脲支原体
...的生殖道沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)感染;比较荧光定量PCR法与UU培养或金标法检测CT的敏感性。方法219例不孕妇女患者取宫颈分泌物,用荧光定量PCR法检测219例分泌物标本UU的DNA,同时对196例标本进行CT的DNA检测。另选68例正常...
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荧光定量PCR检测慢性前列腺炎病原体及临床应用
【摘要】目的应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术准确检测久治不愈或复发性慢性前列腺液中病原体DNA含量,为临床诊断和治疗提供依据。方法应用荧光探针标记引物的荧光定量PCR对246份前列腺液标本进行淋球菌(NG)、沙...
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荧光定量聚合酶链反应检测弓形虫DNA及其临床应用
荧光定量聚合酶链反应检测弓形虫DNA及其临床应用中华微生物学和免疫学杂志2000年第4期第20卷检测技术作者:符生苗 阮和球 陈鑫萍 庞海云 徐文 凌奕 杨力芳单位:符生苗阮和球陈鑫萍庞海云凌奕(570311海口,海南省...
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抗凝剂对定量检测乙型肝炎病毒DNA的影响
【摘要】 目的探讨用实时荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒DNA拷贝数时,不同抗凝剂对乙型肝炎病毒DNA定量检测的影响。方法采集40例乙型肝炎患者血液,分别置于不含抗凝剂及含肝素钠、枸缘酸钠、EDTA-K2抗凝剂的无菌试管...
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反复冻融对荧光实时定量PCR质粒标准品的影响研究
...盒所配的低浓度标准品应避免反复冻融。【关键词】实时定量PCR;质粒DNA标准品ResearchonstabilityofplasmidDNAstandardsforfluorescencequantificationreal-timePCR WANGHeng-li,CHENHong-tao,KONGMei,etal.DepartmentofClinicalLaboratory,TheFifthAffiliatedHospitalofSunYat-senUni...
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FQ-PCR检测乙型肝炎HBVM和前S1抗原不同模式的HBV-DNA含量及意义
【摘要】目的评价实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术在乙型肝炎诊断和治疗中的应用价值。方法用FQ-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时检测693份初诊标本和治疗3个月前后231份复诊病人标本的HBVM和HBV-DNA。结果HBVM模式共16组,其中HBeA...
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荧光定量RT-PCR快速检测手足口病病原研究
【摘要】 目的建立荧光定量RT-PCR技术用于检测手足口病的肠道病毒。方法利用TaqMan技术,设计一对共引物及探针,建立、优化反应体系后,构建质粒标准品,利用10倍稀释法建立相对定量标准曲线,根据TCID50倍比稀释,建立...
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如何看待病毒性肝炎的基因诊断
...映血液中病毒含量的变化,但试剂价格十分昂贵,在HBVDNA定量检测中,线性范围的下限较高,HCVRNA的定量检测中敏感性不够,难于在临床上广泛应用。90年代后期,Digene公司推出了第二代杂交捕获法检测HBVDNA的试剂,通过化学发光捕获...
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乙型肝炎病毒荧光定量检测与其血清标志物检测结果的相关性研究
【摘要】目的用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测乙型肝炎病毒HBV-DNA,了解HBV-DNA荧光定量检测结果与HBV免疫标志物不同类型之间的关系。方法对220例慢性乙型肝炎患者,用FQ-PCR方法检测乙型肝炎病毒HBV-DNA含量,用ELISA方...
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培养法与荧光定量聚合酶链反应法检测生殖道解脲支原体的方法学比较
【摘要】目的比较液体培养法和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法2种常用检测解脲支原体(Uu)的方法,并分析其优缺点。方法应用培养法与FQ-PCR法对85例不孕不育妇女的宫颈拭子标本进行解脲支原体检测。结果种检测方法符合...
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乙肝病毒核酸定量测定的临床价值
【摘要】目的研究乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与血清学免疫标志物及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的关系。方法用荧光定量PCR法检测326份乙肝表面抗原阳性标本中的HBV-DNA,同时检测血清免疫标志物和ALT。结果326例乙肝表面抗...
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客观评价乙肝病毒基因检测在临床诊断中的意义
...V病毒,结果分别报告为“阳性”或“阴性”。 2HBV-DNA定量检测 用于HBV-DNA定量检测的方法主要有:荧光PCR法、竞争PCR法、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记物法和PCR酶联化学发光等方法。这些方法各有优缺点,所使用的仪器设...
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乙型肝炎病毒荧光定量检测与其血清标志物检测结果的相关性研究
【摘要】目的用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测乙型肝炎病毒HBV-DNA,了解HBV-DNA荧光定量检测结果与HBV免疫标志物不同类型之间的关系。方法对220例慢性乙型肝炎患者,用FQ-PCR方法检测乙型肝炎病毒HBV-DNA含量,用ELISA方...
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原发性胆汁性肝硬化外周血中颗粒溶素的基因表达水平的检测
【摘要】目的用实时荧光定量RT-PCR的方法测定PBC患者外周血中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY在原发性胆汁性肝硬化(PBC)的表达及意义。方法采用Taqman探针技术,以18sRNA为内对照,测定了60例PBC性心脏病患者外周血中GNLYmRNA的含量...