-
发现病毒蛋白影响HIV辅助受体的功能
...究所的研究人员发现,人类巨细胞病毒(HCMV)所编码的蛋白UL33及UL7,在与宿主细胞的趋化因子受体CCR5及CXCR4异聚化后,会损害它们作为HIV辅助受体的功能。相关研究成果于5月24日发表在Blood上。巨细胞病毒属于疱疹病毒科,其感染...
-
微量移液枪的使用
...ipetsizeswehaveonhand.P1000P200P100P20Whatsizeofautopipetisrightforthejob?RULEOFTHUMB:AlwaysselecttheSMALLESTsizepipetthatwillhandlethevolumeyouwishtomovetoachievethegreatestaccuracy.Accuracydecreasesasyouuseunnecessarilylargepipetsforsmallvolumes.Thefollowingtableshowstheusefulvolumerangesforeachpi...
-
RAPD操作要点
一、材料 不同来源的DNA(50ng/ul)。 二、设备 PCR仪,PCR管或硅化的0.5mleppendorf管,电泳装置。 三、试剂 1、随机引物(10mer)(5umol/L):购买成品。 2、Taq酶:购买成品。 3、10xPCR缓冲液:配方见第八章。 ...
-
用基因芯片技术检测拉米夫定相关性HBV变异
...HBVDNA的提取:分别取治疗后12个月、21个月的血清标本100ul,加入300ulTES(含10mMTris-Hcl;10mMEDTA,0.1%SDS;200ug/ml蛋白酶K)65℃冰浴3小时,酚/氯仿抽提,取上清,加入1/10体积5M的NaAC(PH52),用2倍无水乙醇沉淀,-20℃过夜,12000rpm离心10...
-
GC检测使拥有溶剂残留
...的带胶塞的玻璃瓶中,在50摄氏度放置30分钟,取液上气1ul注入气相色谱仪在10分钟内无干扰即可使用。如有干扰用超声波处理30分钟。 3、六号溶剂标准溶液称取洗净干燥的10毫升气化瓶的质量为A,瓶中放入比气化瓶体积少0.5...
-
GC检测食用油溶剂残留
...的带胶塞的玻璃瓶中,在50摄氏度放置30分钟,取液上气1ul注入气相色谱仪在10分钟内无干扰即可使用。如有干扰用超声波处理30分钟。3、六号溶剂标准溶液:称取洗净干燥的10毫升气化瓶的质量为A,瓶中放入比气化瓶体积少0.5毫...
-
气相色谱法检测食用油溶剂残留
...的带胶塞的玻璃瓶中,在50摄氏度放置30分钟,取液上气1ul注入气相色谱仪在10分钟内无干扰即可使用。如有干扰用超声波处理30分钟。3、六号溶剂标准溶液:称取洗净干燥的10毫升气化瓶的质量为A,瓶中放入比气化瓶体积少0.5毫...
-
GC法检测食用油溶剂残留
...的带胶塞的玻璃瓶中,在50摄氏度放置30分钟,取液上气1ul注入气相色谱仪在10分钟内无干扰即可使用。如有干扰用超声波处理30分钟。3、六号溶剂标准溶液:称取洗净干燥的10毫升气化瓶的质量为A,瓶中放入比气化瓶体积少0.5毫...
-
RNA提取流程
...离,用小Tip吸干液体。气干沉淀5-10分钟,DEPC处理水20-30ul加入,中枪打匀,55-60℃水浴10分钟溶解总RNA,测OD值。 6)、电泳。 3.2从总RNA中分离mRNA(OligotexmRNAMiniKit,Cat.no.:70022,QIAGEN) 1)、取上述提取的总RNA若干(少于...
-
双波长薄层扫描法测定乌灵胶囊中多糖的含量
...岛津);旋转蒸发仪RE52A型(上海亚荣生化仪器厂);5ul微量进样器(上海医用激光仪器厂)。 试剂:无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所);乌灵胶囊0.33mg/粒批号(20040212,20050414,20050617,浙江佐力药业股份有...
-
RNA提取实验方法流程
...离,用小Tip吸干液体。气干沉淀5-10分钟,DEPC处理水20-30ul加入,中枪打匀,55-60℃水浴10分钟溶解总RNA,测OD值。 6)、电泳。 3.2从总RNA中分离mRNA(OligotexmRNAMiniKit,Cat.no.:70022,QIAGEN) 1)、取上述提取的总RNA若干(少于...
-
外周血DNA提取技术
...。室温挥发残留的乙醇,但不要让DNA完全干燥。加TE液20ul溶解DNA,置于摇床平台缓慢摇动,DNA完全溶解通常需12-24小时。 5.DNA的浓度测定及纯度判定:取DNA溶液用TE液做适量稀释,以TE液作空白对照,在紫外分光光度计上读取A26...
-
感受态细胞的制备
...种于5mlLB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,取50ul培养液转入5mlLB中,37℃振荡培养1~1.5小时至对数生长期OD600=0.5左右。2、感受态细胞的制备⑴、将培养液1.5ml转入离心管中,冰上放置20分钟。⑵、置于4℃,5000rpm离心5...
-
NorthernBlots技术
...1.5ml离心管中配制以下反应液: 模板DNA(25ng) 1ul RandomPrimer2ul 灭菌水11ul 总体积:14ul 2.95°C加热3分钟后,迅速放置于冰冷却5min。 3.在离心管中按下列顺序加入以下溶液: 10×Buffer2.5ul dNTPMixt...
-
NorthernBlot技术
...1.5ml离心管中配制以下反应液: 模板DNA(25ng) 1ul RandomPrimer2ul 灭菌水11ul 总体积:14ul 2.95°C加热3分钟后,迅速放置于冰冷却5min。 3.在离心管中按下列顺序加入以下溶液: 10×Buffer2.5ul dNTPMixt...
-
嗅鞘细胞移植部位与剂量的选择对陈旧性脊髓损伤患者60例神经恢复的影响
...周的OECs,常规脊椎后入路切开硬脊膜借助手术显微镜将50ulOECs悬液单点移植于受损脊髓上段与正常脊髓交界处(共30例A组)。用同样方法将50ul×2(最多可达50ul×4)OECs分多点移植于损伤脊髓上下端,即损伤脊髓与正常脊髓的交界...
-
病毒RNA提取
...骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题): 1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管 2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀 3.13000rpm离心15min 4.在第3步离心快结束时,...
-
分子生物学试验方法探讨四-PCR常见问题
... 反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul后,再做大体积时,一定要模索条件,否则容易失败。 ...
-
单纯疱疹病毒疫苗研究进展
...9395株敲除了γ34.5(与干扰素抵抗和神经毒性相关的基因)和UL55、UL56基因,但仍有微弱的潜伏感染能力。AD-472株又敲除了US10、US12和UL43.5基因,不再具有潜伏能力。另一种具有复制能力的HSV-2病毒株着重于增强免疫原性,除敲除γ34.5基因...
-
自动进样器的技术原理
...品环的体积,图2a是这种方法的示意。例如,阀上装了20ul的样品环,样品被注入环中直到多余的样品从废液口排出,当转子转到inject位置时样品环中的样品就进入柱子。由于流体动力学的原因,分析者至少需要注入两倍于样品环...
-
第二节 CMV基因组结构
...毒株。CMV与其他疱疹病毒一样,具有1个长的单一序列(UL)及1个短的单一序列(US)。UL和US的相连处及两端均为DNA重复序列。UL约115×103KDa,约占16%。UL两端的两个反向重复序列约占90%;US两端的两个反向重复序列约占2%。由于UL...
-
石蜡DNA提取
...10000×3分钟,去上清;95%;75%;50%。 3.消化:1×SSC500UL,洗涤沉淀,12000×3M离心。干燥沉淀后加石蜡消化液400UL,20mg/ml的PK20ul;55度消化120小时,至第四天,补加PK10ul。 4.消化后见液体清亮,肉眼见组织较少。将其转入98度...
-
RFLP和RAPD技术
...第三节RAPD技术 一、材料 不同来源的DNA(50ng/ul)。 二、设备 PCR仪,PCR管或硅化的0.5mleppendorf管,电泳装置。 三、试剂 1、随机引物(10mer)(5umol/L):购买成品。 2、Taq酶:购买成品。 3、10xPCR缓冲液...
-
聚合酶链反应检测汉坦病毒感染的实验研究及临床应用
...病毒流行的血清型、汉坦型(HNT)病毒76~118株及汉城型(seoul)病毒80~39株的M基因G1区的核苷核序列,设计两对属特异性公有引物及一条探针,建立了检测汉坦病毒RNA的反转录-套式PCR(RT-nestedPCR)方法,并用于检测出血热病人不同病程...
-
小鼠组织切片免疫组化实验
...释10倍使用),DAB显色液(临用前配制:试剂盒A、B、C各50ul,于1ml水中混匀)。方法1.石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜2.二甲苯中脱蜡,梯度酒精入水(无水乙醇,95%酒精),浸泡于蒸馏水中待用3.抗原修复取500mlEDTA抗原修复工作液...
-
缅甸佤帮北部萨尔温江流域5例三日疟病例报告
...原虫。患者体温及疟原虫无性体密度分别为37.8℃、2100个/ul血。 病例2,叶某,女性,年龄45岁;2007年11月15日在巡诊时用疟疾快速诊断卡(美卡)检测被发现;有效线显示有效;恶性疟位置显示阴性,非恶性疟位置显示阳性。经...
-
Broadlytargetedhumancytomegalovirus-specificCD4+andCD8+Tcellsdominatethememorycompartmentsofexposedsubjects
1VaccineandGeneTherapyInstitute,DepartmentsofPathologyandMolecularMicrobiologyandImmunology,andtheOregonNationalPrimateResearchCenter,OregonHealthScienceUniversity,Beaverton,OR970062CorixaCorporation,Seattle,WA981043InstitutfürMedizinischeImmunologie,Charité,10098Berlin,GermanyHumancytomegalovirus...
-
用高效液相色谱法分析植物组织中多胺含量技术的探讨
...浴浸提1小时后离心(15,000g,30分钟,4℃)。取上清500ul加入10ml带盖塑料离心管,加入7ul苯甲酰氯,再加入1ml2MNaOH,涡漩20s后在37℃水浴反应20min。加入2ml饱和NaCl溶液,混匀后用2ml乙醚萃取,取1ml醚相真空干燥,用100ul甲醇涡旋...
-
常见实验用溶液的配制方法
...组分V)(可选)水5ml1mol/L贮液1ml1mol/L贮液1ml1mol/L贮液200ul100mmol/L贮液50ul1mmol/L贮液0.5ml10mg/mL贮液2.25ml将配制好的缓冲液分装成小份,贮存于-20℃。100mmol/LdNTP溶液(dNTPsolutions)可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液,-80℃可贮存至少6个月...
-
气相色谱法测定水中苯、甲苯、二甲苯和硝基苯分析方法
...仪,配置FID检测器,手动进样,配置工作站,注射器:0.5uL、1uL、5uL、10uL。 标准物:苯(色谱纯) 甲苯(色谱纯) 二甲苯(色谱纯) 硝基苯(色谱纯) 水:蒸馏水 1.2原理:苯、甲苯、二甲苯和硝基苯混...