-
免疫-PCR技术进展
...,PCR技自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术,也是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。而免疫-PCR技术正是运用PCR的高度敏感性来放大抗原抗体反应的特异性,使实...
-
实时PCR质量管理要素分析
【关键词】聚合酶链反应实验室科学质量管理聚合酶链反应(PCR)技术作为现代分子生物学检测的先进手段之一,为多种疾病提供了核酸的诊断依据,但PCR技术是一种基因扩增技术,作为一种分子生物学检测手段其灵敏度达...
-
广东省医学继续教育项目——实用分子生物学实验技术培训班招生简章
-广东省继续医学教育项目-实用分子生物学实验技术培训根据广东省继续医学教育项目计划安排,中山大学药学院分子生物学实验室拟于2007年11月12日至11月18日举办实用分子生物学实验技术培训。培训以实用分子生物学的基本实...
-
尿嘧啶DNA糖基化酶在荧光定量PCR技术中的应用
...+)的血清检出率分别为72.0%,临床用血未检出,可以消除实验室内的PCR产物污染。结论本法快速、简便、特异性好、能排除假阳性。 关键词尿嘧啶DNA糖基化酶HBVDNA荧光定量PCRPCR污染U-DNA模板 由于PCR技术高度敏感性,使PCR...
-
影响结核杆菌PCR结果准确性的因素
...壁完全破坏,同时也未去除Taq酶抑制因子,故影响了整个实验的灵敏度和特异性;异硫氰酸胍法在提取结核杆菌DNA时,同样不能使结核杆菌充分裂解,实验结果要差些;碱裂解直接煮沸法是临床上较常用的方法,简便价廉,灵敏度...
-
手制PCR不再是梦想
...动力学的基本原理,成功研制出了一种既便宜又有效的PCR实验装置。基因扩增仪(PCR)是你实验室里最昂贵的仪器设备,还记得那样的时候么?这种情况以后可能就不会发生了;即使情况不变的话,仍然会有像百战天龙这部电影中...
-
无创产前诊断技术之“哼哈二将”
...染色体的非整倍性疾病。本期推荐由香港中文大学DennisLo实验室的AllenChan教授撰写的综述,介绍数字PCR和NGS(深度测序对每个DNA分子进行序列读取,当然也可以看成是一种核酸层面的计数技术)这两种DNA分子计数技术在NIPT方面的...
-
FDA紧急批准:罗氏rRT-PCR技术用于埃博拉病毒测试
...氏控股独家经营,可在3个小时内出结果,但只能由特定实验室在有限的时间段里探测埃博拉病毒。rRT-PCR技术可与罗氏LightCycler480或COBASZ480仪器配套使用,是一项已被化学发光法高复杂性实验室或其他有资格的非美国实验室使用...
-
RT-PCR技术概述
...PCR系统可得到满意结果。 用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可。 RT-PCR引物的选择 随机引物适用于长的或具...
-
蛋白免疫印迹和荧光-PCR诊断早期先天梅毒研究
...光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和血清IgM抗体蛋白免疫印迹实验(serumIgMwesternblot,IgM-WB)在新生儿先天梅毒早期诊断中的作用。方法在知情同意的情况下,选取34例梅毒孕妇及其新生儿和40例非梅毒对照孕妇及其新生儿,分别给予...
-
沙眼衣原体实验诊断技术进展
...。培养法的特异性为100%,但敏感性一般低于100%,且各个实验室操作步骤有所不同,没有标准化,这可能有助于解释对同一种非培养方法的不同评价。组织细胞培养法是诊断Ct感染的“金标准”[4],但是由于分离培养操作复杂...
-
沙眼衣原体感染的实验室诊断
...引起了全世界对其进行广泛深入的研究[1]。 目前实验室诊断方法基本上可分为细胞生物学检测方法、分子生物学检测方法和免疫学检测方法。 1细胞生物学检测方法 1.1涂片镜检法CT寄生于柱状上皮细胞内形成包涵...
-
双抗夹心免疫PCR法检测人促甲状腺激素(TSH)
...13~1×10-16mol/Lhumannormalserum2.2IM-PCR检测TSH各试剂参考用量实验确定的各试剂的最佳浓度为:单抗:0.08μg/ml;生物素化多抗:40μg/ml;亲和素:0.1×10-3μg/ml;生物素化DNA:0.5×10-3μg/ml。 2.3IM-PCR反应条件调整各步反应时...
-
补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR条件优化
...基因敲除小鼠(geneknockoutmouse)是利用基因敲除技术使正常实验小鼠的基因组特定位点上目的基因失活,经过繁殖筛选后所得到目的基因表达缺陷小鼠,是研究被敲除的目的基因的理想实验材料[13]。为了获得可靠的动物模型,基因敲...
-
由普通PCR向快速PCR的革命—BioDev
...材和特殊试剂盒,无需添加仪器和设备,也不会影响下游实验。FasterTaq延伸速度明显快于普通Taq酶。FasterTaq(SF/GF-Taq)在相同反应体系中扩增5kb片段,94℃20s,55℃2s,25个循环,延伸时间见图所示。当延伸时间缩短至1m30s时,只...
-
PCR-SSCP技术
...力工具.但这些方法操作比较繁琐,局限性较大,或要求实验条件高,不适合一般临床实验室使用.1989年问世的PCR-SSCP(下文称SSCP)作为检测基因突变的方法,经不断地改进和完善,更为简便、快速、灵敏,不但用于检测基因点突变...
-
乙型肝炎的实验室诊断及质量控制
...治工作。卫生部计划在未来3~4年内逐步建立全国乙型肝炎实验室检测网络,制定《全国乙型肝炎实验室检测工作技术规范》,加强实验室网络人员培训,提高乙型肝炎的实验室诊断水平。以下就目前我国开展的乙型肝炎实验室诊断技...
-
结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用
...100V,时间1h。ABI3130基因分析仪序列分析。 1.8特异性实验 分别用阴性痰标本提取物25份和金黄色葡萄球菌DNA提取物、肺炎链球菌DNA提取物、肺炎克雷伯杆菌DNA提取物共20份为对照模板进行Taq-man探针进行实时PCR检测。 1.9...
-
艾滋病的实验室检查
对艾滋病病人的特殊实验室检查包括针对HIV感染的检测和感染者及感染病毒状态的检查。针对HIV感染的检测包括对病毒及其成分的检测以及病毒感染后机体特异性的反应物(抗体、特异性免疫细胞等)的测定,对感染者及病毒状态...
-
检测HBVDNA/Ig-双特异性循环免疫复合物的免疫捕捉法PCR①
...学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 厦门 361005);彭宣宪(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 厦门 361005);柳 珑(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤...
-
荧光定量PCR技术在女性泌尿生殖系感染中的应用
...及反应前荧光量,A1为PCR反应后荧光量。计算AX=A1-A0判定实验的有效性。将阳性对照管的AX称为N,定量阳性质控管(102基因拷贝/μl)的AX称为P1。在实验有效的前提下,样品AXN+4/5x(P1-N)判为阳性,否则为阴性。以定量阳性质控管...
-
血红蛋白和肝素对FQ-PCR检测HBVDNA结果的影响
...法去除血红蛋白和肝素的能力进行评价,旨在建立和完善实验室的标本采集和处理程序。 1材料与方法 1.1仪器与试剂iCycler荧光定量PCR仪来自美国BIO-RAD公司;HBVDNA荧光定量PCR试剂盒购自深圳匹基基因诊断技术有限公司,试...
-
SYBRGreenI荧光PCR检测登革热病毒基因方法的建立
...结果标准毒株的扩增结果与预期结果相同,测序结果显示实验结果序列与标准株序列一致。实验的灵敏性特异性和重复都较高。结论SYBRGreenI荧光PCR检测登革热病毒的方法是一个快速、准确检测登革热的方法,但它更适用于早期传染...
-
第三节 基因扩增技术(PCR)
... 混匀后,离心15s使反应成分集于管底。以上步骤仅在实验研究用,现在商品化试剂已将dNTP、10×PCR缓冲液,引物,ddH2O混合在一起,反应体积为20-25μl,只要试验人员加入处理好的样品就可以了。 (2)加石蜡油50-100μl于...
-
mRNA差别显示技术(DDRT-PCR)
...物对,经计算机同源性分析表明同样能覆盖全部mRNA,使实验简化,同时由于引物变长,使cDNA扩增更为有效。有的实验室采用把Bakman公司的kit,其引物5′端为26bp,3′端为31bp,并加上了T3和T7两端的测序引物,由仪器切割差异条...
-
荧光PCR检测尿中结核分枝杆菌的意义
...的非典型性肾结核的诊断,在临床有一定困难[1]。在实验室检测中,结核病患者的细菌学检查,是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据[2]。但由于结核菌的遗传特性决定的生长周期长,致使常规细菌学检查方法存在着灵...
-
差异基因研究技术及其应用
...基因。 4消减杂交法(SH) 经典的消减杂交法是将实验组mRNA(或cDNA)与对照组cDNA(或mRNA)杂交,去除杂交体和未杂交上的对照组成分(cDNA或mRNA),得到实验组独有的cDNA或mRNA,这些基因即为差异表达基因。为克服传统...
-
STR-PCR技术监测造血干细胞移植后状态
...判断疾病复发及临床复发前给予干预治疗的重要依据。本实验结果显示病例1和病例2完为HLA全相合,移植后呈全植入状态,患者移植后造血重建,为完全供者型,受者自身血细胞的基因消失,病例3为HLA半相合,虽然临床上有缓解...
-
应用PCR法快速鉴定临床体液标本中致病真菌
...养仅获得菌属的鉴定,要鉴定到菌种尚需经过复杂的生化实验和免疫学实验,而大多数菌种,特别是丝状菌只有通过有经验的技术人员才能识别。因此,我们借助于PCR快速鉴定临床体液标本中的致病真菌,可明显缩短检测时间,...
-
Transgenomic公司推出癌症基因检测突破性PCR技术
...术,该项突破性癌症基因检测技术使用已安装在世界各地实验室的标准测序设备,将无与伦比的敏感性和完整的DNA突变检测巧妙的结合于一体。据悉,该项技术的推出恰逢2012美国临床肿瘤学会的年度会议。 据了解,ICECOLD-PCR...