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Nature子刊:TALEN/CRISPR介导的新型替代基因敲入技术
...Protocols》杂志上,报告了一种利用基因组编辑技术的替代基因敲入方法的精简实验方案。这一创新方法被称作为PITCh系统。基因敲入是通过用一种基因替换另一种基因,以便在体内测定它们是否具有相同的功能,或将正常基因引...
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基因敲入型鼠诞生
...一新创举,运用其专有的锌指核酸技术创造出世界第一只基因敲入型老鼠。基因敲入型老鼠是通过该公司的CompoZr锌指核酸或ZFN技术,将外源基因加入或“敲入”精确选定的鼠体基因组而生。ZFN是一组工程DNA组合蛋白,透过在使...
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世界首例ROSA26基因敲入猪模型诞生
...美国密西根大学教授王忠合作,获得了世界首例ROSA26定点基因敲入猪模型。据称,该研究成功地实现了猪重组酶介导的基因交换,从而解决了一直困扰转基因猪研究领域效率低下、表型不确定的问题。相关研究成果日前在线发表...
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新型基因敲入技术实现了外源基因的插入
近日,来自广岛大学等处的研究人员利用一种新型的基因敲入技术,实现了外源基因向基因组中的有效插入,目前该技术已经在人类细胞、动物模型比如青蛙和蚕中成功实现,该技术不仅可以使得基因在培养中的细胞被插入,也...
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我科学家用CRISPR制备基因敲入猪
.../Cas9介导的基因组编辑,制备了携带Oct4-tdTomato报告基因的基因敲入猪。中科院广州生物医药与健康研究院的赖良学、QingjianZou和云南农业大学的曾养志教授是本文共同通讯作者。转基因猪在农业和生物医药方面都有着广泛的应用...
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CellResearch:吉林大学科研成果世界首例ROSA26基因打靶猪模型诞生
...者与美国密西根大学进行合作,获得了世界首例ROSA26定点基因敲入猪模型。该模型成功地实现重组酶介导的基因交换,从而解决了一直困扰转基因猪研究领域的效率低下、表型不确定的问题。吉林大学动物医学学院院长、中科院...
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动物模型实验新发现小鼠基因有时“种豆得瓜”
...有时甚至全无反应。 研究人员把一个具有癌性特质的基因敲入小白鼠体内。经过一段培育后,小鼠身体没有癌变特征,却表现出后肢乏力,后腿部生长严重缺陷。而且,随着基因敲入的位点变化,转基因所在基因链部位的差...
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Cell子刊突破:无需克隆的CRISPR新技术
...,在数小时内完成CRISPR/Cas9介导基因突变及位点特异性转基因敲入。他们的研究成果发布在10月29日的《StemCellReports》杂志上。CRISPR序列源于原核生物的一种获得性免疫系统,协同Cas(CRISPR-associated)蛋白家族参与抵抗噬菌体或其...
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2014全球新突破基因技术大事记
...酶以及生物机体修复受损DNA(脱氧核糖核酸)的机制。新型基因敲入技术实现了外源基因的导入来自广岛大学等处的研究人员利用一种新型的基因敲入技术,实现了外源基因向基因组中的有效导入,目前该技术已经在人类细胞、动...
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李晓江博士:探讨用CRISPR/Cas9实现大型动物基因组编辑
...蛋白质复合物,以及化学合成双RNA构建出了携带功能盒的基因敲入小鼠,效率高达50%。这一新开发的CRISPR/Cas9系统为其应用于非人类灵长类动物和大型动物中,构建出人类疾病的基因敲入模型或是改造特异的基因提供了广阔的前...
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蛋白偶联受体固有活性为新药开发提供新思路
...体的激素缺陷。在基因表达上,具固有活性的GPCR突变体基因敲入是一种使内源性配体(如胰岛素)下调,从受体激活上直接考虑的很有前景的基因治疗方法。基于上述发现,具固有活性的GPCR突变体基因敲入不失为一种相应的激...
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人类P53突变谱
...实验使用了基因靶向技术,选择和标记经过永生化的人P53基因敲入(HUPKI)鼠胚胎纤维原细胞(HUF)的P53基因序列。用HUPKI我们观察苯并芘(一种主要的烟草烟雾中的致癌物)是否能引起人肺癌特征性的P53基因突变模型。我们发...
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CellStemCell:利用CRISPR/CAS9对人类干细胞系进行可诱导基因敲除
...发现dual-sgRNA的靶向作用对于将FRT序列进行精确的双等位基因敲入非常重要。除此之外,他们还开发了出一种新的策略将一个可调控活性的重组酶表达体系同时导入细胞,移除了药物抗性基因,利用这种方法可以加快iKOhPSC细胞系...
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沪科学家揭开遗传性心房颤动起因:基因突变
...通过膜片钳、微电极、计算机模拟体系、光学标测体系、基因敲入和基因剔除技术的组合,来进一步探索人类心房颤动的起源,并且同时跨入另一个全新研究领域———心室颤动的起源。美国《科学》杂志:中国研究人员第一次...
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NatCommun:新技术实现染色体外源基因的有效插入
...究报告中,来自广岛大学等处的研究人员利用一种新型的基因敲入技术,实现了外源基因向基因组中的有效插入,目前该技术已经在人类细胞、动物模型比如青蛙和蚕中成功实现,该技术不仅可以使得基因在培养中的细胞被插入...
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PLoSOne:交大吴强实验室基因簇研究取得进展
...对基因打靶小鼠的表型分析,利用绿色荧光蛋白作为报告基因敲入原钙粘蛋白位点,发现一个原钙粘蛋白基因在大脑皮层发育过程中的中间神经元切线状和放射状迁移中起到重要作用。(生物通小茜)吴强男,博士,上海交通大...
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特里帕肽被发现具有治疗侏儒症新功能
...计划项目、国家自然科学基金等多项课题的资助下,利用基因敲入技术建立的模拟上述疾病的小鼠模型,深入研究了软骨发育不全、致死性软骨发育不全的发生机制。实验中发现软骨发育不全模型小鼠生长板软骨细胞增生活性和...
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军医科学院女科学家:科研高峰上的绚丽彩虹
...剔除技术,短短一年半时间里成功研制出9种基因敲除和基因敲入小鼠。回国后,她很快建立起我国第一个具有国际先进水平的基因打靶技术平台,主编了国内第一部关于基因打靶技术的专著,取得了一系列研究成果。荣誉接踵...
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营养所发现瘦素信号通路在代谢调控中与环境因素相互作用新机制
...泌功能,进而调节机体能量摄取与消耗的平衡。利用通过基因敲入手段培育出的将瘦素受体985位点的酪氨酸替换为苯丙氨酸的Y985F小鼠,刘勇研究员指导的博士研究生尤佳等研究发现,Y985F突变小鼠虽然在15周龄前微瘦,但随着年...
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GenesDevelopment:科学家揭示组蛋白甲基转移酶GLP的激活新机制
...9me1/2结合的氨基酸突变之后,该激活活性不再存在。通过基因敲入,在GLP、G9a的Ankyrin结构域引入同样的氨基酸突变后,H3K9甲基化结合能力丧失的GLP突变体小鼠出现了胚胎发育迟缓、头骨骨化迟缓以及出生后致死的表型。该研究...
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TetraOneKO——基因敲除技术的重大突破
...。但由于其脱靶效应至今无法避免,且难以胜任大片段的基因敲入,所以还远远谈不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脱靶效应将是未来的主要研究方向。基于同源重组的ES打靶是基因敲除的业内金标准,它通过同源...
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叶玉如院士Nature子刊新文章
...篇文章中,研究人员生成了一种缺乏这种丝氨酸磷酸化的基因敲入小鼠(knock-inmice),发现这种TrkB磷酸化缺陷的小鼠显示出空间记忆受损,并损害了海马长程增强效应(LTP)。进一步研究揭示TrkB的S478磷酸化作用调控了它与Rac1...
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揭示瘦素调控能量代谢平衡机制
...胞内酪氨酸位点引入点突变,培育出两个品系的瘦素受体基因敲入(Knockin)小鼠模型:一个品系(Y123F)将985、1077和1138位的酪氨酸都突变为苯丙氨酸(Phenylalanine,F),而另一个品系(Y3F)则只将1138位的酪氨酸突变为苯丙氨酸,...
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上海交大原创科研成果缤纷涌现
...对基因打靶小鼠的表型分析,利用绿色荧光蛋白作为报告基因敲入原钙粘蛋白位点,发现一个原钙粘蛋白基因在大脑皮层发育过程中的中间神经元切线状和放射状迁移中起到重要作用。邓子新院士领衔的研究团队多氧霉素生物合...
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华人女科学家:更快、更有效的CRISPR编辑方法
...看看是什么地方出了错。当前构建这些“基因敲除”或“基因敲入”小鼠的金标准是,在小鼠胚胎干细胞中编辑这些基因,利用这些细胞构建出嵌合小鼠,然后让小鼠杂交得到纯品系。由于CRISPR-Cas9能够精确地改变或替换基因,...
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【上海科技报】梦想――让治疗变得简单高效
...外,该实验室的工作人员还运用转基因技术把人类的致病基因敲入动物模型中去。这种技术的步骤是,在小鼠的胚胎干细胞中寻找到打靶载体及与人类致病基因相同源的基因位置,在内切酶上做好识别标记,将小鼠胚胎干细胞上...
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李劲松团队建立“类精子细胞”单倍体细胞系
...除、P56/P63/P73三基因敲除以及Tet1-EGFP/Tet2-mCherry/Tet3-ECFP三基因敲入的细胞系,并证明这些细胞能稳定高效支持半克隆小鼠的产生。最近,CRISPR-Cas9文库被应用到人和小鼠的细胞中进行了全基因组水平的遗传筛选。研究人员进一步推...
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上海生科院等建立“类精子细胞”的单倍体细胞系
...除、P56/P63/P73三基因敲除以及Tet1-EGFP/Tet2-mCherry/Tet3-ECFP三基因敲入的细胞系,并证明这些细胞能稳定高效支持半克隆小鼠的产生。 最近,CRISPR-Cas9文库被应用到人和小鼠的细胞中进行了全基因组水平的遗传筛选。研究人员进一...
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中国科学家用CRISPR编辑了猴、狗、猪、山羊、蝴蝶……
...次结合CRISPR/Cas9与体细胞核移植技术获得了位点特异性的基因敲入猪模型。编辑山羊Generationofgene-modifiedgoatstargetingMSTNandFGF5viazygoteinjectionofCRISPR/Cas9system9月10日,发表在《ScientificReports》上的一项研究中,中国科学家小组通过将靶...
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专访张博:两篇Nature子刊技术论文开创同源重组新方法
...1)能够按照人们的意愿精确修饰/改造基因组;(2)实现基因敲入(knock-in)和条件性基因敲除(conditionalgeneknock-out);(3)精确制备模拟人类遗传病的动物模型:很多人类的遗传病是致病基因的错义突变(missense)造成的,用...