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第三节 基因治疗存在问题与伦理学
...入基因能稳定高效的表达。骨髓作为受体细胞使用最多。反转录病毒载体介导基因,只能对分裂状态时的细胞进行传染,因此采取如5-FU处理,使细胞分裂增强,再用含有目的基因病毒颗粒传染可获较好效果。所以,对骨髓细胞...
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第二节 基因治疗的方法
...tor)。目前应用的有两种病毒介导基因转移方法。 ①反转录病毒载体:反转录病毒虽是RNA病毒,但有反转录酶,可使RNA转录为DNA,再整合到宿主细胞基因组。反转录病毒载体有以下的优点首先是具有穿透细胞的能力,可使近...
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活体基因疗法成功恢复小狗免疫系统
...患病男孩的骨髓细胞拿出体外,并与一种含有正常基因的反转录病毒载体放在一起培养5天,然后移植会患者。不行的是有三名男孩患上了T细胞白血病,因而这项基因治疗试验也因此被迫中止。虽然体外基因疗法能够恢复XSCID男...
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第四节 基因治疗的现状与前景
...录病毒介导的间接法,即用含有正常人腺苷脱氨酶基因的反转录病毒载体培养患儿的白细胞,并用白细胞介素Ⅱ(IL-2)刺激其增殖,经10天左右再经静泳输入患儿。大约1-2月治疗一次,8个月后,患儿体内ADA水平达到正常值的2...
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动物的基因转殖
... 本法的主要步骤系将选殖的基因,先行嵌入一适当的反转录病毒载体,然后再将此等带有该选殖基因的反转录病毒载体,与透明带已被移除的4~8细胞阶段胚,在体外共同培养16~24小时,以便将外源基因带入胚的基因组中。...
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重组逆转录病毒载体介导基因转移的现状及思考
...膜G蛋白替代了逆转录病毒本身的env糖蛋白,形成VSV-G假型反转录病毒载体,具有更广泛和更高效的转染效率[2],VSV-G可识别细胞膜上普遍存在的磷脂分子,使构建的假型病毒具有非细胞周期依赖的整合特性,与传统逆转录病毒...
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杀灭肿瘤的脂肪干细胞
...他们将得到的间充质干细胞在培养基中大量扩增,然后用反转录病毒载体将胞嘧啶脱氨基酶(cytosinedeaminase,CD)基因插入细胞的基因组中,这种基因将干细胞中一种毒副作用较小的药物5-fluorocytosine(5-FC)转化为5-FU。接着,研究人员...
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RNA干扰文库及其在功能基因组学研究中的应用
...针对7914个基因的人RNAi文库。他们应用了shRNA(shorthairpinRNA)反转录病毒载体,每一个基因构建了3个不同的shRNA载体,共有23742个不同的载体。用该RNAi文库进行基因功能的筛选,发现了1个已知、5个未知的在p53依赖的增殖阻滞中起调...
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我国科学家构建“人/山羊异种移植嵌合体”
...生物学行为特征。构建了含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因反转录病毒载体并转到人造血干细胞中,然后在人/山羊嵌合体活体水平追踪人源细胞的体内行为特征。 结果显示,人源干细胞在山羊的血液、肝、肾、肌肉、肺等器官...
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基因治疗在肌腱愈合中的应用
...括病毒载体和非病毒载体。其中病毒载体有腺病毒载体、反转录病毒载体、腺伴随病毒载体、单纯疱疹病毒载体、慢病毒载体。非病毒载体包括质粒,肽,阳离子脂质体,聚合物DNA复合体,裸露DNA,基因枪等。1.2转移方法基因治...
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基因治疗载体的最新研究进展
...毒。该载体系统有两部分组成,一是带有外源基因的重组反转录病毒载体分子,二是能以反式提供病毒结构蛋白的包装细胞,其要求是能高效产生感染靶细胞的重组病毒颗粒,且无野生型的反转录病毒存在,后者是基因治疗安全...
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腺病毒载体介导的遗传病基因治疗研究和应用进展
...主要表面为不自主的出血并发症。早期,采用细胞移植、反转录病毒载体等方法在动物模型中仅能得到FⅧ低水平表达和分泌。现在采用缺失E1区的Ad载体,转运B区缺失的FⅧ(BODfⅧ)的cDNA,感染1周后,在HepG2细胞系和C57BL/6小鼠...
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骨髓基质细胞神经分化潜能与脑缺血性疾病
...质细胞、星形胶质细胞来源时,将成年雄性小鼠的骨髓或反转录病毒载体标记的骨髓细胞静脉注射到经亚致死量射线照射的雌鼠体内,发现移植的MSCs通过大脑皮层到达脑干,一些供体源骨髓表达少突胶质细胞的表面标记F4/80或星...
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BMP-4增殖分化作用的研究进展
...高,实验动物肌注射部位均出现了异位形成的新骨。提示反转录病毒载体,提供反转录病毒工具。反转录病毒体系能够诱导成骨,可能为病毒颗粒感染了肌中的间充质细胞,再通过自分泌或旁分泌的作用诱导了新骨形成。刘振东...
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表位疫苗的研究进展
...33]将Listeria菌的抗原表位(ListeriolysinO,LLO)的LLO91插入到反转录病毒载体pMX中,构建表达LLO91表位的核酸疫苗,用其转染小鼠DC细胞,制成LLO处理的DC疫苗。将DC免疫小鼠能诱导强烈的CTL反应及抗Lister细菌感染。Wang等[34]构建了...
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病毒命名与分类系统研究进展
...us) 埃及伊蚊浓核病毒 (Aedesaegyptidensovirus)DNA和RNA逆转录病毒—花椰菜花叶病毒科 (Caulimoviridae) 植 物 花椰菜花叶病毒属 (Caulimovirus) 花椰菜花叶病毒 (Cauliflowermosaicvirus) 杆状DNA病毒属 (Badnavirus)...
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第二节 病毒的增殖
...腺病毒在宿主细胞核内的RNA聚合酶作用下,从病毒DNA上转录病毒mRNA,然后转移到胞浆核糖体上,指导合成蛋白质。而痘苗病毒本身含有RNA聚合酶,它可在胞浆中转录mRNA。mRNA有二种:早期mRNA,主要合成复制病毒DNA所需的酶,如...
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第二十二章 病毒的感染与免疫--第一节 病毒对机体的致病作用
...(Integratedinfection) 某些DNA病毒的全部或部分DNA以及逆转录病毒合成的cDNA插入宿主细胞基因中,形成前病毒(Provirus),导致细胞遗传性状的改变,称为整合感染。整合的宿主细胞不复制期间为潜伏感染,偶尔复制出完整病毒时为...
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病毒基因工程
...对分子生物学的发展也起了很大的推动作用。RNA肿瘤病毒反转录酶的发现,不仅充实了阐明DNA复制、转录和mRNA的翻译表达及蛋白产物的结构功能三者关系的中心法则,而且在实际应用上,使RNA在试管内反转录成cDNA成为可能。病...
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第二十一章 病毒的一般性状--第一节 病毒的形态与结构
第二十一章 病毒的一般性状 病毒(Virus)是一类非细胞形态的微生物。主要有以下列基本特征:(1)个体微小,可通过除菌滤器,大多数病毒必须用电镜才能看见;(2)仅具有一种类型的核酸,或DNA或RNA;(3)严格的活...
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医学微生物学-肠道感染病毒复习题
一、选择题A型题1.不属于肠道病毒共同特点的是A.为裸露的小核糖核酸病毒B.耐酸,耐乙醚C.核酸有感染性D.只在肠道增殖并引起腹泻E.可侵犯神经系统及其它组织2.肠道病毒的共同特性不包括A.形态为球形,20面体立体对称,无包...
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关于印发《血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则》的通知
...,我局组织有关单位和专家制定了《血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则》,现予印发,请遵照执行并转发至辖区内各有关单位。国家药品监督管理局二○○二年五月九日血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指...
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基础病毒学
...数:292字数:456000印刷时间:2005/09/01版次:1内容提要:病毒虽小,但却与人类社会发展及经济活动的关系极其密切。病毒既可引起宿主病害,给种植、养殖业和人类健康等带来不利的影响,又可利用它们进行疫苗生产和作为遗...
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医学微生物学-呼吸道感染病毒复习题
...1.急性呼吸道感染的主要病原体是:A.细菌B.真菌C.病毒D.衣原体E.螺旋体2.呼吸道病毒是指:A.以呼吸道为传播途径的病毒B.引起呼吸道局部病变的病毒C.主要以呼吸道为侵人门户,进人血流引起全身症状的病毒D.主要...
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第三节 抵抗力与变异
...20~30沙粒状病毒科(Arenaviridae)冠状病毒科(Coronaviridae)逆转录病毒科(Retroviridae) 说明:①正痘病毒(Orthopoxvirus)包括天花、类天花、牛痘、牛痘苗、兔痘、猴痘及鼠脱脚病等病毒皆对乙醚有抵抗性,而其他的痘病毒则对乙醚敏感。...
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颠覆经典《Nature》人类基因组被非反转录病毒“篡改”
...viralRNAviruselementsinmammaliangenomes,首次发现人类基因组被非反转录病毒“篡改”,同期Nature还配发了一篇短评文章Virology:Bornavirusentersthegenome。一直以来,经典的病毒学理论告诉我们,反转录病毒是可以将病毒DNA基因组整合在宿主...
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非复制期病毒的微生态环境
非复制期的病毒可以看作是核酸、蛋白和酯类分子的堆积体,处于无生命状态。除病毒以外的其它生命形式都是细胞形态,在非分裂期仍然有代谢存在,仍然和环境有物质流、能量流和信息流的交换。非复制期病毒和它所处的微...
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细胞移植中的基因修饰技术
...一种基因转移载体已被广泛地利用和研究。到目前为止,反转录病毒、慢病毒、腺/疱疹病毒和腺相关病毒已作为载体参与基因转移。病毒载体可以非常有效地转导细胞(体内和体外)。一般情况下,重组病毒载体是由治疗基因...
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第二十三章 病毒感染的实验室诊断与防治原则--第一节 实验室诊断
...T细胞生长因子(IL-2)后可在体外培养,为研究人类逆转录病毒(HIV、HTLV)提供了条件,HIV在T淋巴细胞培养物中增殖形成多核巨细胞。 2.动物试验这是最原始的病毒分离培养方法。常用小白鼠、田鼠、豚鼠、家兔及猴等。...
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天花病毒样本销毁期再迟3年为研究其他病毒防治
...侵染。 而对于更广泛的致病性病毒的入侵(包括逆转录病毒),人体可以产生干扰素用以对抗。干扰素可以激发一系列细胞的复杂生理反应,最终激发人体免疫系统抗病毒功能,例如抑制病毒DNA的复制。 干扰素的作用是...