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庆大霉素在肾近端小管吸收途径的形态学研究
...注入实验组和对照组近端小管腔内,常规制作光镜、电镜放射自显影切片,显微镜观察、摄影并进行图像分析。结果光镜放射自显影显示:3H-庆大霉素注入近端小管5min后,放射自显影银颗粒分布于近端小管顶部;20min后,近端小管...
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2-2生物化学与分子生物学技术
...计对某些成分进行定位、定性,甚至定量测定。 四、放射自显影术 放射自显影术(radioautography;autoradiography)用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。...
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受体研究技术
... 几种常用受体配基结合反应的基本方法 第七章 受体放射自显影术 第一节 体现人结合实验 第二节 组织切片放射配基(体外)结合研究 第三节 受体放射自显影实验结果观察与计算 第四节 几点说明 ...
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血管紧张素Ⅰ型受体反义寡核苷酸对大鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统的阻断作用
...肾脏,观察以FITC荧光标记的ODN在肾脏的转移位置,以AT1放射自显影定量分析的方法观察转移基因的时间-效应曲线。在基因转移3d后以RT-PCR、Western印迹及免疫组织化学方法检测肾脏AT1的mRNA和蛋白表达与分布,并与正义(Sen)ODN转移...
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《胰岛素分泌与糖尿病:从分子到临床》——首届国际分子糖尿病学专题讨论会纪要
...记后,乙醇沉淀,溶于0.1mlTE溶液中。 7.Northern杂交和放射自显影:每份总RNA样品各取20μg,行甲醛变性胶电泳(3-4V/cm)约2.5小时后EB染色,以检测RNA的质量。随后凝胶用经DEPC处理过的超纯水淋洗数次,以去除甲醛。然后经毛细...
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刘晶:表观遗传学改变在产前诊断的应用
...在不同样本中有着不同甲基化模式的“候补基因因为放射自显影术而变得直观,放射自显影术可用于引导来自干燥的测序胶的“候补基因的切割。 利用放射性标记的PCR产物,我们只需要样本中少量的DNA。因此,这一方...
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Southern杂交
...DNA量以及探针与目的DNA间的配对情况等。在最佳条件下,放射自显影曝光数天后,Southern杂交能很灵敏地检测出低于0.1pg与32P标记的高比活性探针的(109cpm/μg)互补DNA。如果将10μg基因组DNA转移到滤膜上,并与长度为几百个核苷酸的探...
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组织切片的原位杂交细胞化学方法
...精含0.3mol/L乙酰胺,室温,每次10min,空气干燥后待进行放射自显影。 (13)放射自显影和复染 ①在暗室中预热水浴至45℃,将分装的核乳胶溶液小瓶置水浴中浸泡至少1h,同时预热一电热板至45℃。将杂交后漂洗过完全干...
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第二节 DNA的一级结构与功能
...加样于测序凝胶中若干个相邻的泳道之上,即可从凝胶的放射自显影片上直接读出DNA上的核苷酸顺序。以下分别介绍。 1.Sanger双脱氧链终止法 DNA的合成总是从5′端向3′端进行的。DNA的合成需要模板以及相应的引导核酸...
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非放射性标记物BrdU研究进展
...两种标记先后给药均可,另有主张先标BrdU,理由是3H-TdR放射自显影乳胶用胰酶去除时偶有细胞丢失,致其后BrdU标记信号损失,Lin等强调BrdU标记时间较3H-TdR长约50分钟,如先标记3H-TdR可望BrdU能标记更多早期S期细胞[3]。Thoolen从另...
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放射标记药物在缺氧中的分子成像
...光子发射计算机断层扫描(SPECT),磁共振成像(MRI),放射自显影和免疫组化。这篇文献综述报道的目的是对运用放射标记PET和SPECT示踪剂的非侵入性的分子成像方式用来测量肿瘤缺氧做出详细综述。作者:
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二、组织学研究方法
...该物质后,取被检组织制成切片或细胞涂片。可用显微镜放射自显影术(microautoradiography)检测该放射性物质在细胞内的原位分布及其代谢转归,即将薄层感光乳胶涂在切片或涂片的表面,标本在暗盒内保存一定时间后,细胞内...
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抗CD95单克隆抗体诱导的活化T细胞凋亡时转录因子nur77的表达
...以100g/L的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行分离,并进行放射自显影分析。由于有nur77转录因子蛋白与标记探针结合,以形成较大分子量的复合物,便于与未结合核蛋白的自由核苷酸片段的区别。为证实转录因子nur77与上述核苷...
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我国学者发明抗HIV药高通量筛选新法
...水平的整合酶抑制剂筛选平台。这种筛选方法摒弃了传统放射自显影方法的具有放射性污染和难以实现高通量筛选等缺点,改进了传统的酶联免疫检测法(ELISA)包被、封闭微孔板等耗时耗力等缺点,灵敏度高,特异性好,且方...
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乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达产物的结合能力
...养缺陷培养基中生长良好.体外免疫共沉淀实验可见特异放射自显影带。可见HBeAg与AK026018基因编码蛋白在细胞内及细胞外均能相互结合,推测该分子在HBV的致病过程中起着重要作用。作者:
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浙江医科大学细胞生物学试题(专业基础)(博士)2001年
...(专业基础)(博士)2001年一、名词解释(每题4分)1.放射自显影(autoradiography)2.血型糖蛋白(glycophorin)3.流动镶嵌模型(fluidmosaicmodel)4.微粒体(microsome)5.膜骨架(membraneassociatedcytoskeleton)6.促成熟因子(maturationpromotingfactor,MPF)7.核定位信...
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菌落原位杂交(colonyinsituhybridization)
...以释放出DNA,将DNA烘干固定于膜上与32P标记的探针杂交,放射自显影检测菌落杂交信号、并与主平板上的菌落对位。 实验步骤如下: ①将硝酸纤维素滤膜置于含抗生素的平皿琼脂培养基上,用无菌牙签挑取单菌落种于滤...
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动研所建立比较医学技术共享平台
...器设备可以完成中小型动物的整体冰冻切片,常规病理、放射自显影、连续断面数字图像分析等工作。该技术平台的建立,为大专院校和科研机构提供了技术服务,为完成国家重大科研项目提供了有力的支撑,实现了科技资源共...
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cDNA第二链的合成
...合成的双链cDNA和单链cDNA在1.4%碱性琼脂糖凝胶上电泳,放射自显影后观察,如果dsDNA片段的长度是第一链cDNA的两倍,那么,合成便是成功的。 7)用核酸酶S1消化dsDNA,除去连接两条链的发卡环。作者:
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cDNA第一链的合成
...pBR322限制性片段为分子量标准,电泳后,铺X-光片,进行放射自显影,确定cDNA第一链的大小。作者:
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核酸杂交
...标记探针的方法而异。用放射性同位素标记的探针需要用放射自显影来检测其在膜上的位置;而如果是用生物素等非同位素方法标记的探针则需要用相应的免疫组织化学的方法进行检测。作者:
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帕金森病患者脑标本黑质、纹状体内多巴胺转运体蛋白的表达
...本黑质、纹状体多巴胺转运体(DAT)的表达。研究者以免疫放射自显影显示DAT在黑质、纹状体的分布。结果正常人脑标本DAT强标记信号分布于黑质、壳核和尾状核。在PD患者脑标本,正常分布于壳核的DAT几乎均消失;尾状核DAT降低...
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医学细胞生物学
... 显微镜技术 第二节 细胞组分的分级分离 第三节 放射自显影术 第四节 细胞培养与细胞融合 第五节 单克隆抗体技术 第六节 核酸分子杂交技术 复习思考题第三章 细胞概述 第一节 生物大分子 第二节 细...
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酪氨酸碘化生成甲状腺激素的过程是怎样的?
...个二碘酪氨酸残基偶联而成四碘甲状腺原氨酸(T4)残基。放射自显影实验表明,注入放射性碘几分钟后,即可在微绒毛与腺泡腔交界处发现含有以上四种残基的甲状球蛋白。 I-的活化和酪氨酸碘化都在同一过氧化酶催化下完成...
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一种新型整合酶抑制剂高通量筛选方法
...水平的整合酶抑制剂筛选平台。这种筛选方法摒弃了传统放射自显影方法的具有放射性污染和难以实现高通量筛选等缺点,改进了传统的酶联免疫检测法(ELISA)包被、封闭微孔板等耗时耗力等缺点。该方法灵敏度高,特异性好...
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乙肝病毒特异性核酶的构建及体外切割活性的初步研究
...的rRZ和rBV各2μl,分别于37℃、42℃、55℃保温1小时。PAGE,放射自显影。 结果(1)RZ的序列为5‘AACATTGACATAGCTCTGATGAGTC CGTGAGGACGAAACTACTAATTCCCTGGA3‘,与设计完全相符,插入方向一致。(2)BVCF方向一致,序列与文献报道基本一致,并且...
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消癃通闭胶囊为什么治疗前列腺增生症效果好?
...抑制大鼠前列腺组织碱性成纤维细胞生长因子的表达。以放射自显影技术进行的研究显示,该药可抑制小鼠前列腺上皮细胞的生长、再生及DNA合成。以酶学法进行的研究显示,该药对老龄犬已增生的前列腺组织中5α-还原酶活性...
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维胺酯治疗痤疮的疗效观察及实验研究
...明书标记探针。按文献[5]进行预杂交、杂交、洗膜及放射自显影。当AR控针进行杂交完毕,按文献[5]把膜上的探针洗去。同法,改用β-actin探针进行杂交。放射自显影片用图像处理分析系统(IBAS.0/KONTRONGERMANY)对杂交带进行...
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研究利用正交反应法标记甲基转移酶底物
...ne,SAM)作为辅酶,同时检查放射性的标记条带。但是这种放射自显影的方法的灵敏度相对偏低,而且不能应用于大规模的蛋白组学研究。在BPPM方法中,王瑞等人通过对甲基转移酶的SAM结合区进行改造,把该区域重要的氨基酸突...
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固相膜核酸分子杂交方法
...定方法,固相膜的放射性杂交结果显示有两种方式,一是放射自显影法、另一是液闪计数法,放射自显影法比较简单,只需将杂交膜与X光片在暗盒中暴光数小时至数天,再显影,定影即可。对于杂交信号较强的固相膜,用一块...