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肿瘤分子遗传学研究方法进展
...标记的两个等位序列,之后将PCR产物变性以测序胶分析其单链。通过对比两产物单链的浓度比例即可得出这一位点是否存在杂合性缺失[3]。利用此方法,检测出在肿瘤的发生中,17p和18q存在很高的杂合性缺失频率,分别达70%和75%...
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对HDV病毒及其RNA分解反应的研究
人类丁肝病毒(HDV)是乙肝病毒的一个单链RNA“卫星”。在病毒感染所需的一个重要反应中,HDV病毒RNA起一个核糖酶的作用,使其RNA磷酸二酯骨干自我分解。对分解前和分解后HDV核糖酶的晶体结构所做的一个比较表明,分解后发...
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第二节 常用基因诊断技术
...(Southernblot) 基本原理是:硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强,当电泳后凝胶经过DNA变性处理,覆以上述滤膜,再于其上方压上多层干燥的吸水纸,借助它对深盐溶液的上吸作用,凝胶上的单链DNA将转移到滤膜...
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第十三章 基因诊断--第一节 基因诊断的原理
...因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和RNA之间进行。因此,...
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第二十三章 DNA重组技术及其在基因诊断中的应用--第一节 工具酶
...酶的切割可以有两种方式。一是交错切割,结果形成两条单链末端,这种末端的核苷酸顺序是互补的,可形成氢键,所以称为粘性末端。如EcoRI的识别顺序为: ↓|5’……GAA|TTC……3’3’...
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PCR-SSCP技术
...用. 一、SSCP的原理及特点 日本Orita等研究发现,单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或少地影响其空间构象,使构...
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微生物所植物RNA沉默互作机制研究获新进展
...侵中同样起着非常重要的作用。一些植物病毒侵染常伴有卫星RNA的复制,并影响辅助病毒在寄主中的致病性。在国家重点基础研究发展计划(973计划)等项目资助下,中国科学院微生物研究所植物基因组学国家重点实验室郭惠珊...
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厦门大学生科院等miRNA研究成果发表于《Immunity》
...SC)。RISC通过Dicer中解旋酶的作用将双链RNA变成两个互补的单链RNA,然后单链RNA识别细胞内与其互补的靶RNA分子,并与之互补结合,这时Dicer中的核酸内切酶将RNA分子切断,从而使靶RNA分子失去编码蛋白质的功能。植物、线虫、动...
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5-1-2参与DNA复制的有关物质
螺旋酶(Helicase)单链DNA结合蛋白(SSBP)DNA拓扑异构酶(DNATopisomerase)引物酶(Primase)和RNA聚合酶(RNAPolymerase) DNA复制实际上就是DNA指导的DNA合成代谢。因此,必须有DNA作为复制的模板。体外复制实验证明,新合成DNA的特...
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Naturemethods:高通量深度测序法探测RNA结构
...是为反式作用因子提供特异的结合位点。RNA转录物是一种单链分子,当其发生自身折叠并形成Watson-Crick碱基对,可生成各种长度和不同复杂性的发夹结构。发夹结构是RNA中最普通的二级结构形式,其进一步组装则形成了复杂的三...
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Nature:颜宁研究组揭示PPR蛋白特异识别单链RNA的分子机制
...然》在线发表论文,在世界上首次报道了PPR蛋白特异识别单链RNA的分子机制。清华大学生命科学学院博士后殷平以及博士研究生李泉秀为该论文共同第一作者。PPR(pentatricopeptiderepeat)蛋白是广泛分布于各类生物当中一大类蛋白...
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华中农业大学80后教授Nature子刊聚焦PPR蛋白
...揭示出了,设计的PPR(pentatricopeptiderepeat)蛋白识别特异单链RNA的结构基础。这项研究发表在4月18日的《自然通讯》(NatureCommunications)杂志上。华中农业大学的“80后”教授殷平(PingYin)博士是这篇论文的通讯作者。殷平于2009...
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分子杂交技术
...记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 一、双链DNA探针及其标记方法 分子生物研...
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第十八章 诊断分子生物学基本技术--第一节 概述
...,以此类推成百上万的核苷酸结合可形成一条大分子核酸单链,单链之间的碱基再以氢键结合可形成较稳定的核酸大分子双链结构(二级结构)。 核酸的简写方式为5′AGCTGTAC3′,此外的英语字母已不代表碱基,而是指核苷...
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3-1-1转录:RNA的生物合成引言
RNA几乎总是单链的。但几乎每个RNA分子都有许多短的双螺旋部分,称为发夹。这是因为在发夹中,一条RNA链上的两个节段是反平行走向的,可形成碱基对而产生双螺旋区。此外,除了标准的GC和AU对之外,还有较弱的GU对可帮助形...
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肾透明细胞癌中VHL基因改变和趋化因子受体CXCR4的表达及相关性
...探讨VHL基因在CCRCC中的作用。方法分别采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析、微卫星法、DNA甲基化特异性PCR和半定量逆转录PCR检测35例CCRCC和20例正常肾组织中VHL基因突变、杂合性缺失(LOH)、异常甲基化及CXCR4mRNA的表达。结果VHL...
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Nature:RNA干扰复合物的晶体结构
...碎片,清除双链RNA中一条链,用另一条链作为向导RNA,当单链RNA匹配上向导RNA序列时,Argonaute即裂解此单链RNA,从而防止它作为蛋白生产的模板。为了测定Argonaute结构,研究人员通力合作,希望能解决Argonaute结构问题,结果发现...
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生物物理所等发现正布尼亚病毒核蛋白保护病毒基因组RNA的分子机制
...道了正布尼亚病毒属(Orthobunyavirusgenus)的核蛋白(N)和单链RNA复合物的晶体结构,阐述了N蛋白保护病毒基因组RNA的分子机制,为此种属病毒疾病的预防和治疗提供了有力的理论基础。单链负链RNA病毒是威胁人类健康的重要杀...
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浙江大学博士入学考试分子生物学复习题
...系列(通常数百)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(一般为10bp)为引物,对所研究的基因组DNA进行PCR扩增,然后用凝胶电泳分开扩增片段,EB等染色剂染色后检测扩增产物DNA片段的多态性。与RAPD技术相类似的还有AP-PC...
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延长治疗可使丙型肝炎病毒感染患者亚组受益
...染患者的治疗,通常结果无显著差异。然而,患者的一个亚组可能受益。为了确定延长治疗是否对患者有益,Charite医科大学的ThomasBerg博士及其同事比较了48周治疗和72周治疗。研究结果发表于4月的《胃肠病学》(Gastroenterology2006...
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长春应化所在化学生物学生物分子识别领域取得可喜进展
...基酸Val的配合物可促进在体内复制及转录具有重要功能的单链prA及polydA产生二级结构;目前针对人类单链RNA聚合酶PAP为靶点的单链核酸药物报道很少,这些实验结果对单链核酸药物设计及揭示稀土生物学效应具有指导作用。(FEBSL...
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5-1-5DNA复制的过程
...过转录激活合成的RNA分子也起分离两条DNA链的作用,然后单链DNA结合蛋白质结合在被解开的链上。由复制因子X(n蛋白),复制因子Y(n‘蛋白),n“蛋白,i蛋白,dnaB蛋白和dnaC蛋白等6种蛋白质组成的引发前体(preprimosome),在...
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第二节 核酸分子杂交法
...断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组...
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常用的分子生物学基本技术简介
...突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针(probe),待测核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未...
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巴斯德所连发三篇文章解析病毒研究
...研究人员包括博士研究生张仕坚等。A型流感病毒是负链单链RNA病毒,迄今为止已引起四次全球流感大流行。流感病毒具有很高变异性,第一年接种疫苗后,一般第二年就需要重新接种新疫苗。目前针对流感病毒神经氨酸酶(Neurami...
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农科院分子遗传学试题(博士)2002年,2001年,1998年,1997年,1996年,1995年
...分子遗传学试题一、名词解释(每个4分,共计40分)1、卫星DNA2、基因家族3、反义RNA4、核酶5、CAAT框6、hnRNA7、基因组8、δ因子9、衰减子10、复制子二、简答题1、原核、真核生物翻译起始的异同点(10分)2、转录因子是什么?其...
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RNA干扰作用原理及其应用
...电有利于与RNA带负电的磷酸骨架结合。siRNA解旋后,siRNA单链的3‘端伸入PAZ的裂缝中,整个单链沿着PAZ伸展开,同时目的片段mRNA结合于新月型底座。mRNA与siRNA互相配对形成双链后,在离单链siRNA5‘端9个碱基处(即离siRNA3‘端11-12...
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分子生物学复习题
...果;而传统PCR产物需要凝胶电泳。PCR-SSCP:是一种基于DNA单链构象多态性的基因诊断技术,原理:首先利用PCR扩增目的DNA,然后将扩增产物进行非变性PAGE,可测定DNA碱基序列有无变异,具有简便,快速,灵敏的优点,易于大量样...
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分子生物学复习题
...果;而传统PCR产物需要凝胶电泳。PCR-SSCP:是一种基于DNA单链构象多态性的基因诊断技术,原理:首先利用PCR扩增目的DNA,然后将扩增产物进行非变性PAGE,可测定DNA碱基序列有无变异,具有简便,快速,灵敏的优点,易于大量样...
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第十六章 DNA的生物合成--第一节 DNA的复制
...)DNA复制的一般过程: DNA双螺旋是由两条方向相反的单链组成,复制开始时,双链打开,形成一个复制叉(replicativefork,从打开的起点向一个方向形成)或一个复制泡(replicativebubble,从打开的起点向两个方向形成。)两条单链分别...