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幽门螺杆菌感染诱导胃上皮细胞白介素-8表达的机制
...F-kB(-80~70bp)的结合位点。用含IL-8基因该区域的片段与含有虫荧光素酶的表达载体相连,并转染胃上皮细胞,发现Hp可诱导该细胞虫荧光素酶的活性增加。证明产生IL-8的诱导作用发生在转录水平,而NF-kB结合位点的突变导致对虫荧...
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幽门螺杆菌感染诱导胃上皮细胞白介素-8表达的机制
...F-kB(-80~70bp)的结合位点。用含IL-8基因该区域的片段与含有虫荧光素酶的表达载体相连,并转染胃上皮细胞,发现Hp可诱导该细胞虫荧光素酶的活性增加。证明产生IL-8的诱导作用发生在转录水平,而NF-kB结合位点的突变导致对虫荧...
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疟原虫基因转染的研究进展
...基因转染技术的不断发展和广泛应用奠定了基础。作者将虫荧光素酶(fireflyluciferase)基因插入鸡疟原虫(Plasmodiumgallinaceum,P.g)有性期基因pgs28的编码区,构成嵌合基因后克隆入质粒载体pUC13,以电穿孔法导入P.g的雌配子和受精...
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8-氯腺苷增强肿瘤细胞对TRAIL杀伤作用敏感性的研究
...,分析药物处理对细胞凋亡的影响;构建NF-κBDNA结合序列虫荧光素酶报告质粒,并转染适当的细胞株,测定NF-κB的转录活性;以不同胱天蛋白酶的抑制剂预处理所试细胞株,再加入rsTRAIL处理,测定胱天蛋白酶抑制剂对细胞凋亡...
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二恶烷的介绍及检测方法
...色谱法、免疫法、生物法、激光质谱法等;其中GC-MS法,虫荧光素酶报告基因法及酶免疫分析法等在实践中取得了很好的检测效果,但各种方法适应范围有很大差别。色谱法可有效分离各种二恶烷类成分,但对仪器精度和操作水...
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胃肠舒片对大白鼠胃肠平滑肌细胞线粒体跨膜电位的影响
...源,细胞内ATP的水平能够反映平滑肌细胞的运动能力。用虫荧光素酶-荧光素系统测定细胞或组织中ATP的含量是目前生物能量研究中最灵敏最专一的方法之一。本实验采用CelltiterGloTM试剂盒检测了不同剂量胃肠舒片对胃肠平滑肌...
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干细胞因子及其应用
...了稳定的内环境,有利于骨髓移植的成功[14]。 将虫荧光素酶基因连在质粒上,该基因以聚赖氨酸(PL)与抗生蛋白链菌素(SA)共价连接,生物素酰基化的SCF以生物素与SA连接,腺病毒与PL共价连接,用此载体转染人MBO2和M...
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核酶在基因治疗中的研究进展
...的一种治疗途径。Leontis等[15]使用了5-NCR翻译有关的虫荧光素酶报告基因系统作为敏感的定量研究方法,分别设计出针对核酸位点136-160,313-317,496-520,及对373-388的四种核酶,证实核酶1、4在无细胞环境中均有效。而2、4在...
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第十七章 荧光免疫技术--第一节 有关荧光的基本知识
第十七章 荧光免疫技术 荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进...
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第一节 免疫荧光细胞化学的原理
第一节 免疫荧光细胞化学的原理 免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。...
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荧光分析法
一、基本原理 某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光,根据荧光的光谱和荧光强度,对物质进行定性或定量的方法,称为荧光分析法(fluorescenceanalysis)。 荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等...
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荧光抗体的制备
(一)免疫球蛋白的提取(二)荧光素1.荧光色素的基本条件(1)具有化学活性基团,如异硫氰基(-NCS)等,易与免疫球蛋白结合形成共价键。(2)对免疫球蛋白无毒性,不影响抗体活性。(3)荧光效应高,与蛋白结合需要...
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原子荧光光谱的产生及其类型
...较高能态,接着又以辐射形式去活化,就可以观察到原子荧光。原子荧光可分为三类:共振原子荧光、非共振原子荧光与敏化原子荧光。3.6.1.1共振原子荧光原子吸收辐射受激后再发射相同波长的辐射,产生共振原子荧光。若原...
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第三节 荧光免疫测定
第三节 荧光免疫测定 一、时间分辨荧光免疫测定 以常用荧光素作为标记物的荧光免疫测定往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰,以及激发光源的杂射光的影响,使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免...
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第二节 荧光抗体技术
第二节 荧光抗体技术 一、荧光抗体的制备 (一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记...
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血液透析患者视盘水肿的荧光素眼底血管造影表现特征
【摘要】目的探讨行血液透析过程中出现视盘水肿患者的荧光素眼底血管造影(FFA)的表现特征。方法终末期尿毒症在血液透析过程中视盘水肿患者4例,在血液透析前行FFA检查,分析其FFA的表现。结果4例患者FFA表现为:视盘境...
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荧光蛋白照亮细胞生物学
自从1962年科学家们首先在水母体内发现绿色荧光蛋白(GFP)以来,这种神奇的蛋白质技术获得飞速地发展,成为了生物学功能研究的重要工具之一。除了水母中的绿色荧光蛋白,研究人员还从其他的动物体内分离获得了多种GFP...
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第二节 荧光抗体的制备
第二节 荧光抗体的制备 荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。 一、荧光素 荧光是指一个分子或原子吸收了给予的...
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第四节 荧光显微镜检查法
第四节 荧光显微镜检查法 一、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本...
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免疫荧光非特异性染色的消除方法
...,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检...
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第三节 免疫荧光细胞化学染色方法
第三节 免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色切片经固定后,...
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免疫荧光细胞化学染色方法
...胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗...
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第五节 非特异性染色的消除方法
...,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检...
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神奇的荧光蛋白:让老鼠和猪也发光
据美国《连线》杂志报道,凭借在绿色荧光蛋白质(GFP)研究领域取得的重要成就,3名科学家上周最终问鼎诺贝尔化学奖,他们分别是马丁·查尔菲(MartinChalfie)、钱永健(RogerY.Tsien)和下村修(OsamuShimomura)。绿色荧光蛋白质可以帮助科...
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激光扫描共聚焦显微镜中荧光强度的测定条件研究
【摘要】目的本文对应用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光强度的测定条件做了详细的分析。方法选择和设置激光扫描共聚焦显微镜的各参数,对用间接免疫荧光法检测改性后的材料表面对人牙龈成纤维细胞分泌细胞外基质纤粘连...
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激光诱发荧光诊断早期肺癌的研究现状
一、激光诱发荧光诊断肿瘤的基础 所谓激光诱发荧光(laserinducedfluorescence,LIF),即物质分子被激光激发后,一部分处于激发态的分子在下降到基态的过程中,以光子形式释放出它所吸收的能量的过程。因受激分子在由激发态下...
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荧光素钠用于眼底荧光血管造影不良反应的临床观察
【摘要】目的观察荧光素钠眼底血管造影时出现的不良反应。方法20%荧光素钠快速静脉推注(肘前静脉)后边拍照检查边观察患者的反应。结果造影560例,17例出现不良反应,占总数3.04%。结论眼底荧光血管造影是一种安全可靠...
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纤维素酶在中药成分提取中的应用
...成分纤维素的阻碍,往往提取效率较低“恰当地利用纤维素酶处理这些中药材,可改变细胞壁的通透性,提高药效成分的提取率。本文就纤维素酶的作用机理、影响酶促反应的因素及目前用于中药有效成分的提取的研究情况作一综述...
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我国具有绿色荧光遗传特征克隆猪猪崽增至4头
记者2月17日从东北农业大学获悉,中国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪今年1月成功产下的11头猪崽中,又有2头猪崽被确认具有绿色荧光遗传特征,从而使这窝猪崽中“荧光猪崽”总数由2头增加至4头。据介绍,2006年12月,由东北...
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纤维素酶对奶牛营养的研究进展
...,成功开发这一潜在饲料资源显得尤为迫切和重要。1纤维素酶的种类纤维素酶包括多种水解酶成员,构成了一个复杂的纤维素酶家族。目前普遍认为,完全降解纤维素至少需要由3种功能不同但又互补的纤维素酶的3类组分。1.1葡聚糖...