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蛋白复性(一)-综述:包涵体表达的蛋白的复性
摘要综述了包涵体形成、包涵体分离和溶解、包涵体折叠复性的方法、复性产率低下的主要因素以及通过分子伴侣、低分子量添加物等的应用而提高了蛋白质复性产率。 关键词包涵体蛋白质复性 AbstractStrategiesfordecreasingth...
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32例婴儿肝炎综合征临床分析
...访分析。结果病原学检查结果提示病毒感染,尤其巨细胞包涵体病毒感染最多见,占59%,乙型肝炎病毒感染占第二位,为25%;巨细胞包涵体病毒感染可引起黄疸、肝肿大、肝功能异常以及胆道闭锁、溶血,且病情重,易致肝硬化...
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TDP-43蛋白积聚的机制
...论文阐明了TDP-43蛋白的降解片段TDP-35是其在细胞质内形成包涵体的主要原因,并且包涵体的形成引起该蛋白质参与RNA加工功能的改变。肌萎缩侧索硬化症(AmyotrophicLateralSclerosis,ALS)和额颞叶变性(FrontotemporalLobarDegeneration,FTLD)是两...
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蛋白复性(二)-基因重组蛋白质的体外复性
...肠杆菌中表达时,由于表达量高,往往形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经过变性和复性的过程才能获得有活性的重组蛋白。如何提高基因重组蛋白质的复性率,是生物工程技术的一个研究热点。对近年来的重组蛋白质的复...
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细胞学中核内包涵体对甲状腺乳头状癌的诊断价值
【摘要】目的探讨细针吸取细胞学(FNAC)中核内假包涵体细胞对甲状腺乳头状癌术前细胞学诊断的价值。方法对1350例甲状腺肿块术前做FNAC,瑞氏染色,显微镜观察细胞特点。其中,780例有病理组织学对照。结果1350例甲状腺肿...
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甲状腺乳头状癌63例细胞学分析
...甲状腺结节FNAB标本采集技术和作为细胞学诊断标准的假包涵体、乳头状片断的鉴别诊断进行探讨。结果查见核内假包涵体和乳头状片断,细胞学诊断的63例甲状腺乳头状癌,均经术后组织病理学诊断证实。结论FNAB诊断甲状腺乳...
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包涵体肌炎
1 历史回顾 包涵体肌炎(inclusionbodymyositis,IBM)是一种慢性炎症性肌病。其主要病理特点是肌浆或肌核内有管状细丝包涵体。Yunis[1]首先提出IBM这一疾病名称。在此之前Adams[2]等报告了1例肌细胞内包涵体肌病,这种包涵体...
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南京大学华子春课题组解决蛋白质药物生产中“沉淀物”难题
...二等奖。这一成果较好解决了用细菌生产蛋白质药物时的包涵体难题,从而让生物药物的生产能够价廉物美。华子春教授告诉记者,药物一般分三种:生物药物、化学药物和天然或传统药物。化学药物主要是靠人工合成,天然或...
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病毒逃逸及复制机制获新发现
...伴血小板减少综合征病毒感染在宿主细胞质中形成嗜酸性包涵体结构,该结构由病毒的非结构蛋白NSs诱导形成。NSs能够挟持I型干扰素信号通路中必需的一些宿主激酶,将其不可逆地捕获到病毒包涵体中,导致这些关键的信号分...
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医学微生物学-其他病毒复习题
...长D.可以用灭活疫苗预防E.可在感染细胞核内形成嗜碱性包涵体4.内基小体是A.狂犬病病毒包涵体B.麻疹病毒包涵体C.腺病毒包涵体D.疱疹病毒包涵体E.衣原体包涵体5.被狂犬咬伤后最正确的处理措施是A.注射大剂量丙种球蛋白和抗...
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第二十二章 病毒的感染与免疫--第一节 病毒对机体的致病作用
...白质的合成,而病毒蛋白质和病毒颗粒大量积聚,或形成包涵体(Inclusionbody),而使感染细胞变形,常见细胞肿胀,细胞膜通透性改变,最后细胞本身溶酶体酶逸出,而导致细胞破坏。 包涵体是病毒感染细胞中独特的形态学变...
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我国学者发现帕金森病可能的发病机制
...在PD患者的脑中通常可以发现一些称为路易氏体(Lewybody)的包涵体,这些结构被认为是帕金森病形成的病理学标志。但是,对于包涵体的形成与神经元死亡之间的关系以及包涵体的形成机制一直存在争议。 他们研究发现,在...
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重组结核分枝杆菌38KDa蛋白抗原制备及其血清学诊断价值
...进行SDS-PAGE诱导表达鉴定,考马斯亮蓝R-250染色。 1.2.2包涵体收集与初步纯化5000rpm,15min收集诱导后的菌体,将菌体沉淀以30ml/mg重悬于细胞超声波破碎缓冲液(50mmol/LTRIS·HClpH8.0;1mmol/LEDTA;50mmol/LNaCl;5%甘油),冰浴条...
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我国科学家发现帕金森氏病可能的发病机制
...D病人的脑中通常可以发现一些称为路易氏体(Lewybody)的包涵体,这些结构被认为是PD形成的病理学标志。但是对于包涵体的形成与神经元死亡之间的关系以及包涵体的形成机制一直存在争议。中国科学院生物物理研究所王志珍...
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涎腺病毒病
...】涎腺病毒病(virusdiseaseofsalivarygland)又称涎腺巨细胞性包涵体病(cytomegalicinclusiondisease)。【诊断】依靠在涎液、痰、尿液中发现特征性细胞。【治疗措施】无特效疗法,根据出现的临床症状对症处理。【病因学】本病为巨细...
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第二节 沙眼衣原体
...对革兰氏染色虽然一般反应为阴性,但变化不恒定。沙眼包涵体在上皮细胞浆内,很致密,如以Giemsa染色,则呈深紫色,由密集的颗粒组成。其基质内含有糖原,以Lugol液染色呈棕褐色斑块。 (二)培养 人类是沙眼衣原...
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第二节 炎症增生的脱落细胞
...、阴道和泌尿道。巨细胞病毒感染的细胞内出现包涵出现包涵体对细胞学检查有诊断意义。单纯疱疹病毒感染后,上皮细胞核发生明显改变,易被误诊为癌细胞。 (1)单纯疱疹病毒感染:单纯疱疹病毒分为Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ...
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分子生物学试验方法探讨三-如何选择凝胶
...扩张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合作粗分离。 纯化包涵体蛋白 包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或尿素中。高化学稳定性的Sepharose12及Sepharose6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白质需要复性至蛋...
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甲状腺乳头状增生性病变45例病理分析
...重叠、55%有毛玻璃样细胞核、77%有核沟、72%有核内假包涵体,39%有砂粒体,根据这些组织学特征,毛玻璃样细胞核、核沟、假包涵体、砂粒体、核相互重叠,不管它是否形成乳头或滤泡或成实性片块或为硬化性均可作为诊...
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包涵体性结膜炎
...及双眼,为急性发病。临床表现临床上分为二类1.新生儿包涵体结膜炎,又称新生儿包涵体性脓漏眼。新生儿出生时,在患衣原体性宫颈炎的产道中受感染,潜伏期5~12天。眼睑红肿,睑结膜充血、肥厚、乳头肥大,主要见于下...
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如何选择凝胶
...HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。9.纯化------包涵体蛋白包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose12及Sepharose6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天...
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如何选择凝胶
...HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。9.纯化------包涵体蛋白包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose12及Sepharose6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天...
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第十八章 衣原体--第一节 概述
...寄生于人、哺乳动物及禽类,仅少数致病。据抗原构造、包涵体的性质、对磺胺敏感性等的不同,将衣原体属分为沙眼衣原体(C.trachomatis)、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)肺炎衣原体(C.pneumonia)三个种(表18~1)。其中沙眼衣原体又有...
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嗜酸乳杆菌推定的β半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的功能性表达
...,每分钟释放1μmol邻硝基苯酚为1个酶活单位(U)。1.6包涵体表达的重组β半乳糖苷酶的提取和复性根据诱导表达实验结果,在37℃培养构建的3株重组菌株各500ml,加终浓度为0.4mmol/L的IPTG诱导表达8h,然后离心收集表达菌体...
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人FasL分子的克隆、表达及多抗制备
... °C条件下诱导3 h,SDS-PAGE检测。用8 mol/L尿素溶解的包涵体作为免疫原免疫家兔制备多抗。结果 融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的20%。多抗效价达1∶102 400,此多抗可以与重组蛋白发生很好的抗原抗体反应。结论 hFL在...
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第四节 衣原体性结膜炎
...病因 早在1907年在沙眼患者的结膜上皮内即已发现了包涵体,但直到1995年才由我国科学工作者首次利用鸡胚分离出沙眼病原体,为沙眼病原的研究作出了贡献。 近年来国内外的研究证明沙眼病原体为衣原体的一种,界于...
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肾移植病人中常见胃十二指肠巨细胞病毒感染
...受OEGDs和1年以上接受OEGDs的病人中CMV的总发现率相似。CMV包涵体在移植1年内的病人中发现(n=9)。胃活检标本中发现CMV,特别是包涵体,与恶心和上腹部疼痛相关。CMV阳性标本在HE染色的组织病理学观察方面没有特异性改变,然...
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新颖的融合蛋白表达系统
...大肠杆菌中许多外源蛋白的高水平表达最后都会导致形成包涵体,它是致密的不溶性蛋白和RNA的凝聚体,含有大部分的表达蛋白。蛋白质沉淀形成包涵体有利的一面是可以利用包涵体的不溶性和致密性,通过超声波破碎、离心就...
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第三节 巨细胞病毒
... 巨细胞病毒 巨细胞病毒(CytomegalovirusCMV)亦称细胞包涵体病毒,由于感染的细胞肿大,并具有巨大的核内包涵体,故名。 一、生物学性状 CMV具有典型的疱疹病毒形态,其DNA结构也与HSV相似,但比HSV大5%。本病毒对...
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第七节 克隆基因的表达
...活性;③表达的蛋白质经常是不溶的,会在细菌内聚集成包涵体(inclusiionbody),尤其当表达目的蛋白量超过细菌体总蛋白量10%时,就很容易形成包涵体。生成包涵体的原因可能有是蛋白质合成快速太快,多肽链相互缠绕,缺乏...