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第四节 荧光显微镜检查法
第四节 荧光显微镜检查法 一、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本...
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第一节 免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围
...为三小块,分别作冰冻切片、石蜡切片及超薄切片,进行荧光显微镜、光学显微镜及透射电镜观察。所应用的免疫细胞化学技术包括免疫荧光、免疫酶标及免疫电镜,兹分述如下: (一)免疫荧光细胞化学技术的应用 自...
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流式细胞仪标本的制备
...胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下,活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。 (一) 原理 活细胞表面保...
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流式细胞仪标本的制备
...胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下,活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。 (一) 原理 活细胞表面保留有...
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科学家发现超亮光敏荧光基团
...破坏,因此能观测的样本也相当有限。这几年超高分辨率荧光显微镜跨越了一大步,使得研究者可以从纳米级观测细胞突起的伸展,从而宣告200—750纳米大小范围的模糊团块的时代结束了。这些超高分辨率荧光显微镜技术有些基...
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骨髓间充质干细胞对肌腱移植物在骨隧道内愈合效果及示踪的实验研究
...行生物力学评估愈合效果,实验组2、4、8周组织冰冻切片荧光显微镜和手术后即刻、3、7d行7.0TMR示踪移植的BMSCs。[结果]SPIO、DiI能有效标记干细胞。实验组2、4、8周荧光显微镜观察在腱骨界面有DiI标记的阳性细胞存在。7.0TMR未能...
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H1N1检测突破极限几分钟内搞定
...符合病原体遗传物质特定部分的一段DNA或RNA)连接。然后荧光显微镜可以探测到非常少量的这种病毒。在一项尚未发表的研究中,这组科学家成功地探测到了登革热病毒和人类乳头瘤病毒。该研究的协调者CelsoPintodeMelo说,这种...
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微泡超声爆破助溶血栓机制的离体研究
...309-31127(重庆)为了用荧光分子探针标记脂膜超声微泡,荧光显微镜下观察并追踪荧光微泡在超声作用下于血栓表面及内部分布情况,为超声联合微泡对体外血栓的助溶机制提供病理学依据。研究者将染料标记于脂膜微泡,结合...
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骨关节炎和类风湿关节炎患者滑液对中性粒细胞凋亡的影响
...者滑液对中性粒细胞凋亡的影响。方法通过流式细胞仪及荧光显微镜检查19例RA和11例OA患者对体外培养粒细胞凋亡的影响。结果流式细胞仪及荧光显微镜检测的体外培养粒细胞自发凋亡发生率分别为43.6%和37.4%,加RA滑液组分别为1...
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脱细胞骨基质对骨髓间充质干细胞成骨及示踪的观察
...入后4周,X线及组织学观察实验侧植人物为中心成骨明显,荧光显微镜下见新生骨组织中BCD阳性细胞较多。对照侧材料逐渐吸收。结论ACBM作为支架材料有助于MSCs的粘附、生长和成骨活性的表达。【关键词】组织工程;支架材料;骨髓...
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第一节 免疫荧光细胞化学的原理
...细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量...
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神经生物学应用:激光层照荧光显微技术
...部或下部检测荧光,激发光路与检测光路垂直。激光层照荧光显微镜激发一个层面上的荧光基团,一次成像一个面,这种技术不仅大大降低了光毒性,还提高了长时间成像活样本的能力。Light-sheet技术始于一百年前,原本是用来...
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四军医大西京医院成功建立胃癌GC9811P-GFP细胞株
...粒转染胃癌细胞株GC9811-P,经过G418筛选和克隆化培养,用荧光显微镜及流式细胞仪检测转染的EGFP基因在癌细胞体内外的表达,MTT比色法观察细胞生长,Westernblot检测转染细胞和未转染细胞肿瘤相关抗原的表达。结果发现,GC9811-PE...
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腺病毒介导VEGF基因在人骨髓基质干细胞中的表达
...转染组。取重组腺病毒AdVEGF165(MOI=20pfu/cell)感染hBMSe。荧光显微镜下观察eGFP的表达,判断感染效率及细胞生长情况,RTPCR检测,ELISA和Westernblot检测分别用于观察基因转染的表达。[结果]MOI=20pfu的转染率已达80%以上,取此...
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第二节 荧光抗体技术
...胞表面的抗原进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,于荧光显微镜下观察,在黑暗背景上可见明亮的特异荧光。 (一)标本的制作 荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位。因此...
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著名学者庄小威Cell解析精子精细结构
...ePhosphorylationandMotility”的文章,利用遗传学,超高分辨率荧光显微镜,以及磷酸蛋白质组学等研究技术,破解了精子中一种关键离子通道:CatSper的结构特征,这将有助于解析鞭毛的信号传递级联放大过程。文章的通讯作者之一...
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细胞凋亡的检测方法
...质分割 成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有:HO33342(Hoechst33342),HO33258(Hoechst33...
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小鼠视网膜新生血管模型荧光素灌注造影
...经过短暂固定后,通过显微手术镜游离视网膜并铺片,在荧光显微镜下观察视网膜血管的分布与形态。结果在荧光显微镜下清楚地观察到全视网膜血管形态、走行,通过调节焦点,使视网膜浅层、深层以及二者交通支都清晰显影...
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荧光显微技术实现深层观测新突破
...用动物蛋白质对光的选择吸收特性,科学家早已发明了用荧光显微镜观测活体动物内部器官组织和活细胞的技术,但光在动物内部组织的聚焦性能太弱,使显微镜下的图像变得非常模糊,因此这项技术一直局限于研究表层厚度不...
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德国开发出观测活细胞中蛋白质相互作用新法
...费力。常用的“荧光共振能量转移”(FRET)分析法是用荧光显微镜来观测个别细胞。汉堡大学海因里希·佩特实验病毒学和免疫学研究所20日发布公告说,传统方法在统计学上缺乏说服力,也容易出错。该研究所开发的新方法在...
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绿色荧光蛋白与H-2Kb融合基因的构建及表达
...融合基因。RT-PCR和Western印迹分析基因表达;激光共聚焦荧光显微镜观察活细胞内荧光布局。结果 RT-PCR和Western印迹分析表明融合基因获得了正确表达。激光共聚焦荧光显微镜观察结果表明,Kb-GFP融合分子象天然Kb分子一样表达...
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第五节 实验室检查
...虫易于认出,或用1600倍吖啶橙液1滴滴入新鲜标本上,用荧光显微镜观察,可见虫体带有淡黄绿色的荧光,特别好看,直接镜检法检出率极高。 二、涂片染色法 将分泌物涂在玻片上,待自然干燥后可用不同染液染色,如...
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转铁蛋白受体在IgA肾病肾组织中的表达
...组)38例。用免疫荧光双套色法标记的抗体,在激光共聚焦荧光显微镜下观察四甲基罗丹明(TRITC)标记的CD71和异硫氰荧光素(FITC)标记的IgA在肾组织上的表达。结果CD71的表达强度与IgA的沉积程度相一致。CD71与IgA在原发组肾小球...
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Cad-Ⅱ基因转染的兔骨髓间充质干细胞自体移植术后的表达研究△
...10%FCS的DMEM继续培养。在已建立的培养条件下孵育24h后,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,检测转染效率。1.2.3MSCs胶原海绵复合体的构建及自体移植Cad-Ⅱ转染48h后,按1×106将转染MSCs注入1.5cm×1.5cm×1.5cm大小的胶原海绵...
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第一节 自身抗体的免疫组织化学检测方法
...抑制或吸收等对照,以证明阳性结果的特异性。 3.荧光显微镜检查阳性荧光呈明亮的黄绿色荧光,抗原组织成分呈现出阳性荧光时,即证明病人有对该组织成分的自身抗体,如细胞核呈明亮的黄绿色荧光即报告抗核抗体阳...
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重组起搏基因质粒构建生物起搏器的实验研究
...结区域,体表心电图监测犬窦房结功能改善情况,并通过荧光显微镜及RT-PCR检测重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2在体内外的表达。而对照组仅注射生理盐水。结果构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2。荧光显微镜下可见转染后的心房肌细胞呈绿色...
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氯化铈诱导K562肿瘤细胞凋亡的实验研究
...化铈(CeCl3)诱导K562细胞凋亡的剂量效应关系。方法采用荧光显微镜定性检测细胞凋亡;流式细胞术定量测定细胞凋亡率。结果较低剂量情况下,氯化铈可以显著引起细胞凋亡,3mg/L尤为显著,其中加稀土后24h收获细胞的凋亡率...
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SET-EGFP重组表达质粒的构建及表达
...清的RPMI-1640培养基继续培养。转染24h后,PBS洗涤3次,在荧光显微镜下观察重组蛋白的表达。 2结果 2.1SET目的基因的PCR扩增SET目的基因PCR扩增产物以1%琼脂糖凝胶进行电泳,凝胶成像系统上观察电泳结果,可见约在900bp有...
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基因工程化分泌神经营养因子-3的鼠胚神经干细胞实验研究
...NSC,用同时携带NT-3和GFP的lentivirus转染构建工程化NSC:用荧光显微镜、鼠胚背根神经结培养(DorsalRootGanglion,DRG)、Westernblot等方法检测基因工程NSC的转基因表达。结果荧光显微镜观察到几乎100%的工程化NSC表达GFP,DRG培养和Westernblot...
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过敏性紫癜性肾炎肾组织中CD71表达的分子特征及意义
...)38例。运用免疫荧光双套色法标记的抗体在激光共聚焦荧光显微镜下观察四甲基罗丹明(TRITC)标记CD71和异硫氰荧光素(FITC)标记IgA在肾组织上的分子表达。结果CD71在对照组患者的肾小球上呈现微弱表达或不表达,在NHSP组和I...