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第四节 脱氧核糖核苷酸的生成
第四节 脱氧核糖核苷酸的生成 DNA与RNA有两方面不同:(1)其核苷酸中戊糖为2脱氧核糖而非核糖。(2)含有胸腺嘧啶碱基,不含尿嘧啶碱基。图8-11 大肠杆菌硫氧化还原蛋白的320残基亚单位结构图 (一)脱氧核糖的生成:...
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应用PCR-RFLP技术进行ABO基因分型研究
...A、B、O三个ABO血型等位基因的cDNA在258、700、793、800位点脱氧核糖核苷酸上存在差异(见表3),引物1和引物2扩增的165bpDNA特异片段包含有ABO基因700、793、800这3个脱氧核糖核苷酸位点,引物3和引物4扩增的296bpDNA特异片段包含有ABO基...
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第八章 核苷酸代谢--第一节 核苷酸的化学结构
...构 核苷酸是组成核酸的基本单位。组成DNA的核苷酸是脱氧核糖核苷酸(deoxyribonucleotide)。组成RNA的是核糖核苷酸(ribonudeotide)。核苷酸可以进一步水解为核苷(nucleoside)和磷酸,核苷又可以水解为戊糖(pentose)和碱基(base)(图8-1)图8...
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细胞凋亡的研究方法
...较。如果细胞量很少,还可在分离提纯DNA后,用32P-ATP和脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)使DNA标记,然后进行电泳和放射自显影,观察凋亡细胞中DNAladder的形成。 上述两种方法都针对细胞凋亡晚期核DNA断裂这一特征,但细...
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第一章 基因诊断与性传播疾病--第一节 基因诊断的分子生物学基础
...1-1 常见核苷酸及其缩写符号碱基核糖核苷酸(缩写)脱氧核糖核苷酸(缩写)腺嘌呤腺嘌呤核苷酸(AMP)腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)鸟嘌呤鸟嘌呤核苷酸(GMP)鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)胞嘧啶胞嘧啶核苷酸(CMP)胞嘧啶脱氧...
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细胞凋亡的检测
...adder。如果细胞量很少,还可在分离提纯DNA后,用32P-ATP和脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)使DNA标记,然后进行电泳和放射自显影,观察凋亡细胞中DNAladder的形成。 1.大分子染色体DNA片段的测定细胞凋亡的早期,染色体断裂成...
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PCR在性病诊断中有什么作用?
...。它的基本原理是一种酶促合成反应,即在模板DNA引物和脱氧核糖核苷酸存在下,在DNA聚合酶的作用下,使DNA链扩增延伸。试验先通过加热变性,使DNA双螺旋的氢链断裂,解离成单链DNA;然后通过退火,突然降温使引物与其互补...
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基因阻断法预防股骨头坏死有进展
...头坏死的新的发病机理,并根据这一发病机理,提出采取脱氧核糖核苷酸干扰技术,应用重组腺病毒表达载体感染动物的骨髓间充质干细胞,使其持续转录目的基因片断,切割降解骨髓间充质干细胞内成脂转录因子,快捷、有效...
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对单个DNA分子在拉伸力下熔化现象研究取得进展
...结构上看它是一个较简单的长丝状分子,由两条螺旋状的脱氧核糖核苷酸长链组成,即众所周知的双螺旋。双螺旋外侧是带有负电的戊糖-磷酸骨架,双螺旋内部共有四种碱基(分别用A、T、G、C表示),这四种碱基以氢键相互作用...
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角色转换:让DNA干RNA的活
...,部分是因为人们忽略了组成RNA的核糖核苷酸和组成DNA的脱氧核糖核苷酸之间的差异在生物化学方面所具有的重要意义。“尽管它们都是功能分子,”他说,“都是单个的DNA或RNA通过折叠成一定的形状然后发挥出酶学功能,但它...
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5-1-7滚环(Rollingcircle)复制
...被切开,其5‘端游离出来。这样,DNA聚合酶Ⅲ便可以将脱氧核糖核苷酸聚合在3‘-OH端。当复制向前进行时,亲代DNA上被切断的5‘端继续游离下来,并且很快被单链结合蛋白所结合。因为5‘端从环上向下解链的同时伴有环状双...
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让DNA发挥RNA的角色
...,部分是因为人们忽略了组成RNA的核糖核苷酸和组成DNA的脱氧核糖核苷酸之间的差异在生物化学方面所具有的重要意义。“尽管它们都是功能分子,”他说,“都是单个的DNA或RNA通过折叠成一定的形状然后发挥出酶学功能,但它...
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糜蛋白酶mRNA水平及其酶活性与糖尿病仓鼠心肌病变有关系
...-过氧化物酶复合物法(SABC)检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原水平,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测chymasemRNA水平变化,放射免疫分析法测定心肌chymase和血管紧...
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左-卡尼汀心脏停搏液对心脏瓣膜置换术患者心肌细胞凋亡的影响
...CPB转流前和停机后即刻取心房心肌组织一块,用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记法检测心肌凋亡细胞;免疫组化法测定心肌细胞Bax和Bcl-2蛋白表达,计算Bcl-2蛋白与Bax蛋白的比值(Bcl-2/Bax)。结果与对照组比较,治疗组开放升主...
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核转录因子-κB在局部脑缺血及再灌注损伤后大鼠脑细胞中的表达及N-乙酰半胱氨酸的干预作用
...NF-κB的表达情况,红四氯氮唑染色测定各组脑梗死体积,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果(1)缺血及再灌注后NF-κBp65明显从胞质转移到胞核。NAC干预组[缺血6h及24h再灌注组p65阳性细胞率...
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第十五章 核酸的结构与功能--第一节 核酸的化学组成
...bose)和脱氧核糖(deoxyribose)两种,分别存在于核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸中。为了与碱基标号相区别,通常将戊糖的C原子编号都加上“′”,如C1′表示糖的第一位碳原子。 戊糖与嘧啶或嘌呤碱以糖苷键连接就称为核苷,通...
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植物转基因技术将造福人类和环境
...种内在或外在的特性。任何生物体内的基因都是由小分子脱氧核糖核苷酸组成的大分子物质,平时我们吃的任何食品中都含有基因或者基因的降解物。转基因作物一般通过2种分子机制产生人类所期望的特性。第一种即将其它物...
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北京大学1989年硕士研究生入学考试生物化学试题
...NA分子之比为______ 5、多数生物体内核糖核苷酸还原成脱氧核糖核苷酸发生在______ 6、氯霉素的抗菌作用是由于它______ 7、真核生物体内多肽链合成的第一个氨基酸为______ 8、用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合...
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5-1-5DNA复制的过程
...性。另外,全酶中还有ATP分子它是DNA聚合酶Ⅲ催化第一个脱氧核糖核苷酸连接在RNA引物上所必需的,其他亚基的功能尚不清楚。 在DNA复制叉处要能由两套DNA聚合酶Ⅲ在同一时间分别进行复制DNA前导链和滞后链。如果滞后链模...
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养心康对心衰兔模型细胞凋亡的实验研究
...物房温度控制在18℃~22℃。 1.2.4细胞凋亡的检测采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(荧光素标记测定法)。方法按如下步骤进行:实验兔的心脏标本→石蜡包埋→5μm连续切片→常规脱蜡脱水→PBS洗2min×2次...
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同位素技术二--同位素示踪法
...提高,不仅能定性,还可作定量分析。在阐明核糖苷酸向脱氧核糖核苷酸转化的研究中,采用双标记法,对产物作双标记测量或经化学分离后分别测量其放射性。如在鸟嘌呤核苷酸(GMP)的碱基和核糖上分别都标记上14C,在离体...
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黑米花青素在大鼠视网膜光化学损伤中的防护作用研究
...HE染色和透射电镜技术,观察视网膜的形态结构变化,并以脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标法(terminaldeoxyribotidetransferasemediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)及免疫组织化学染色SABC法检测各组视网膜细胞凋亡情况。 研究结果...
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第三节 基因的复制与表达
...组成。核酸有两类:一类是脱氧核糖核酸(DNA),DNA中的脱氧核糖核苷酸主要由4种碱基构成,即腺嘌呤(adenine,A)、鸟嘌呤(guanine,G)、胞嘧啶(cytosine,C)和胸腺嘧啶(thymine,T),此外,还有脱氧核糖(deoxyribose)和磷酸;另一类...
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第十八章 核酸分子杂交技术概述--第一节 核酸的分子结构
... 二、核酸的一级结构 核酸又称多核苷酸,组成DNA的脱氧核糖核苷酸主要为四种,即dAMP、dGMP、dCMP及dTMP;组成RNA的核糖核苷酸主要有AMP、GMP、CMP及UMP四种。对两种核酸的组成可简写如下: DNA=(碱基-脱氧核糖-磷酸)n;R...
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第二十三章 DNA重组技术及其在基因诊断中的应用--第一节 工具酶
...’-OH末端。 (十)碱性磷酸酶 从DNA或RNA的三磷酸脱氧核糖核苷酸或三磷酸核糖核苷酸上除5’-磷酸根残基。一般的用途是用这种酶处理DNA或RNA后,在5’端上标记32P。在经限制性内切酶酶切DNA片段后,用碱性磷酸酶(alkali...
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灭绝时间远超DNA寿命:复活恐龙还有戏吗
...计算,他们认为DNA的半衰期约为521年,换言之,每过521年脱氧核糖核苷酸之间的化学键就会断裂一半。就算在-5℃的最理想条件下,最多经过680万年,这些化学键就会分解得一个不剩。而早在那之前,可能只要150万年,这些化学...
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第二十一章 糖类--第一节 单糖
...苷酸,是RNA的基本组成单位;含脱氧核糖的核苷酸统称为脱氧核糖核苷酸,是DNA的基本组成单位。 (二)D-(+)-葡萄糖 D-(+)-葡萄糖在自然界中分布极广,尤以葡萄中含量较多,因此叫葡萄糖。葡萄糖也存在于人的血...
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缬沙坦干预心肌梗死大鼠心室重构的实验研究
...细胞凋亡的原位检测 凋亡细胞的原位检测:应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)标记心肌凋亡细胞核中的DNA3’-OH末端,用TUNELPOD法显示凋亡细胞。按试剂盒说明进行。凋亡细胞计数分析:正常心...
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青光眼与谷氨酸、细胞凋亡的研究
...体。DNA断裂发生在核体间。原位缺口翻译技术(ISNT),脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)及琼脂凝胶电泳产生的梯形现象都是特征性DNA片断的具体应用[17]。 Kerrigan等[4]研究原发性开角型青光...
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青光眼与谷氨酸、细胞凋亡的研究
...体。DNA断裂发生在核体间。原位缺口翻译技术(ISNT),脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)及琼脂凝胶电泳产生的梯形现象都是特征性DNA片断的具体应用[17]。 Kerrigan等[4]研究原发性开角型青光...