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新策略改善蛋白质相互作用分析
...物中的相互作用,人们已经开发出多种高通量的方法,如酵母双杂交系统。然而,目前的高通量蛋白相互作用组(interactome)的数据集质量虽高,但覆盖度很低。对于人类而言,95%以上的相互作用组还有待定位。酵母双杂交系统...
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中国协和医科大学发PNAS文章
...学院,美国佛罗里达州立大学的研究人员研发了一种新型酵母双杂交系统,能有效识别靶向核糖体蛋白L12-L10相互作用的抗结核药物,这对解决结核菌耐药性问题具有重要的意义。相关成果公布在《美国国家科学院院刊》(PNAS)...
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FXR1P与Btf相互作用的鉴定
...ciatedtranscriptionfactor1,Btf)蛋白质的相互作用。方法将利用酵母双杂交系统进行胎脑cDNA文库筛选出的蓝色克隆提取酵母质粒后转化大肠杆菌Top10,利用氨苄抗生素抗性筛选转化有AD/Library质粒的转化子,扩增后小量提取质粒,醋酸...
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酵母双杂交体系的新发展
摘要酵母双杂交系统是研究蛋白质相互作用的一种有效方法。本文简要介绍了双杂交体系的原理、应用和自身存在的问题,并对其最新发展做了重点阐述。 关键词酵母双杂交系统,蛋白质一蛋白质间相互作用 自从Fields和...
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乙型肝炎病毒抗原与金属硫蛋白相互作用的研究
...与HBV抗原相互作用的蛋白基因,解放军第302医院学者应用酵母双杂交系统3构建HBV抗原诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其中表达,与含肝文库质粒的酵母Y187进行配合、双杂交,在营养缺陷培养基(SD/Trp-Leu-His-Ade)上及X-αgal蓝白斑双重...
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基因分离克隆的方法
...克隆,并通过遗传转化实验证实目的基因的功能。 8酵母双杂交系统分离克隆基因 酵母双杂交系统体系可以发现蛋白相互作用的蛋白的编码基因。这种方法的用途有:验证已知基因间的相互作用;可以快速发现编码蛋白...
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蛋白质芯片技术
...蛋白质芯片大多数还局限化学型芯片上。Uetz等[6]使用酵母双杂交系统构筑了蛋白质芯片。Arenkov等[7]曾将探针蛋白质固定于聚丙烯酰胺凝胶中,待测样品通过电泳与凝胶中的探针蛋白发生特异性结合,从而捕获感兴趣的靶...
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CLN8P与ND1相互作用的鉴定
...基因的相互作用蛋白来推测该基因的功能。为此,我们用酵母双杂交系统寻找与CLN8P相互作用的蛋白。 但是应用酵母双杂交系统筛选相互作用蛋白,在筛选过程可出现假阳性。因此,将筛选得到的阳性质粒一一与诱饵质粒重...
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NCLs致病相关基因CLN8真核表达载体的构建及检测*
...ot结果表明所表达的蛋白为融合表达的Flag-CLN8。3讨论应用酵母双杂交系统筛选相互作用蛋白,在筛选过程可出现假阳性。由于酵母的翻译后加工系统与哺乳动物细胞的翻译后加工系统不尽相同,某些哺乳动物细胞的蛋白需经过翻...
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NCLs致病相关基因CLN8酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活作用的检测
...建的诱饵质粒对报告基因LacZ无自激活作用。 3讨论 酵母双杂交系统(Yeasttwohybridsystem)是StanleyFields等提出并建立的一种直接于细胞内检测蛋白-蛋白之间相互作用的遗传学方法[6],其最突出的特点是能够在酵母这种繁殖...
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人新基因EOLA1研究快讯
...EOLA1与MT2A相互作用位点及其在细胞内的共定位情况:应用酵母双杂交系统确定EOLA1与MT2A相互作用位点,通过位点基因序列推导出其对应的氨基酸序列,了解其相互作用位点模式,从而为了解EOLA1功能提供信息。利用绿色荧光蛋白...
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我国淋巴增生综合征致病机制研究获新进展
...生化、细胞和遗传学实验进行相关研究。首先,他们利用酵母双杂交系统,筛选到与SAP相互作用的蛋白PIX——一个小分子鸟苷酸酶的鸟苷转换因子。继而,通过免疫共沉淀的方法验证了在T细胞中,SAP与PIX相结合,并确定了两者...
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植物蓝光受体机理研究获新进展
...RY1信号转导是否涉及依赖于蓝光的生化机理。该研究通过酵母双杂交系统,发现拟南芥CRY1和CRY2都与SPA1发生依赖于蓝光的直接蛋白相互作用:在黑暗条件下CRY1和CRY2与SPA1不能发生相互作用,而蓝光照射促进它们的相互作用,并且...
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我国淋巴增生综合征致病机制研究获新进展——SAP-PIX通路调节T细胞活化
...生化、细胞和遗传学实验进行相关研究。首先,他们利用酵母双杂交系统,筛选到与SAP相互作用的蛋白PIX——一个小分子鸟苷酸酶的鸟苷转换因子。继而,通过免疫共沉淀的方法验证了在T细胞中,SAP与PIX相结合,并确定了两者...
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中药现代化研究的生物技术
...信号转导途径的干预及效应的蛋白质图谱等,生物芯片,酵母双杂交系统,噬菌体展示技术都可用于研究中药如何调控机体内的基因和蛋白质的表达及其相互作用。中药作用的分子机制的阐明为中药被西方主流医学接受提供重要...
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OPTN基因与原发性开角型青光眼
...为阐明该蛋白抑制TNF-α诱导凋亡的机制,YonganLi[6]等在酵母双杂交系统用E3-14.7K筛选海拉细胞cDNA文库时发现了一种包含多个亮氨酸拉链结构的新的蛋白,命名为14.7K相干蛋白(14.7Kinteractingprotein,FIP-2)。2000年,MorelandRJ等[7...
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疾病蛋白质组学
...蛋白质组学研究技术第一节蛋白质相互作用研究技术一、酵母双杂交系统二、噬菌体表面显示技术三、基于质谱的蛋白质相互作用研究方法第二节蛋白质芯片技术一、蛋白质芯片种类二、蛋白质芯片探针的制备三、蛋白质芯片的...
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1998年度医学微生物学领域国家自然科学基金项目申请及资助情况介绍
...大学庚型肝炎病毒的致病性研究朱万孚北京医科大学应用酵母双杂交系统筛选乙肝病毒细胞受体的研究陈常庆中国科学院上海生物 工程研究中心结核病B7/hsp嵌合DNA疫苗研究钟 森泸州医学院HSP-HCV抗原肽诱导HCV特异性CTL的研...
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人类基因组计划的现状
...基础,这些互作有可能以通用的或特殊的“陷井”(如:酵母双杂交系统)加以识别[7]。 总之,基因组学正方兴未艾,其现实意义和深远意义已得到全体人类的共识,预期在不远的将来,人类基因组学将对人类的健康、计划...
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水稻蛋白质组学
...互作用而实现的。目前用来检测蛋白质相互作用的方法有酵母双杂交系统法,蛋白质芯片法,噬菌体展示技术等。 2 蛋白质组学在水稻中的应用 1)发育的蛋白质组学研究。在蛋白质组学概念提出来之前,许多研究者就已...
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重组腺病毒介导的人AWP1基因转移对人源肝癌细胞增殖的影响
...胞的生命活动[12]。AWP1(associatedwithPRK1)是Duan等[3]在利用酵母双杂交系统筛选可能与人类CDc34相互作用的蛋白质时发现的一种新蛋白,由于其能够与PRK1特异性地结合而得名,并由此推测AWP1可能通过PRK1等途径参加了细胞内的信号...
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非受体蛋白酪氨酸激酶Tec家族的研究进展
...法检测与细胞内结构域结合的分子外,最新研究方法采用酵母双杂交系统筛选细胞特异的PH结构域结合的蛋白分子及结合特性,该方法简便、快速,为获得和发现新的信号转导分子奠定了可靠的基础。 作者简介 第一作者:...
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凋亡调控基因BC12家族研究的新进展
...落刺激因子和脂多糖诱导下产生的早期反应基因[14]。在酵母双杂交系统中,MCL-1和A1分别与BAX强烈结合[10],提示存在MCL-1/BAX和A1/BAX异二聚体的可能性。早期资料未发现动物细胞中MCL-1与BAX的免疫共沉淀,但新近报道在造血细胞中M...
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免疫新分子的发现及其研究进展
...有典型的真核生物的特性,是研究真核蛋白的理想宿主。酵母双杂交系统在寻找与已知蛋白相互作用的未知蛋白时是一有效途径,以研究胞内蛋白相互作用见长。近年来建立的酵母信号肽捕获系统在选择性克隆含信号肽序列的新...
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Caspase家族与Fas/APO-1介导凋亡的信号传导
...,提示凋亡信号传导需由其它信号传导分子来完成。采用酵母双杂交系统策略,几个研究小组先后克隆分离到两种与Fas死亡域结合的蛋白质:MORT1/FADD、RIP。这两种蛋白质具有与Fas死亡域同源的序列。FADD或RIP在转染细胞过量表...
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浙江大学博士入学考试分子生物学复习题
...成表面呈现的载体,其中许多领域还有待开发研究。阐述酵母双杂交系统原理及其应用酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转录激活因子的参与。真核细胞基因转录激...
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试论对医院网络系统的审计
【摘要】通过对医院网络系统的审计,可使系统达到有效性、经济性、效率性、安全性、准确性和合法性的目的,做到医院卫生管理、财经管理、统计信息管理等内部信息资源共享,以充分发挥网络系统在医院管理中的作用。 ...
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杂交水稻国家重点实验室技术支撑国家粮食安全
6月25日,杂交水稻国家重点实验室揭牌仪式,在湖南杂交水稻研究中心举行。“杂交水稻之父”袁隆平院士寄望其成为支撑我国杂交水稻学科在国际上持续领先的重要平台,为实现超级杂交稻第四期目标提供保障。 杂交水稻...
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酵母细胞被嵌入人类基因仍存活
科学家们发现,虽然人类和酵母已经在不同的道路上进化了十亿年,但我们之前的相似之处仍然非常多。他们将四百多个人类基因分别插入到酵母细胞中,发现大约50%的基因能够行使功能让这种真菌存活下来。这项研究于五月二...
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我院医疗信息系统解决方案浅谈
...,我院信息化建设取得了初步的成效,并逐渐向医疗信息系统的方向发展。本文结合我院实际情况,从建设原则,系统实施,运行情况及解决方案等几个方面,分析了医疗信息系统建设需要注意的一些问题。 关键词医院信息...