-
感觉和运动神经来源的雪旺细胞p75受体表达的研究
...10-5g/L的阿糖胞苷(Ara-C)处理2d。 2.细胞免疫荧光、碘化丙啶双重染色:细胞鉴定及受体检测使用免疫荧光染色技术,用碘化丙啶双重标记目的是确定细胞轮廊,便于计算每个细胞的荧光值。以检测p75受体步骤为例:倾去Petri培...
-
重组大鼠肝再生增强因子对肾小管上皮细胞增殖及凋亡的影响
...的增殖;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色和钙磷脂结合蛋白/碘化丙啶(annexinV/PI)双标记流式细胞术检测上述各组HK2细胞的凋亡。结果(1)rrALR对常规培养条件下的HK2细胞有直接的促增殖作用,并具有量效关系和时效关系;(2)rrALR能够促进GM...
-
合成新工具剖析细胞蛋白质互动网络
...,光离胺酸还带着以紫外光能启动的“间谍摄影机”双吖丙啶,可“捕捉”跟特定蛋白质互动的分子。作为研究工具,光离胺酸简便易用,只要将其加入细胞培养基16小时,就足以让细胞蛋白质被此“间谍”非天然氨基酸标签。...
-
羟基喜树碱对类风湿关节炎外周血淋巴细胞增殖及凋亡的影响
...A),计算细胞生长抑制率(IR%)。③用AnnexinVFITC及碘化丙啶(PI)溶液染色流式细胞术(FCM)检测HCPT与MTX在48h时不同浓度(0、0.1、10、100μg/m1)的细胞凋亡率。结果①HCPT与MTX对RA患者PBL增殖均具有抑制作用,呈时间、剂量...
-
合肥研究院在纳米材料高通量生物毒性检测方法研究中获进展
...料细菌毒性检测方法:GFP绿色荧光表征细菌的生长,碘化丙啶PI红色荧光标记区分死、活细胞,在流式细胞仪上准确区分细菌与纳米材料,通过绿色荧光和红色荧光细胞的相对比例,反应纳米材料的毒性。对比单荧光标记,双荧...
-
表没食子儿茶素没食子酸酯对人胃癌细胞株MKN45诱导凋亡作用的研究
...的抑制作用;膜连蛋白V-异硫氰基荧光素(AnnexinV-FITC)+碘化丙啶(PI)方法测定EGCG作用后MKN45细胞的凋亡率;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测EGCG对MKN45细胞内caspase-3活性的影响;Rhodamine123染色检测EGCG作用后MKN45细胞内线粒体膜电位的改变...
-
多西环素对培养的人结膜上皮细胞炎性反应及凋亡的影响
...1β的表达,Westernblot检测CD54的表达。72h后收集细胞,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞学检测凋亡。结果培养的正常人结膜上皮细胞可以表达少许CD54和IL-1β,加入IFN-γ后表达明显增加,加入多西环素和地塞米松后CD54和IL-1β的表达下降...
-
视黄酸对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响
...-7~10-3mol/L,置-20℃备用。柠檬酸三钠,2H2O,RNAase,碘化丙啶,生色反应试剂盒,考马斯亮蓝G250溶液,均为Sigma产品。 1.2细胞培养人乳腺癌细胞系MCF-7含雌激素受体及孕激素受体,由上海中国科学院细胞生物所细胞库提供,...
-
埃本膦酸钠对肺癌细胞增殖及凋亡的影响
...后,消化、离心收集细胞,用-20℃的70%乙醇固定,经碘化丙啶染色后置流式细胞仪检测,分析细胞周期的变化。分析软件为ModFitLT。 1.6数据统计分析各项检测数据以ˉx±s表示,采用样本均数差别的t检验。 2结果 2.1埃...
-
胆囊癌对化疗药物敏感性的研究
...,各组加入10mg/mlRNA酶溶液150μl,37℃水浴30min,加入碘化丙啶(PI),用300目尼龙网过滤后4℃下放置15min,转而进行FACScan激光流式细胞仪检测,资料经CellQuest软件收集和分析。 1.3统计学方法采用SAS统计软件进行Student-t检验。 ...
-
微生物所在链霉菌合成生物学调控元件定量分析方面获得新进展
...们使用了另一种缓冲液替代了蔗糖缓冲液,同时使用碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色区分死细胞,然后利用共焦激光扫描荧光电子显微镜扫描。利用该方法,他们对200个天然的或合成的启动子和200个RBS进行高通量表征。另外又...
-
脑康灵口服液对偏头痛大鼠神经细胞凋亡的影响
...000505)。实验时用注射用水配制成所需浓度。1.2试剂碘化丙啶(PI),Sigma公司;RNAseA,QIAGEM公司;TritoX-100,E.MERCK公司;其余试剂均为市售分析纯。1.3仪器LKBⅢ型超薄切片机(瑞典);日立H-600型透射电镜(日本);COULTERESP型流式细胞...
-
微生物所在链霉菌中首次实现单细胞水平的转译元件强度表征
...们使用了另一种缓冲液替代了蔗糖缓冲液,同时使用碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色区分死细胞,然后利用共焦激光扫描荧光电子显微镜扫描。利用该方法,他们对200个天然的或合成的启动子和200个RBS进行高通量表征。另外又...
-
人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响
...成单细胞悬液,离心2000r·min-1,5min后弃上清液加入碘化丙啶荧光素染色,将等体积的细胞悬液和碘化丙啶染液混合,4℃放置20~30分钟,测定前用300目尼龙膜过滤,将样品放入流式细胞仪样品室激发波长488nm,用流式细胞仪进行细胞周...
-
茶多酚诱导膀胱癌T24细胞凋亡及上调PTEN表达
...检测:PBS洗涤2次,加入10mg/LRnaseA200μL,水浴30min,碘化丙啶染色30min,4℃避光。FCM检测细胞周期,并计算细胞分裂增殖指数(PI)=(S+G2M)/(G1+S+G2M)×100%。②癌细胞PTEN表达强度的检测:平行组和对照组分别加入鼠抗人PTEN20μL,PBS...
-
细胞凋亡的检测方法
...胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(propidineiodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用,就可以...
-
单细胞凝胶电泳技术的改良方法探讨
...裂解1h;解旋20min;4℃电泳(25V,300mA)30min;中和5min;加碘化丙啶,暗处染色10min,加盖片;于莹光显微镜下镜检,照像。1.2.6统计学方法本研究的结果采用SPSS10.0软件包处理。2结果试验结果见表1。表1两种方法检测的小鼠淋巴细胞DNA损...
-
细胞凋亡的几种检测方法
...取Hoecha染料,呈现强蓝色荧光,而坏死细胞主要摄取碘化丙啶(PI)而呈强的红色荧光。 ■DNA片断原位标记法 凋亡细胞DNA片断原位末端检测技术是指在细胞(或组织)结构保持不变的情况下,用荧光素、地高辛或生物素标...
-
应用流式细胞仪对不同病变胃粘膜中DNA含量的分析
...病变区。流式细胞仪EpicsXL型为美国Coulter公司生产。碘化丙啶(PI)购自华美公司,其它试剂均为国产分析纯。 1.2方法标本经常规剪碎,制备单细胞悬液1×106/ml,70%冷酒精5ml中,4℃下固定18h以上;离心去上清,调整细胞浓度为...
-
Tempol对紫外线照射所致HaCaT细胞损伤保护作用
...NALadder由日本TOYOBO生产,西班牙琼脂糖由Biowest生产,碘化丙啶、胰蛋白酶由北京中昊时代生物科技公司生产,乙二胺四乙酸钠(EDTA)由上海生工生物工程公司生产,二甲基亚砜(DMSO)由天津市天河化学试剂厂生产。1.2实验方法1.2.1HaCaT细...
-
AnnexinV/PI、TdT和PI法检测细胞凋亡的比较
...属医院中心实验室 检测细胞凋亡(APO)常用的有PI(碘化丙啶,propidiumiodide)染色DNA的测定法和TdT(末端脱氧核苷转移酶,terminaldeoxynucleotidyltransferase)法。AV(磷酯酰丝氨酸结合蛋白,Annexin)法是近年来提出的一种新方法。我们采用AV...
-
低剂量辐射对小鼠外周血淋巴细胞周期、胸腺指数和脾脏指数的影响
...胞分离液(上海生物工程技术服务有限公司),PI(碘化丙啶)购自上海生物工程技术服务有限公司,流式细胞仪(美国B-D公司)。 1.3照射条件 采用PRIMUS型高能医用电子直线加速器(德国西门子公司)产生的X射线治疗机进...
-
卵巢癌细胞凋亡的体外药敏研究
...M法检测其诱导细胞凋亡的效果,采用Annexin-V-FITC结合碘化丙啶(PI)染色和TdT介导X-dUTP缺口末端标记(TUNEL)。结果(1)在MTT法定量检测中,8种化疗药物作用48h对HO-8910细胞系生长抑制率与对照组相比具有不同程度的差异性,其...
-
三氧化二砷对胆囊癌细胞化疗增敏作用及其机制研究
...涤1次,用70%冷乙醇固定18h,再用PBS洗去固定液,加碘化丙啶染色液1ml(20μg/mlPI),终浓度为50mg/ml,置入4℃冰箱30min后用流式细胞仪检测细胞凋亡。1.4WesternBlot分析提取细胞总蛋白,BCAProteinAssayKit定量,80μg蛋白用10%SDS-PAGE分...
-
消积饮联合华蟾素对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响
...滤,离心,75%的乙醇固定,Coulter-DNA-PrepReagentsKit进行碘化丙啶(PI)染色,CoulterCo.Ltd.的EPS型流式细胞仪进行分析。1.6统计分析方法采用SPSS10.0统计软件分析,全部均数用ˉx±s表示,各组小鼠之间瘤重、细胞周期各时相分布采用单...
-
肾上腺素对瘢痕成纤维细胞增殖的影响
...离心,沉淀细胞重悬于190μl稀释缓冲液中,加入10μl碘化丙啶(20μg/ml),反应10min后,上机检测凋亡。1.8统计学处理数据以X±s表示,采用SPSS10.0软件建立数据库,对实验数据进行单因素方差分析。2结果2.1肾上腺素对成纤维细胞...
-
人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607的建立及其生物学特性的观察
...胞,PBS洗涤制成2×109个/L细胞悬液,冰冷乙醇固定,碘化丙啶染色,流式细胞仪上行细胞周期分析。 8.染色体分析:取第80代细胞按常规方法处理[3],G显带后进行核型分析。 9.裸鼠移植:取第78代细胞5×106个/只,分别...
-
螺旋藻多糖抑制人肝癌细胞增殖的实验研究
...轻轻打匀细胞,预冷的75%酒精(1~3ml)固定,加入碘化丙啶,置4℃避光染色30min,400目尼龙网过滤后,将样品加入流式细胞仪的样品室,以激发波长488nm测定,微机统计分析资料,输出结果。2结果2.1PSP对HepG-2细胞生长的抑制作...
-
人参四物汤对成瘾动物胸腺T细胞亚群增殖及IL-2R的作用研究
...提供。人参由本院临床医学基础研究所免疫室提供。碘化丙啶(PI)由本院临床医学基础研究所免疫室提供,四物汤为本室提取制作(1ml相当于生药2g)。 1.3 仪器 流式细胞测定仪为FACS-Calib型,解放军总医院仪器中心。 1....
-
小胶质细胞表达OX40L维持保护性CD4+T细胞应答的体外研究
...小胶质细胞对T淋巴细胞增殖的影响。最后用annexinV和碘化丙啶双染法检测对T淋巴细胞凋亡的作用。研究结果显示:①IFNγ可诱导小胶质细胞表达OX40L.定量RTPCR结果表明OX40L的mRNA表达水平在IFNγ作用下明显升高,Westernblot...