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流式细胞计的技术参数
...目的和要求而提出几个技术参数或指标来定量说明。对于流式细胞计常用的技术指标有荧光分辨率、荧光灵敏度、适用样品浓度、分选纯度、可分析测量参数等。 (1)荧光分辨率:强度一定的荧光在测量时是在一定道址上...
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流式细胞计PI染色死细胞
PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。 Ⅰ、材料 1、PI(e.g.,Cat#537059,Calbiochem,SanDiego,CA) 2、缓冲体系:1×PBS(Ca2+andMg2+free,e.g.,Cat#9240,IrvineScientific,SantaAna,CA)+2%新鲜小牛血清...
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流式细胞计的调试和使用
(1)调试和校准:流式细胞计在使用前,甚至在使用过程中都要精心进行调试,以保证工作的可靠性和最佳性。调试的项目主要是激光强度、液流速度和测量区的光路等。 激光强度:除调整反射镜的角度以调整到所需波长...
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第一节 流式细胞术简介
...研制出流液束、照明光轴、检测系统光轴三者相互正交的流式细胞计的基础上,首次用荧光Feulgen反应对DNA染色显示出DNA的活性与荧光之间存在着线性关系,并在DNA的直方图上清楚地显示出细胞周期的各个时相。Gohde和Dittrich接着...
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流式细胞术
...离纯度可达99%。包被细胞的液流称为鞘液,所用仪器称为流式细胞计(flowcytometer)。用流式细胞计分选细胞作者:
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流式细胞仪的基本结构
流式细胞计的基本结构流式细胞计主要由四部分组成。它们是:流动室和液流系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。 (1)流动室和液流系统:流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成,常用光学...
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一株可识别胸腺基质内上皮细胞与血管系统的单链抗体
... 免疫组织化学染色分析:参见参考文献〔3〕。 流式细胞计(FACS)染色分析:各种类型的细胞系在培养瓶中生长到合适的密度以后,用PBS冲洗1遍,加入含有0.1%EDTA的PBS并在37℃孵育10min使细胞松散。收集细胞,重悬在FACS缓冲...
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细胞凋亡的检测
...DiOC6(25nM),JC-1(1mM),TMRM(100nM),37°C平衡30min,流式细胞计检测细胞的荧光强度。 注意事项 1.始终保持平衡染液中pH值的一致性,因为pH值的变化将影响膜电位。 2.与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋...
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2-3细胞分离技术
...99%(图2-24)。包被细胞的液流称为鞘液,所用仪器称为流式细胞计(flowcytometer)。图2-24用流式细胞计分选细胞 三、细胞电泳 在一定PH值下细胞表面带有净的正或负电荷,能在外加电场的作用下发生泳动,这种现象称为...
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基因组学或可寻求腺癌根治法
...表达的恶性信号创建了一种恶性干细胞信号。定量RT-PCR,流式细胞计数和免疫化学法被用于有效的检测异常的基因表达。 在癌症干细胞表达谱的分析中,基因与炎症具有显著的关联意义。潜在的治疗靶位为NFκB被认为能促进...
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第十章 流式细胞术(FCM)在免疫细胞化学中的应用
...工具。本章 主要介绍流式细胞分离及分析的基石原理、流式细胞计的基本结构和操作、流式细胞术在免疫细胞化学中应用的技术思路、途径和方法,以及它们在临床医学中的应用。对FCM在外周血白细胞的免疫组织化学分析方面...
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线粒体膜势能检测细胞凋亡
...为DiOC6(25nM),JC-1(1mM),TMRM(100nM),37°C平衡30min,流式细胞计检测细胞的荧光强度。 注意事项 1.始终保持平衡染液中pH值的一致性,因为pH值的变化将影响膜电位。 2.与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋...
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野生型p53基因转染对人胃癌细胞的作用
...胞系,用免疫组化法检测p53基因在胃癌细胞中的表达;用流式细胞计数、细胞DNA片段化分析检测细胞周期分布和凋亡。结果在高MOI病毒剂量下,外源p53基因在3种胃癌细胞的胞核中均高效表达,并可使细胞产生明显的G2/M阻滞和凋...
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急性胰腺炎的外周血淋巴细胞亚型的改变
...家选择了20例轻度AP(M-AP)及15例重度AP(S-AP)患者。分别采用流式细胞计量仪计数第1-3天、5天、10天以及30天的外周血淋巴细胞。结果可见:AP患者中的循环淋巴细胞显著减少,在早期AP,T淋巴细胞和B淋巴细胞数量减少的程度相似,...
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流式细胞仪的工作原理
(1)参数测量原理:流式细胞计可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区...
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洗涤血小板浓缩液中血小板的活性
...缩液去除白细胞后,以15%右旋柠檬酸溶液进行洗涤。通过流式细胞计量仪测定自发激活及二磷酸腺苷(ADP)诱导和胶原诱导的激活反应。此外,测定ADP和胶原诱导的聚集反应。研究结果显示,未经洗涤的血小板16%可以自发激活,...
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原发体液性免疫缺陷儿童单核细胞中CD40的表达
...IL-18的表达情况。他们用合适的MAB对细胞进行染色后使用流式细胞计量术在B细胞和单核细胞中分析CD40的表达情况,在活化的T淋巴细胞中分析CD40L的表达情况。结果发现B细胞中CD40和活化的T细胞中的CD40L在患者和健康对照中都差不...
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趋化因子受体CCR5在干眼综合征患者结膜上皮中的表达
...的抗CD45抗体(CD45是骨髓来源细胞的标志物),通过双色流式细胞计量术分析CCR5阳性细胞的特征。为了研究CCR5信使RNA转录产物,研究人员还对从正常个体(n=5)和干眼综合征患者(n=14)印迹细胞学样本中分离的RNA进行了实时PCR...
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藿香正气口服液对志贺杆菌和沙门氏杆菌诱导的腹泻小鼠肠道粘膜免疫反应的效应
.../kg和0.52g/kg剂量的HXZQ,记录腹泻的开始和持续时间,采用流式细胞计量仪分析回肠淋巴结和外周淋巴细胞,并采用ELISA检测外周血和肠道组织匀浆中TNF-alpha水平,所得数据进行Student‘st检验。结果可见,BSD组小鼠显示从诱导腹泻...
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聚焦ABI的流式细胞仪
...分析也很理想,因为仪器能够分离不同的细胞群体。除了流式细胞计数应用,该公司还打算将声波聚焦技术应用于磁珠分离和样品制备,这与它旗下的Dynal磁珠业务契合。在目前的流式细胞仪市场上,BD和BeckmanCoulter无疑占领着统...
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MIT教授造假被判5年不得参与政府资助科研项目
...说明,VanParijs伪造了许多图片,包括表示细胞蛋白表达的流式细胞计图表。有几次他使用一种细胞群体的实验数据来伪造另一种细胞群体的实验结果。调查报告现在还没有发布,但是VanParijs实验室的一名不愿透露姓名的前成员对...
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AVE-763尿沉渣分析仪的应用
...析仪目前全自动尿沉渣分析仪主要有两种类型:一是应用流式细胞计数和血细胞分析仪原理的SysmexUF-100型尿沉渣分析仪,该仪器是根据被测物的电阻,对光的散射率的变化,结合荧光染色等技术,间接分析尿中的有形成分。二是...
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流式细胞术发展简史
...研制出流液束、照明光轴、检测系统光轴三者相互正交的流式细胞计的基础上,首次用荧光Feulgen反应对DNA染色显示出DNA的活性与荧光之间存在着线性关系,并在DNA的直方图上清楚地显示出细胞周期的各个时相。Gohde和Dittrich接着...
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识别胸腺髓质上皮细胞和胸腺树突状细胞的单链抗体的筛选
...ne)的盖玻片封片,并在荧光显微镜下检查染色类型。 流式细胞计(FACS)染色分析:各种类型的细胞系在培养瓶中生长到合适的密度以后,用PBS冲洗1遍,加入含有0.1%EDTA的PBS并在37℃孵箱中孵育10min使细胞松散。收集细胞,重悬...
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SysmexR-500自动网织红细胞分析仪与镜检法计数网织红细胞的比较
...色、分析。SysmexR-500自动网织红细胞分析仪用半导体激光流式细胞计数原理在单位时间内至少计数数万个细胞,不受人为因素影响,准确性较高。肿瘤患者化疗后骨髓造血功能受抑[3]时,导致外周血中的RET#中度减低。而肿瘤...
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应用流式细胞仪对不同病变胃粘膜中DNA含量的分析
...杂志,2000,8(9):983-987. 4庄亚华.胃癌细胞DNA含量的流式细胞计和显微分光光度计测定与比较.中华医学杂志,1989,69(7):365-368. 作者单位:132011吉林北华大学附属医院消化内科作者:曲智威祝红兵黄建文等
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人胚胎干细胞来源血管内皮细胞国内外研究进展
...学院干细胞研究中心Yamashita,-J-K.建立了一种带二维培养和流式细胞计数辅助细胞分选的新的胚胎干细胞分化系统。在该系统中,可以表达血管内皮生长因子受体-2(Flk1)的细胞为共同前体,系统地诱导内皮细胞、壁细胞和血细胞。...
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银屑病患者血清TNF-α、HA、LN浓度变化与细胞粘附分子的关系
...室温下反应20min,以PBS漂洗2次,弃上清液。 1.2.2.5 流式细胞计数 上机后计数2×106个细胞,荧光强度以对数放大,光散射数据存软盘,在Macintosh650型计算机上用CellQutstPlot软件(美国Becton-Dickinson公司产)分析数据。 1.2.3 ...
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孕妇外周血中胎儿红细胞的临床应用及其分离富集技术研究
...好的应用前景。20世纪90年代以来,随着单克隆抗体技术、流式细胞计数技术以及聚合酶链反应、荧光原位杂交技术及生物素特异结合等方法的发展,已使从孕妇外周血中分离、纯化胎儿细胞,并进行无创伤性产前诊断成为可能。虽...
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第三节 细胞调节因子
...导免疫组化或免疫细胞分析趋化作用或化学促进作用分析流式细胞计数 细胞因子分泌活性的抑制酶联免疫印迹(ELISPOT) 免疫分析反相溶血斑分析 放射免疫分析(RIA)细胞因子mRNA原位杂交 免疫放射光谱分析(IRMA) ...