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电泳法
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。(3)点样有湿点法和干点法。
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糖化血红蛋白
此酮胺结构能在碱性环境中与硝基四氮唑蓝(NBT)发生还原反应,生成物以1-脱氧-1-吗啉果糖(DMF)为标准参照物,进行比色测定。因为,其他翻译后修饰血红蛋白,例如醛亚胺型、甲酰化、乙酰化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和异常血红蛋白电荷交换也不同于正常的HbA0,所以已经列出了许多阳离子交换层析法的干扰因素。
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鲑鱼降钙素
将测氨基酸组分分析中测得的Asp、Glu、Pro、Gly、Val、Leu、His、Arg和Lys的摩尔数和除以20得出每个氨基酸残基的平均摩尔数(A),肽百分含量=343190VA/V1W%.其中W为水解供试品的重量,A为每个残基的平均摩尔数,V为水解物终体积,V1为分析时的进样体积。老年骨质疏松症:采用肌肉或皮下注射,十二周为一个疗程。
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乳酸脱氢酶同工酶
概述:乳酸脱氧酶有5种同工酶形式,即LDH1、LDH2、LDH3、LDH4、LDH5,可用电泳法进行分离。(6)LDH2、LDH3及LDH4均升高:大量血小板破坏(如:肺栓塞、大量输血等)、淋巴系统疾病(如:传染性单核细胞增多症、淋巴瘤及淋巴性白血病等)。相关疾病:急性心肌梗死、溶血性贫血、畸胎瘤、肺栓塞、传染性单核细胞增多症
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载脂蛋白AⅠ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(apoAⅠ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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载脂蛋白AⅡ
概述:载脂蛋白是血浆脂蛋白部分各类脂蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋白。6℃冰箱中可存放半年。④兔(或羊)抗人apoA-Ⅰ抗血清(效价不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。⑥染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~为了减少基质效应对浊度反应的影响,必须用定值血清作校准物。
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APOA-Ⅱ
概述:载脂蛋白是血浆脂蛋白部分各类脂蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋白。6℃冰箱中可存放半年。④兔(或羊)抗人apoA-Ⅰ抗血清(效价不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。⑥染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~为了减少基质效应对浊度反应的影响,必须用定值血清作校准物。
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血清碱性磷酸酶同工酶
概述:碱性磷酸酶用聚丙烯酰胺电泳法可分为六型,即ALP1、ALP2、ALP3、ALP4、ALP5、ALP6。血清碱性磷酸酶同工酶医学检查:分类:血液生化检查酶类测定取材:血液原理:同琼脂电泳法测定。(2)连续监测法:①应空腹采血。溶血标本酶活力下降,凡可络合酶的抗凝剂均可抑制酶活性。缓冲液种类不同,其参考区间差别较大。
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血红蛋白电泳
概述:各种血红蛋白具有不同的等电点,在一定pH值的缓冲液中可带不同电荷。④丽春红染液:丽春红S染料1.8g三氯醋酸26.8g磺柳酸26.8g蒸馏水加至1000ml此为贮存液。③漂洗液:乙醇(或甲醇)45ml冰醋酸5ml蒸馏水50ml④浸出液NaOH0.4mol/L。蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法:试剂:同醋酸纤维素膜微量血红蛋白电电泳。
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全血糖化血红蛋白
糖化血红蛋白占总血红蛋白的比率能反映测定前1~别名:全血糖化Hb全血糖化血红蛋白的医学检查:检查名称:全血糖化血红蛋白分类:临床血液检查红细胞取材:血液全血糖化血红蛋白的测定原理:测定糖化血红蛋白有4种方法,比色(浊)法、层析法、电泳法和放射免疫法。标本需用溶血素溶解血细胞后测定。相关疾病:糖尿病
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全血糖化Hb
糖化血红蛋白占总血红蛋白的比率能反映测定前1~别名:全血糖化Hb全血糖化血红蛋白的医学检查:检查名称:全血糖化血红蛋白分类:临床血液检查红细胞取材:血液全血糖化血红蛋白的测定原理:测定糖化血红蛋白有4种方法,比色(浊)法、层析法、电泳法和放射免疫法。标本需用溶血素溶解血细胞后测定。相关疾病:糖尿病
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注射用重组人促红素(CHO细胞)
2.1.2细胞库建立、传代及保存:由原始细胞库的细胞传代,扩增后冻存于液氮中,作为主细胞库;2.2原液:2.2.1细胞的复苏与扩增:从工作细胞库来源的细胞复苏后,于含灭能新生牛血清培养液中进行传代、扩增,供转瓶或细胞培养罐接种用。3.1.4.2高效液相色谱法:依法测定(2010年版药典三部附录ⅢB)。360nm处应无吸收峰。
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重组人促红素注射液(CHO细胞)
2.1.2细胞库建立、传代及保存:由原始细胞库的细胞传代,扩增后冻存于液氮中,作为主细胞库;2.2原液:2.2.1细胞的复苏与扩增:从工作细胞库来源的细胞复苏后,于含灭能新生牛血清培养液中进行传代、扩增,供转瓶或细胞培养罐接种用。3.1.4.2高效液相色谱法:依法测定(2010年版药典三部附录ⅢB)。360nm处应无吸收峰。
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首批淘汰三十五项临床检验项目、方法的规定
1991年12月20日卫生部令第18号。为贯彻执行中华人民共和国卫生部部长令(第18号),推动医药卫生科学技术进步,提高我国临床检验工作水平,为人民群众提供更好的医疗卫生服务,经科学研究、试点和专家反复论证,决定淘汰35项临床检验项目、方法。2、硫酸锌浊度试验;7、酚四溴酞磺酸钠潴留试验;8、脑脊液胶金试验;
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血清酸性磷酸酶同工酶
概述:酸性磷酸酶(ACP)有20种同工酶,临床测定的同工酶大致为两大类,一为前列腺酸性磷酸酶(PAP),是体内活性最高的一种酸性磷酸酶同工酶,另一类为非前列腺酸性磷酸酶。试剂:同电泳法测定。溶血标本酶活力下降,凡可络合酶的抗凝剂均可抑制酶活性。缓冲液种类不同,其参考区间差别较大。相关疾病:溶血性贫血、黄疸
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血清肌酸激酶同工酶
概述:肌酸激酶由三种同工酶的不同组合构成,即CK-MM、CK-MB、CK-BB。其他组织极微。血液中CK-MB明显升高提示心肌梗死,它比肌酸激酶总活性测定更能判断心肌损伤,并具有更高的特异性和敏感性。试剂:同电泳法测定。药物注射(氯丙嗪、苯巴比妥、青霉素、利血平、苯妥英钠、肾上腺素、多粘菌素B)肌肉损伤可检出CK-MM型。
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ApoCⅠ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅠ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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载脂蛋白CⅠ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅠ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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ApoCⅢ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅢ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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载脂蛋白CⅢ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅢ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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抗-ENA抗体
概述:核抗原有3个组成部分:组蛋白、DNA、可溶性核抗原,后者因可溶于磷酸盐缓冲液(或生理盐水)中。(3)间接免疫荧光法:实验基质多采用Hcp-2细胞或灵长类动物肝脏的冷冻切片,其原理可参看本章抗核抗体测定,分别出现各自特定的免疫荧光模式(表1)。因此抗SS-A和抗SS-B又被认为是干燥综合征的标志性抗体。
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β1-妊娠特异蛋白
概述:SP1是合胞体滋养层合成的一种妊娠特异蛋白,电泳位置在血清β球蛋白区带处,半衰期为30~避免溶血与脂类的干扰。SP1在血液中半衰期长,代谢缓慢,每日生理性波动范围小,故在妊娠期能较好的反映胎盘功能状况,并可通过其水平的改变了解胎儿生存状态。相关疾病:畸胎瘤、双胎妊娠、自然流产、多胎妊娠
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抗浸出性核抗原抗体
概述:核抗原有3个组成部分:组蛋白、DNA、可溶性核抗原,后者因可溶于磷酸盐缓冲液(或生理盐水)中。(3)间接免疫荧光法:实验基质多采用Hcp-2细胞或灵长类动物肝脏的冷冻切片,其原理可参看本章抗核抗体测定,分别出现各自特定的免疫荧光模式(表1)。因此抗SS-A和抗SS-B又被认为是干燥综合征的标志性抗体。
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脑脊液载脂蛋白
试剂:(1)包被缓冲液:0.02mol/L碳酸盐缓冲液pH9.5;(2)火箭免疫电泳法。(3)ELISA法。化验结果临床意义:脑脊液中载脂蛋白含量远低于血液水平,免疫组化试验证明大脑额叶的星形胶质细胞及某些神经元能合成ApoE,而CSF中的ApoA1与ApoCⅡ可能从血中渗入。但当患神经系统疾病时,可致血脑屏障功能受到损害。
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血红蛋白A2
别名:HbA2血红蛋白A2的医学检查:检查名称:血红蛋白A2分类:血液生化检查蛋白质测定取材:血液血红蛋白A2的测定原理:在血红蛋白溶液中含有多种成分,但它们各自的等电点及所带的电荷不同,电泳时的泳动速度亦不同,因此,可以将各种血红蛋白成分分离和鉴别。操作方法:常用醋酸纤维薄膜电泳法。
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5'-NPD
别名:5'-NPD;5'-NPDV5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶的医学检查:检查名称:5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶分类:血液生化检查酶类测定化验取材:血液5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶的测定原理:同聚丙烯酰胺电泳法测定。化验结果临床意义:出现Ⅴ区带:原发性肝癌(特异性)、乙型肝炎表面抗原阳性者(部分)。
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NPDV
别名:5'-NPD;5'-NPDV5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶的医学检查:检查名称:5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶分类:血液生化检查酶类测定化验取材:血液5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶的测定原理:同聚丙烯酰胺电泳法测定。化验结果临床意义:出现Ⅴ区带:原发性肝癌(特异性)、乙型肝炎表面抗原阳性者(部分)。
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5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶
别名:5'-NPD;5'-NPDV5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶的医学检查:检查名称:5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶分类:血液生化检查酶类测定化验取材:血液5'-核苷酸磷酸二酯酶同工酶的测定原理:同聚丙烯酰胺电泳法测定。化验结果临床意义:出现Ⅴ区带:原发性肝癌(特异性)、乙型肝炎表面抗原阳性者(部分)。
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血浆蛋白C抗原
概述:血浆蛋白C是一种由肝脏合成的双链糖蛋白,是维生素K的依赖因子,它在止血过程中有抑制血液凝固与激活纤溶的双重作用。试剂:同免疫火箭电泳法测定。升高:见于血栓性疾病和血栓前状态,如弥散性血管内凝血、深部静脉血栓形形形成、缺血性心脏病、急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、肾病综合征、妊娠后期等。
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脂蛋白和血清脂蛋白电泳
英文名:lipoproteinfractionation别名:血清脂蛋白正常值:醋酸纤维薄膜电泳法:乳糜微粒:0g/L(0mg/dl)极低密度脂蛋白:0.06~(2)继发性高脂蛋白血症与低脂蛋白血症的原因。化验取材:血液化验方法:脂类测定化验类别一:血液生化检查化验类别二:脂类测定参考资料:《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
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碱性磷酸酶同工酶
英文名:alkalinephosphataseisoenzymes别名:血清碱性磷酸酶同工酶正常值:(1)琼脂电泳法:正常出现:AKP2、AKP3、AKP4、AKP5。β球蛋白之间),AKPⅣ(β球蛋白位置)。化验取材:血液化验方法:酶类测定化验类别一:血液生化检查化验类别二:酶类测定参考资料:《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
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前清蛋白
英文名:albuminfractionprealbumin别名:血清前清蛋白,前白蛋正常值:(1)醋酸纤维薄膜电泳法:0.28~0.35g/L(2)免疫扩散法:男:233.5~化验取材:血液化验方法:蛋白质测定化验类别一:血液生化检查化验类别二:蛋白质测定参考资料:《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》营养不良肝硬化
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血浆蛋白
在生物化学研究中,曾经用盐析法将血浆蛋白分为白蛋白、球蛋白与纤维蛋白原三大类。这说明血浆蛋白包括了很多分子大小和结构都不相同的蛋白质。虽然消化道一般不吸收蛋白质,吸收的是氨基酸,但是,体内的某些细胞,特别是单核吞噬细胞系统,吞饮完整的血浆蛋白,然后由细胞内的酶类将吞入细胞的蛋白质分解为氨基酸。
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蛋白多态现象
蛋白多态现象是一种遗传的多态现象。在群体中,受等位基因决定的蛋白质在氨基酸排列等方面同时存在着两种以上的变异,称为蛋白多态现象。由于大都是用电泳法来检出变异的,所以这样的变异亦称为电泳变异(electrophoreticvariant)。蛋白多态是群体遗传学和分子进化的重要研究对象。
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同系色谱法
同系色谱法是针对链长而进行分离低(聚)核苷酸的方法。即对放射性同位素标记的低(聚)核苷酸混合物用阴离子交换纤维素(DEAE-纤维素)纸进行吸附,再用高浓度的低(聚)核苷酸混合液(同系混合物,homomixture)开展而分离。
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粘连蛋白
[纤]粘连蛋白fibronectin系在动物细胞表面、结缔组织以及血液中存在的亚单位分子量20—25万的糖蛋白。在粘连蛋白所具有的各种机能中,最熟知的是可促使培养细胞粘连在培养皿上并扩散开来的一种;在活体内的功能不能说已经完全清楚了,但认为与止血、巨噬细胞活化、细胞和结缔组织间的相互作用以及细胞的运动有关。
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N-甲基吗啉
健康危害:吸入本品蒸气或雾对呼吸道有刺激性。实验室监测方法:聚氨酯泡沫厂空气样品中N-甲基吗啉的测定:气相色谱法和等速电泳法的比较[刊,英]/HansenL.;69《分析化学文摘》1987.8.环境标准:前苏联车间空气中有害物质的最高容许浓度5mg/m3泄漏应急处理:迅速撤离泄漏污染区人员至安全区,并进行隔离,严格限制出入。
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氨基酸测定
概述:氨基酸是构成蛋白质的基本单位。含有二羧基一羧基的氨基酸为碱性氨基酸,如赖氨酸、精氨酸和组氨酸;含有一羧基一羧基的氨基酸为中性氨基酸,如甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苏氨酸和丝氨酸等。附注:(1)临床上测定血清或血浆的氨基酸,要避免食物消化吸收的影响,应在清晨空腹采血。
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血清乙酰乙酸
由于饥饿,糖尿病等原因,脂肪动员增加,肝中合成酮体量超过肝外组织利用的能力,体内出现酮体堆积,造成酮血症和酮尿症,引起血浆pH下降,导致酸中毒。血清乙酰乙酸医学检查:分类:血液生化检查氨基酸、氮化物、有机酸测定取材:血液原理:乙酰乙酸(AcAc)在β-羟丁酸脱氢酶(β-HBD)催化下,还原成β-羟丁酸。
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极低密度脂蛋白胆固醇
概述:极低密度脂蛋白胆固醇主要由肝脏合成,其重要的功能是运输内源合成的三酰甘油。第二反应(LDL胆固醇的显色反应)当加入R2反应液时,试剂中的CHE和CHO仅仅与LDL-C反应,LDL-C发生酶反应产生的过氧化氢,在POD参与下与HD-AOS和4-氨基安替比林氧化缩合成有色化合物。相关疾病:肥胖高脂蛋白血症肾病综合征糖尿病
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anti-U1 RNA
1972年Sharp等报道了一组新的风湿病,称其为混合性结缔组织病(MCTD),在这组患者血清中发现了抗U1RNP抗体。别名:anti-U1RNA抗U1RNP抗体的医学检查:检查名称:抗U1RNP抗体分类:免疫学检查自身抗体测定抗U1RNP抗体的测定原理:检测抗U1RNP抗体的方法与检测抗Sm抗体的方法相同。皮肌炎10%~20%,类风湿性关节炎5%~
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血清结合球蛋白
概述:触珠蛋白又称结合珠蛋白,是肝脏合成的一种α2球蛋白,约占血浆总蛋白的1%,能与血浆中的血红蛋白结合形成稳定的复合物。当发生溶血时,血浆中游离血红蛋白增多,与之结合的珠蛋白增多,而血浆触珠蛋白降低,这是一个很敏感的血管内溶血的指标。试剂:同电泳法测定。相关疾病:溶血性贫血、传染性单核细胞增多症
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血清结合珠蛋白
概述:触珠蛋白又称结合珠蛋白,是肝脏合成的一种α2球蛋白,约占血浆总蛋白的1%,能与血浆中的血红蛋白结合形成稳定的复合物。当发生溶血时,血浆中游离血红蛋白增多,与之结合的珠蛋白增多,而血浆触珠蛋白降低,这是一个很敏感的血管内溶血的指标。试剂:同电泳法测定。相关疾病:溶血性贫血、传染性单核细胞增多症
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单克隆丙种球蛋白
M蛋白是一组在类型、亚型、基因型和独特型相同的均一免疫球蛋白,多出现在多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤等疾病。化验结果临床意义:阳性:见于多发性骨髓瘤、重链病、恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、巨球蛋白血症、单核细胞白血病、冷球蛋白血症、继发性单克隆丙种球蛋白血症和良性M蛋白血症。
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注射用重组人干扰素α2a(酵母)
2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜培养基中培养。2.2.3.2在适宜的温度下进行发酵,应根据经批准的发酵工艺进行,并确定相应的发酵条件,如温度、pH值、溶解氧、补料、罐压、通气量、发酵时间等。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。
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轮状病毒性肠炎
概述: 状病毒(rotavirus)性肠炎主要发生在婴幼儿,常由A组 状病毒引起,发病高峰在秋季,故名“婴儿秋季腹泻”。粘膜双糖酶活性降低、肠腔内木糖及蔗糖水解并吸收障碍,被细菌分解而产生有机酸,致使肠内渗透压增加,大量水及电解质进入肠腔,肠吸收减少。感染后5d能测得血清特异性IgM抗体,2~
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注射用重组人干扰素α2b(酵母)
2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种子适宜培养基中培养。2.2.3.2在适宜的温度下进行发酵,应根据经批准的发酵工艺进行,并确定相应的发酵条件,如温度、pH值、溶解氧、补料、罐压、通气量、发酵时间等。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。
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裂解素
英文名:properdin(factorB)别名:B因子,BF正常值:火箭电泳法:0.1~35mg/dl)改良溶血法:64~(2)降低:肝硬化、慢性肾炎、系统性红斑狼疮(SLE)。化验取材:血液化验方法:细胞免疫测定化验类别一:免疫学检查化验类别二:细胞免疫测定参考资料:《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
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肌酸激酶同工酶
英文名:creatinekinaseisoenzymes别名:血清肌酸激酶同工酶正常值:(1)电泳法:占肌酸激酶CK-MB<0.05(CK-MB<5%)CK-MM>0.94~(2)酶速率法(37℃)CK-MB:0~化验结果意义:升高:急性心肌梗死(CK-MB>0.03,可达0.12~药物注射(氯丙嗪、苯巴比妥、青霉素、利血平、苯妥英钠、肾上腺素、多粘菌素B)肌肉损伤可检出CK-MM型。
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γ-谷氨酰转肽酶同工酶
英文名:gamma-GTPisoenzymes别名:血清γ-谷氨酰转肽酶正常值:(1)聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE):分13条区带:Ⅰ、Ⅰ’、Ⅱ、Ⅱ’、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶa、Ⅶb、Ⅷa、Ⅷb、Ⅷc。r-GTPⅠ’、Ⅱ、Ⅱ’区带为肝癌的特异性新带,其他肝胆病(转移性肝硬化、酒精性肝炎、胆管细胞癌)则不出现新区带。