血清游离脂肪酸

脂类测定 血液生化检查 化验及医学检查

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

xuè qīng yóu lí zhī fáng suān

2 英文参考

nonestesterified fatty acid

free fatty acid

3 概述

游离脂肪酸又称非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acid NEFA),血清中含量很少,如用小量血清标本测定必须采用灵敏的方法,并要避免脂肪水解产生的脂肪酸干扰

4 英文名

nonestesterified fatty acid;free fatty acid

5 别名

FFA,非脂化脂肪酸

6 血清游离脂肪酸医学检查

6.1 化验取材

血液

6.2 验方

脂类测定

6.3 化验类别

血液生化检查 > 脂类测定

6.4 取材

血液

6.5 原理

酶法测定血清游离脂肪酸分三步反应反应式如下:

(1)

(2)

(3)

6.6 试剂

以Boehringer mannheim游离脂肪酸测定试剂盒为例:

(1)缓冲液Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH调pH)。

(2)81mol/L ATP溶液:125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。

(3)10mmol/L MgCl2溶液

(4)10mmol/L pH6.5辅酶A溶液

(5)50g/L Triton X-100溶液。

(6)酰基辅酶A合成酶  8.4ku/L(用缓冲液Ⅰ配制)。

(7)2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)缓冲液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH调pH)。

(8)N-乙基顺丁烯二酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(9)4-氨基安替比林溶液,15mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(10)2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHB)溶液60mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(11)过氧化物溶液,2000u/ml。

(12)1g/L NaN3溶液

(13)酰基辅酶A氧化酶溶液:约120u/ml(用缓冲液Ⅰ配制)。

6.7 操作方法

(1)混合试剂:

①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。

②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。

③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。

上述三种混合试剂4℃避光保存稳定3天。

(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。

(3)加入空白血清标本各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1

(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2

6.8 正常值

酶法(37℃):400~900μmol/L。

6.9 化验结果临床意义

(1)升高:糖尿病糖原累积病甲状腺功能亢进症、褐色细胞瘤、肢端肥大症巨人症库欣综合征、重症肝损害、心肌梗死妊娠后期阻塞性黄疸、肝炎、肝硬化血色病等。

(2)降低:甲状腺功能减低症、艾迪生病、胰岛细胞瘤、脑垂体功能减退症、降糖药或胰岛素使用过量等。

6.10 附注

血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。

6.11 相关疾病

糖尿病甲状腺功能亢进症肢端肥大症库欣综合征黄疸肝硬化血色病血浆脂蛋白

编辑:banlang 审核:sun
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