第八节 PCR临床应用领域及特点
第八节 PCR临床应用领域及特点 一、PCR应用特点 1.操作简便目前PCR技术采用耐高温TaqDNA聚合酶,并且在有电脑控制的DNA扩增仪中进行,使操作大为简化,一次加入的酶即可满足反应全过程。DNA扩增仪能自动迅速升降温...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157:H7
摘要:目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157:H7的快速方法。方法根据GenBank公布O157:H7的rfbE保守序列,设计一对引物和改良分子信标探针,用FAM荧光剂标记探针的5‘端,建立改良分子信标实时PCR检测O157:H7的反应体系...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第5期PCRTroubleshootingguide
1.假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量,④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术RT-PCR法与血凝抑制法鉴定流感病毒的比较
摘要:目的比较逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)与血凝抑制法在流感病毒鉴定中的优劣,以期建立能快速、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法。方法用常规细胞培养法增殖病毒后,分别用RT-PCR反应法和常规血凝抑...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2005年第5卷第3期第二十二章 聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用--第一节 概述
第二十二章 聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用第一节 概述 聚合酶链反应或多聚酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR),又称无细胞克隆技术(“freebacteria”cloningtechnique),是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸PCR反应体系
标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug TaqDNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L ...
医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆
第一节概述PCR(PolymeraseChainReaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤:(1)变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链;(2)退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术肠出血性大肠埃希氏菌的多重PCR检测方法
肠出血性大肠埃希氏菌的多重PCR检测方法中华微生物学和免疫学杂志1999年第1期第19卷免疫检测作者:李怡 徐建国单位:李怡(现通讯地址:450003郑州,河南省人民医院省遗传研究所);徐建国(102206北京,中国预防医学科学院...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学分子信标用于结核分枝杆菌的均相荧光PCR检测
分子信标用于结核分枝杆菌的均相荧光PCR检测中华微生物学和免疫学杂志2000年第4期第20卷检测技术作者:李庆阁 梁基选 栾国彦 张洋单位:李庆阁(361005厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室,厦门大学生物学系);梁基...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学分子生物学试验方法探讨四-PCR常见问题
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及,④PCR循环...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术