3 注解
对各种生物结构的形态学研究是医学各领域研究的重要方面，尤其是定量形态学研究。对器官的整体结构水平形态学研究相对比较容易，比如用排水法测量肝脏的体积则可以清楚地了解正常肝脏与患有肝硬化病人肝脏的体积差别。但是随着科学的发展，研究者越来越关心人体在微观结构上的形态特征。任何组织结构，如细胞、细胞间质、细胞器以及某种染色阳性结构等，均为具有一定形状和空间分布的几何物体。结构的形态学描述包括两个方面：一是该结构的定性描述，二是其定量描述。免疫组织化学技术对组织细胞结构的定性研究是本书的重点内容之一，而对于这些已定性的微观结构定量研究则成了难题，因为通常只能通过二维切片来观察这些微观结构。定量研究的内容包括体积、表面积、线性结构的长度、颗粒结构的数量等，这些内容应如何进行研究呢? 20世纪80年代以来，丹麦科学家Gundersen建立的现代无偏体视学方法为微观形态结构准确定量研究提供了可靠方法。当我们谈到现代体视学方法时，需感谢Gundersen教授对体视学的贡献。因为当今在国际上广泛应用的现代体视学方法绝大部分是由以Gundersen教授为代表的丹麦科学家发明。体视学方法是一系列用于准确获得组织细胞和亚细胞结构三维形态定量特征的方法。在国际上，体视学方法被广泛应用于生物学、基础医学和临床医学。特别值得强调的是，新的体视学方法已与各类组织细胞的特殊染色、免疫组织化学及分子生物学图像(如原位分子杂交图像)等结合起来，用于对经过基因改造(转基因或基因剔除)的动物模型的定量研究中。因此，体视学方法已成为连接形态学、功能学和分子生物学研究的桥梁。
在实际应用水平上，体视学方法是一种基于二维切片观察而获得显微结构三维定量信息的有效手段。在统计概率的意义上讲，二维切片包含有三维结构的定量信息。但是，如果要使二维切片获得的信息真实地反映三维信息，在器官、切片、视野及空间方向上的抽样都必须满足一些基本原则。在运用当中这些抽样原则很容易实现。但同样也很容易失误。因此，基于以上所述．我们首先需明确二维切片与三维结构的关系以及如何有效获得二维信息，并在此基础上讨论获得体积、表面积、长度和数量等三维定量信息的方法。
体视学的优势在于它以三维定量数据来表达特征结构信息，先撇开体视学在统计学基础上确立的抽样原则不谈，我们所用来观察的二维切片首先应该是包含有特征物的。而不论通过什么窗口(如光学显微镜、电子显微镜和激光扫描共聚焦显微镜等)来获取二维切片图像，包含特征物的器官组织均称为参照空间，我们便是在一定参照空间内研究特征物的三维定量信息。例如要研究大鼠大脑皮质神经元，那么。大鼠大脑皮质则是参照空间。在进行体视学研究时，对于参照空间有明确要求，首先，参照空间中包含着特征物；其次，参照空间的边界清晰可辨；再次，参照空间易于获取。