4 尿C肽的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 化验取材
4.4 尿C肽的测定原理
放射性标记物125I-CP和标本（或标准品）中的C肽与有限的C肽抗体竞争性结合，达到平衡后，加入分离剂，测定沉淀物中放射活性，与标本中C肽含量成负相关。
4.5 试剂
（1）0标准品：含硫柳汞的BSA硼酸盐缓冲液（冻干）。用20ml蒸馏水或去离子水溶解，静置15～20min直至完全溶解。用前充分混匀，溶解后的试剂放－15℃以下保存。
（2）人胰岛素C-C-肽标准品：人胰岛素C-C-肽标准品溶于含稳定剂的BSA-硼酸盐缓冲液中（冻干）浓度范围0.6～20ng/ml，用方法B，还需一低浓度标准品0.15ng/ml，每瓶标准品用1ml蒸馏水或去离子水溶解，静置15～20min直至完全溶解，用前充分混匀，溶解后的试剂放－15℃以下保存。
（3）兔抗胰岛素C-C-肽血清：兔抗胰岛素C-C-肽血清溶于含硫柳汞的BSA-硼酸盐缓冲液中（冻干），已加绿色染料，用14ml蒸馏水或去离子水溶解，静置室温15～20min直至完全溶解，用前充分混匀。溶解后的试剂放－15℃以下保存。
（4）125I胰岛素C-C-肽：125I标记的人胰岛素C-C-肽溶于含硫柳汞的BSA-硼酸盐-EDTA缓冲液中（冻干）。用14ml蒸馏水或去离子水溶解，静置15～20min，直至完全溶解，用前充分混匀，溶解后的试剂放－15℃以下保存。
（5）羊抗兔抗体与沉淀混合液（GAR-PPT）：羊抗兔抗血清与PEG混合溶于含防腐剂的BSA-硼酸盐缓冲液中（冻干）。用35ml蒸馏水或去离子水溶解。充分混匀直至悬浊液混合均一，然后置室温至少30min并不断混匀，溶解后的试剂放－15℃以下保存。
（6）质控血清（质控-Ⅰ、质控-Ⅱ）：含NaN3和其它稳定剂（冻干），用1.0ml蒸馏水或去离子水溶解、混匀，置室温15～20min，直至完全溶解，用前充分混匀，将质控血清当作未知标本进行测定，每批的具体数值可从各试剂的质控图上找到。溶解后的试剂放－15℃以下保存。
（7）PEG（25%）。
2～8℃以下保存。
4.6 操作方法
（1）方法1：
①溶解冻干的试剂或将冻存的试剂彻底复融，操作温度不得高于25℃，用前轻轻混匀。
②将试管编号，均做双管。
③加入试剂：
A.总计数管：放置一旁至步骤④。
C.0标准品：100μl 0标准品＋200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。
D.胰岛素C-C-肽标准品（A-E）：100μl标准品＋200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。
E.质控和待测标本：100μl血清或尿标本＋200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。
④每管加200μl125I胰岛素C-C-肽。
⑤轻轻混匀，试管中不能产生气泡，2～8℃孵育16～24h。
⑥沉淀剂用前充分混匀，除总计数管外每管加500μl沉淀剂。
⑦轻轻混匀，试管中不得有气泡，20～25℃孵育15～20min。
⑧在20～25℃以760×g离心20min。
⑩用γ计数器计数沉淀和总计数管。
（2）方法2：
①溶解冻干的试剂或将冻存的试剂彻底复融。操作温度不得高于25℃，用前轻轻混匀。
②将试管编号，均做双管。
③加入试剂。
A.总计数管：放置一旁至步骤⑤。
C.0标准品：100μl 0标准品＋200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。
D.胰岛素C-C-肽标准品（A-E）：100μl标准品＋200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。
E.质控和待测标本：100μl血清或尿液标本＋200μl兔抗胰岛素C-C-肽血清。
④2～8℃孵育16～24h。
⑤每管加200μl125I胰岛素C-C-肽。
⑥轻轻混匀，不得有气泡，2～8℃孵育16～24h。
⑦沉淀剂用前充分混匀，除总计数管外，每管加500ml。
⑧轻轻混匀，不得有气泡，20～25℃孵育15～25min。
⑨在20～25℃以760×g离心20min。
⑪用γ计数器计数沉淀和总计数管。
4.7 正常值
45～117μg/24h。
4.8 化验结果临床意义
（2）降低：1型糖尿病。
4.9 附注
留尿送检时，并需注明是否用胰岛素治疗。