3 概述
甘蔗多酚是以甘蔗为原料,经压榨、过滤、提取,且除去多余糖分和盐分后得到甘蔗糖蜜,再以水、乙醇为提取溶剂,经过滤、真空浓缩、离子交换和喷雾干燥等工艺制成的粉体物质;或经过滤、真空蒸馏等工艺制成的液体物质。主要特征成分为总多酚。美国已将其列为“一般认为安全”物质”,欧盟允许其作为食品原料使用,澳大利亚与新西兰将其按照普通食品管理,我国台湾地区已将其作为食品原料使用。本产品推荐食用量为:总多酚含量为200g/kg的粉体推荐食用量为≤1克/天,总多酚含量为14.8g/kg的液体推荐食用量为≤10克/天,超过该含量的按照实际含量折算。
根据《中华人民共和国食品安全法》和《新食品原料安全性审查管理办法》规定,国家卫生健康委员会委托审评机构依照法定程序,组织专家对甘蔗多酚的安全性评估材料审查并通过。新食品原料生产和使用应当符合公告内容以及食品安全相关法规要求。鉴于甘蔗多酚在婴幼儿、孕妇和哺乳期妇女人群中的食用安全性资料不足,从风险预防原则考虑,上述人群不宜食用,标签及介绍中应当标注不适宜人群。该原料的食品安全指标按照公告规定执行。
8 推荐食用量
≤1 克/天(粉体);
≤10 克/天(液体)
(总多酚含量为200 g/kg 的粉体推荐食用量为 1 克/天,总多酚含量为14.8 g/kg的液体推荐食用量为 10 克/天,超过上述含量的按照实际含量折算)
9 质量要求
9.1 感官要求
项目 | 要求 | 检验方法 | |
粉体 | 液体 | ||
色泽和状态 | 深棕色粉末或液体 | 将适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中,在自然光线下观察其色泽和状态,嗅其气味。 | |
将适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中,在自然光线下观察其色泽和状态,嗅其气味。 | 具有类似单宁的清苦风味,无异嗅 | 具有甜而不涩的风味,无异嗅 | |
具有甜而不涩的风味,无异嗅 | 无肉眼可见异物 |
9.2 理化指标
项目 | 要求 | 检验方法 | |
粉体 | 液体 | ||
总多酚(以没食子酸计),g/kg ≥ | 200 | 14.8 | 附录A |
总黄酮(以芦丁计),g/kg ≥ | 50 | 4.4 | 保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则(2020 年版) |
原花青素,g/kg ≥ | — | 1.1 | 附录B |
可溶性固形物含量,% ≥ | — | 70 | 附录C |
水分,g/100 g ≤ | 6 | — | GB 5009.3-2016(第一法) |
相对密度(g/cm3) | — | 1.33~ 1.37 | GB 5009.2 |
pH | — | 4.2~5.0 | GB/T 6368 |
吸光度(A270 nm/A420 nm) | — | 10~25 | GB/T 22500 |
铅(Pb),mg/kg ≤ | 0.5 | GB 5009.12 | |
总砷(As),mg/kg ≤ | 0.5 | GB 5009.11 | |
展青霉素 | 不得检出 | GB 5009.185 |
9.3 微生物限量
项目 | 采样方案 a 及限量 | 检验方法 | |||
n | c | m | M | ||
菌落总数(CFU/g 或 CFU/mL) | 5 | 2 | 102 | 104 | GB4789.2 |
大肠菌群(CFU/g 或 CFU/mL) | 5 | 2 | 10 | 102 | GB4789.3平板计数法 |
霉菌和酵母(CFU/g或CFU/mL)≤ | 102 | GB4789.15 | |||
GB4789.15 | 5 | 0 | 0 | — | GB4789.4 |
金黄色葡萄球菌(CFU/g 或 CFU/mL) | 5 | 1 | 102 | 103 | GB4789.10a |
a样品的采样及处理按 GB 4789.1 执行。 |
9.4 食品添加剂
11 附录
11.1 附录A 总多酚测定方法分光光度法
A.1 原理
酚类化合物在碱性条件下被福林酚氧化,生成蓝色的化合物,在一定浓度范围内,吸光度与酚类化合物的含量成正比,符合朗伯-比尔定律。
A.2 仪器
A.2.1 紫外可见分光光度计
A.2.2 分析天平:感量 0.01 g、0.1 mg。
A.3 试剂和溶液
A.3.1 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682 规定的二级水。
A.3.2 福林酚试剂。
A.3.3 无水碳酸钠。
A.3.4 7%碳酸钠溶液:称取7 g(精确至0.01g)无水碳酸钠(A.3.3),用水溶解定容至100 mL。
A.3.5 没食子酸标准物质(CAS 号:149-91-7),纯度≥99.0%。
A.3.6 没食子酸标准储备液(200 mg/L):准确称取20mg(精确至 0.1 mg)没食子酸标准物质(A.3.5),用水溶解定容至 100 mL,摇匀。现用现配,避光保存。A.3.7 没食子酸标准工作液:准确吸取0 mL、0.04mL、0.08 mL、0.12 mL、0.16 mL、0.20 mL 的没食子酸标准储备液(A.3.6)分别加水至0.20 mL,摇匀,配制成浓度 0 mg/L、40 mg/L、80 mg/L、120 mg/L、160mg/L、200 mg/L 的系列标准工作液。现用现配。
A.4 样品测定
A.4.1 试样制备
A.4.1.1 液体试样
称取甘蔗多酚液体样品 2 g(精确至0.1 mg)于10mL容量瓶中,加水至刻度,混匀。移取1.0 mL 至50mL容量瓶中,加水定容并混匀,待测。
A.4.1.2 固体试样
称取甘蔗多酚粉体样品 1 g(精确至0.1mg)于烧杯中加 10 mL 水溶解后转移到 25 mL 容量瓶中,再用10mL润洗烧杯后合并到容量瓶中,加水至刻度,混匀。移取1.0mL 至 100 mL 容量瓶中,水定容并混匀,待测。
A.4.2 测定
准确吸取没食子酸系列标准工作液及样品液各0.2mL于刻度试管中,在试管中分别加入1.8 mL 蒸馏水、加入0.2 mL 福林酚试剂(A.3.2),摇匀,反应5min,待试管中颜色变为浅绿色,加入 2 mL 7%碳酸钠溶液(A.3.4),加入 0.8 mL 蒸馏水,摇匀。室温下放置90 min,用10mm比色皿,在 750 nm 波长下用分光光度计测定吸光度。根据没食子酸系列标准工作液(A.3.7)的吸光度(A)与其浓度,制作标准曲线。
A.5 结果计算
总多酚(以没食子酸计)的含量按下式计算:
式中:
X ——样品中总多酚的含量(以没食子酸计),单位为克每千克(g/kg);
C ——由标准曲线计算得出的待测液中没食子酸的浓度,单位为毫克每升(mg/L);
V ——定容体积,单位为毫升(mL);
K ——样品稀释倍数;
m ——取样量,单位为克(g);1000 ——单位毫升(mL)换算为升(L)的系数。
计算结果保留三位有效数字。
A.6 精密度
重复性条件下两次独立测定结果的绝对差值不得大于算术平均值的 10%,取两次测定值的平均值为结果。
11.2 附录B 原花青素测定方法分光光度法
B.1 原理
原花青素经过热酸处理后,生成深红色的花青素离子,用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子,计算试样中原花青素含量。
B.2 仪器和设备
B.2.1 分光光度计,配 1 cm 比色杯,波长范围110nm~900 nm。
B.2.2 超声波提取机。
B.2.3 涡旋混合仪。
B.2.4 分析天平:感量 0.1 mg。
B.2.5 安瓿瓶:10 mL。
B.2.6 封口钳。
B.2.7 容量瓶:10 mL、50 mL、100 mL。
B.3 试剂和溶液
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682 规定的二级水。
B.3.1 甲醇。
B.3.2 正丁醇。
B.3.3 盐酸:含量为 35%~37%。
B.3.4 十二水合硫酸铁铵。
B.3.5 标准品:原花青素标准品,纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
B.3.6 盐酸-正丁醇溶液:量取正丁醇50 mL 于100mL容量瓶中,加入盐酸 5 mL,用正丁醇定容至刻度,摇匀,备用。
B.3.7 2 mol/L 盐酸溶液:量取盐酸20 mL 于烧杯中,加 100 mL 水,摇匀,备用。
B.3.8 硫酸铁铵溶液:称取硫酸铁铵2.0 g(精确至0.01g)于三角瓶中,加 2 mol/L 盐酸溶液50 mL,放置于沸水浴中,至其全部溶解后,取出放置至室温,将其转移至100 mL 容量瓶中,用 2 mol/L 盐酸溶液定容至刻度。
B.3.9 原花青素标准储备液(1.0 mg/mL):准确称取原花青素标准品 10 mg(精确至0.1 mg)于10mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,即得浓度为1.0mg/mL标准储备液,溶液现用现配。
B.3.10 原花青素标准系列工作液:准确量取原花青素储备液 0.0 mL、0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL、1.0mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL 分别置于10 mL 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得到浓度为0 μg/mL、10.0μg/mL、25.0 μg/mL、50.0 μg/mL、100 μg/mL、150μg/mL、200 μg/mL、250 μg/mL 的标准系列工作溶液。
B.4 分析步骤
B.4.1 试样制备
根据样品含量,称取样品10 mg~100mg(精确至0.1 mg)置 50 mL 容量瓶中,加入30 mL 甲醇,超声溶解(功率 250 W,频率 50 kHz)20 min,放至室温后,加甲醇至刻度,摇匀,离心或放至澄清后取上清液作为供试品溶液,标记为 V。如样品原花青素含量较高,应对样品进行适当稀释再测定,稀释倍数标记为k。
B.4.2 测定
B.4.2.1 标准曲线的绘制
吸取原花青素标准系列工作液各1.0 mL,置于安瓿瓶中,准确加入盐酸-正丁醇溶液(B.3.6)6.0mL,硫酸铁铵溶液(B.3.8)0.2 mL,混匀,用封口钳将其密封,置沸水中加热 40 min 后,取出,立即置冰水中冷却至室温,于546 nm 波长处测吸光度,显色在1 小时内稳定。以吸光度为纵坐标,原花青素浓度为横坐标绘制标准曲线。
准确吸取 B.4.1 项下的试样溶液1.0 mL,置于安瓿瓶中,然后按照标准曲线制作步骤执行。以相应试剂为空白。测定样品吸光度,根据标准曲线计算试样溶液中原花青素的含量。
B.5 结果计算
式中:
c——根据标准曲线获得的试样溶液中原花青素含量,单位为微克每毫升(μg/mL);
c0——空白溶液中原花青素含量,单位为微克每毫升(μg/mL);
k——样品稀释倍数;
m——取样量,单位为毫克(mg)。
计算结果保留三位有效数字。
B.6 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。
11.3 附录C 可溶性固形物测定方法折光法
C.1 仪器和设备
折光计:折射率测量范围1.3000~1.7000,折射率最小分度0.0005,可溶性固形物含量测量范围0%~95%,可溶性固形物含量最小分度 0.1%。
C.2 测定步骤
用水校正折光计,20 ℃时蒸馏水的折射率为1.33299,若温度不在 20 ℃,可查蒸馏水折射率表,调节仪器的示值与该温度对应的折射率相符。打开折光仪的棱镜,擦干镜面,滴加适量混合均匀的甘蔗多酚液体样品于棱镜上,迅速闭合棱镜,待样液温度稳定后,转动棱镜手轮,使视野中明暗分界线恰好在十字交叉线中心,读取样液折光率及温度。
C.3 结果计算
式中:
a ——t ℃时折光率更正系数,由测定可溶性固形物含量时的温度值查折光率-温度改正表获得,见附录D。
取平行测定值的算术平均值为测定结果,保留小数点后两位。
C.4 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于0.1%。
11.4 附录D 折光率-温度改正表表
表D.1 折光率-温度改正表温度℃